MT4細胞（人T細胞白血病細胞）

MT4細胞來源於(yu) 一名50歲的日本患有成人T細胞白血病（ATL），伴有全身性淋巴結腫大和肝脾腫大的男性，通過將患者的外周血單核細胞與(yu) 男性臍帶淋巴細胞共培養(yang) 建立。MT4細胞具有T細胞特征，並攜帶人類T細胞白血病病毒1型（HTLV-1），能夠支持人類免疫缺陷病毒（HIV）的複製和生長。在實驗室中處理MT-4細胞時，需遵循生物安全三級（BSL-3）標準，以確保操作的安全性。

MT4細胞特性特征

• MT4細胞攜帶人類T細胞淋巴病毒1型(HTLV-1)
  

• MT4細胞表達T細胞相關(guan) 抗原CD3和CD7，但CD1a和CD8陰性

• 部分MT4細胞表達CD5，表達水平低於(yu) 75%

• 具有淋巴母細胞形態學特征、以懸浮生長方式存在

• MT4細胞能夠支持人類免疫缺陷病毒(HIV)的生長

• MT4細胞是一種男性細胞係，ECACC的STR分析證實存在Y染色體(ti)

MT4細胞參數表

MT4人T細胞白血病細胞培養教程

MT4細胞複蘇

• 從(cong) -80°C或液氮儲(chu) 存中取出凍存的MT4細胞，迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。解凍過程應快速進行，通常在1-2分鍾內(nei) 完成，以避免MT4細胞損傷(shang) 。

• 解凍後，將MT4細胞懸液轉移至含有10 mL RPMI-1640培養(yang) 基的離心管中，並輕輕混勻。

離心與重懸

• 將MT4細胞以300 x g的速度離心5分鍾，以去除凍存保護劑（如DMSO）。

• 棄去上清液，並將MT4細胞重懸於(yu) 10 mL新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基中。

MT4細胞接種

• 將重懸後的MT4細胞轉移至一個(ge) 預熱的培養(yang) 瓶中，並補充適量的培養(yang) 基至25-50 mL。

• 將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

MT4細胞培養與維護

• 每2-3天觀察MT4細胞的生長狀態。根據細胞密度和培養(yang) 基的顏色判斷是否需要更換培養(yang) 基。通常，當培養(yang) 基pH值降低時（培養(yang) 基變黃），應更換50%的培養(yang) 基以維持MT4細胞的最佳生長狀態。

• 當MT4細胞生長至70-80%匯合時，進行傳(chuan) 代。

MT4細胞傳代

• 吸去舊培養(yang) 基，用PBS洗滌MT4細胞，然後以300 x g離心5分鍾。

• 棄去上清後，用適量的培養(yang) 基重懸MT4細胞，並按1:2至1:4的比例將MT4細胞接種到新的培養(yang) 瓶中進行繼續培養(yang) 。

MT4細胞凍存（如需要）

• 當MT4細胞生長至適當密度時，可進行凍存。將MT4細胞以300 x g離心，重懸於(yu) 含10% DMSO和90% FBS的凍存液中。

• 將MT4細胞分裝至凍存管中，先置於(yu) -80°C保存24小時，然後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• 生物安全性：MT4細胞攜帶HTLV-1，並支持HIV的生長，因此在處理MT4細胞時，應嚴(yan) 格遵循生物安全三級（BSL-3）標準，在生物安全櫃中進行操作，以防止感染和汙染。

• MT4細胞監控：定期檢查MT4細胞形態，觀察其懸浮生長狀態和細胞密度，確保MT4細胞的健康和活力。

• 培養(yang) 環境穩定性：確保培養(yang) 箱的溫度保持在37°C，CO2濃度穩定在5%。避免頻繁打開培養(yang) 箱門，以維持穩定的培養(yang) 環境。