
J.gamma1 人急性T細胞白血病細胞
- 來源:T細胞,急性T細胞白血病
- 細胞特征:懸浮生長, 淋巴母細胞
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:J.gamm1細胞係是Jurkat的E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamm1)缺陷突變體(ti)
J.gamma1人急性T細胞白血病細胞來源於(yu) 患有急性T細胞白血病的男性患者的T細胞組織。J.gamma1細胞係是通過使用移碼誘變劑ICR-191對野生型Jurkat細胞進行誘變,並分離出對滲透酸鹽反應不能增加鈣的克隆。在P98克隆上重複選擇程序建立的J.gamma1細胞係。
J.gamma1人急性T細胞白血病細胞特性
J.gamm1細胞係是Jurkat的E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamm1)缺陷突變體(ti) 。
J.gamma1.WT衍生物有與(yu) Jurkat細胞係相當的水平穩定表達PLC-gamma1。
γ1亞(ya) 係不含可檢測的PLC-gamm1蛋白。γ1細胞中PLC-gamm1表達的缺乏導致T細胞受體(ti) (TCR)鈣動員和活化T細胞核因子(NFAT)活化的嚴(yan) 重缺陷。
通過用野生型PLC-gamm1表達載體(ti) 轉染P98細胞來逆轉這些轉錄缺陷。
J.gamma1人急性T細胞白血病細胞參數表
細胞名稱 | J.gamma1人急性T細胞白血病細胞 |
別稱 | Jgamma1細胞;Jurkat gamma1細胞 |
來源 | 急性T細胞白血病患者的T細胞組織 |
細胞係 | Jurkat E6-1克隆的磷脂酶C-gamma1(PLC-gamma1)缺陷突變體 |
細胞描述 | - 缺乏可檢測的PLC-gamma1蛋白,導致TCR鈣動員和NFAT活化嚴重缺陷 |
- 可通過轉染野生型PLC-gamma1表達載體逆轉這些轉錄缺陷 | |
細胞形態 | 淋巴細胞樣 |
生長方式 | 懸浮生長 |
倍增時間 | 每周2至3次 |
細胞代數 | 10代以內 |
培養基 | RPMI-1640+10%胎牛血清(FBS)+1%雙抗生素(P/S) |
培養條件 | 溫度: 37℃ |
氣相: 95%空氣 + 5%二氧化碳 | |
濕度: 70%-80% | |
凍存條件 | 凍存液: 90% FBS + 10% DMSO 或使用非程序凍存液 |
儲存溫度: 液氮氣相 | |
支原體檢測 | 陰性 |
用途 | 僅限於科學研究,不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
應用 | 3D細胞培養和免疫係統紊亂研究 |
運輸方式 | 常溫運輸(T25培養瓶)或幹冰運輸(凍存管) |
安全性 | 所有腫瘤細胞和病毒轉染的細胞均視為(wei) 有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內(nei) 操作 ,操作者需注意自身防護 |
保藏機構 | ATCC; CRL-2678 |
培養教程
J.gamma1 人急性T細胞白血病細胞
細胞傳代
當J.gamma1細胞生長至覆蓋培養(yang) 瓶的80%麵積時,首先棄去25cm²培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液,使用PBS清洗細胞一次。
向培養(yang) 瓶中加入約1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後加入5ml完全培養(yang) 液終止消化。輕輕吹打細胞使之脫落,然後將懸液轉移至15ml離心管中,以1000rpm離心5分鍾。
棄去上清,沉澱的J.gamma1細胞用1-2ml完全培養(yang) 基重懸,然後按1:2的比例進行分瓶傳(chuan) 代。最後將傳(chuan) 代好的細胞放入37℃、5%CO₂的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞凍存
當J.gamma1細胞生長至覆蓋培養(yang) 瓶的80%麵積時,棄去25cm²培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液,使用PBS清洗細胞一次。
向培養(yang) 瓶中加入約1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後加入完全培養(yang) 液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然後將懸液轉移至15ml離心管中,以1000rpm離心5分鍾。
使用9:1的FBS比例混合凍存液,重懸J.gamma1細胞,並置於(yu) 凍存管中。
首先將細胞凍存管放置於(yu) -20℃冷凍1.5小時,然後移入-80℃過夜。24小時後轉入液氮中進行長期保存。可以使用程序降溫盒直接放入-80℃。
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出J.gamma1細胞凍存管(注意佩戴防爆管麵具),快速置於(yu) 37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶。用75%的酒精擦拭凍存管外壁。
將凍存管中的J.gamma1細胞移至含6ml完全培養(yang) 基的15ml離心管中,以1000rpm離心5分鍾。
棄去上清,沉澱用6ml完全培養(yang) 基重懸J.gamma1細胞,接種到25cm²培養(yang) 瓶中。將培養(yang) 瓶放入37℃、5%CO₂的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11, 12 |
D13S317 | 8, 12 |
D16S539 | 11 |
D5S818 | 9 |
D7S820 | 8, 12 |
THO1 | 6, 9.3 |
TPOX | 8, 10 |
vWA | 18, 19 |