
RS4;11細胞係是來源於(yu) 一名32歲白人女性急性B淋巴細胞白血病(ALL)患者的骨髓,由JH Kersey保藏,已成為(wei) 急性淋巴細胞白血病研究的關(guan) 鍵模型。
RS4;11細胞表現為(wei) 圓形,適合於(yu) 懸浮培養(yang) 。RS4;11細胞缺乏表麵和細胞質免疫球蛋白,並且在CALLA(CD10)上呈陰性,在B細胞相關(guan) 疾病研究中具有重要的實驗價(jia) 值。
RS4;11細胞特性特征
RS4;11細胞係具有特征性的染色體(ti) 異常,具體(ti) 為(wei) t(4;11)(q21;q23),同時伴隨7號染色體(ti) 長臂的等位基因。
抗原表達:HLA-DR+(陽性)、CD9+(陽性)、CD24+(陽性)
免疫標誌物:缺乏表麵和細胞質免疫球蛋白、對CALLA(CD10)呈陰性、對髓過氧化物酶和氯乙酸酯酶呈陰性、不被蘇丹紅染色、對末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)呈強陽性
RS4;11細胞參數表
細胞名稱 | RS4;11人急性淋巴細胞白血病細胞 |
別稱 | RS4-11; RS4:11; RS 4;11; RS(4;11); RS411 |
種屬來源 | 人 |
年齡/性別 | 32歲/女 |
組織來源 | 骨髓 |
疾病類型 | 急性淋巴細胞白血病(ALL) |
形態特征 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
倍增時間 | ~60小時 |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳;溫度:37℃;濕度:70%-80% |
凍存條件 | 90%胎牛血清 + 10%DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測 | 陰性 |
生物安全等級 | 1 |
抗原表達 | HLA-DR+;CD9+;CD24+ |
免疫標誌物 | CALLA (CD10)陰性;TdT強陽性 |
染色體異常 | t(4;11)(q21;q23) |
備注 | 懸浮細胞,注意離心收集細胞懸液,不可直接倒掉培養液。僅限於科學研究,不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
培養教程
RS4;11人急性B淋巴細胞白血病細胞培養教程
傳代步驟
當細胞團長至可見大小,且在T25瓶中有多個(ge) 小團時,應進行RS4;11細胞的傳(chuan) 代;如在20倍視野下觀察到4-5個(ge) 大細胞團,應立即傳(chuan) 代。
使用巴氏吸管輕輕吸取上清液,避免細胞浮起,並添加等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基。
或者將全部培養(yang) 液轉移至離心管中,以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清後,使用新鮮培養(yang) 基輕輕重懸RS4;11細胞,然後重新種瓶。
加入雙倍體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基,輕輕吹打以分散大細胞團,但避免劇烈吹打形成單細胞懸液。
將混勻的RS4;11細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中。
凍存步驟
將準備好的RS4;11細胞懸液分裝到凍存管中。
將凍存管放入-80℃冰箱中冷凍過夜。
隨後轉移至液氮儲(chu) 存。
複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中解凍(約1-2分鍾)。
解凍後立即加入5倍體(ti) 積的完全培養(yang) 基以稀釋DMSO。
將RS4;11細胞懸液轉移至離心管中,1000 rpm離心5分鍾,棄去上清。
加入新鮮培養(yang) 基輕輕重懸後轉移至新的培養(yang) 瓶中。
在37℃、5% CO₂條件下培養(yang) ,並定期觀察細胞狀態。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20,25 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 12 (DSMZ=ACC-508) |
12,13 (AddexBio=C0003012/4671; ATCC=CRL-1873; COG; Cosmic-CLP=909703; PubMed=20922763; PubMed=25877200) | |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12,16 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 23,24,25 (DSMZ=ACC-508) |
24,25 (ATCC=CRL-1873; COG; PubMed=25877200) | |
Penta D | 8.4,10 |
Penta E | 5,7 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 14,17 |