
SUPB15細胞(人Ph+急淋白血病細胞)
- 來源:白血病
- 細胞特征:懸浮細胞,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:IMDM+20% FBS(澳洲胎牛)+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S
- 其他:SUP-B15細胞表達多個(ge) B細胞標記物,如β-2微球蛋白、Leu12、My7(CD13)、OKT9(CD10),但不表達T細胞標記物
SUP-B15是一株人源的Ph+急性淋巴細胞白血病(ALL)B淋巴母細胞係,是從(cong) 一位8歲白人男童的骨髓樣本中分離。SUPB15細胞係廣泛應用於(yu) 免疫學和相關(guan) 疾病的研究。SUP-B15細胞核型為(wei) 46, XY,具有以下染色體(ti) 標記:t(9;22)(q34;q11) 費城染色體(ti) ,t(4;14)(p11;q24),及der(4)t(1;4)。
SUP-B15細胞係主要由懸浮生長的圓形B淋巴母細胞組成。由於(yu) 其Ph+表型,在急性淋巴細胞白血病的生物學特性及其對化療藥物敏感性研究中被廣泛使用。
SUPB15細胞特性特征
SUP-B15細胞表達多種B譜係標記,但不表達T細胞標記。
陽性表達:CD10+、CD13+、CD38+、CD71+、HLA-DR+。
陰性表達:CD1a-、CD2-、CD3-、CD4-、CD5-、CD8-、sIg-(表麵免疫球蛋白)。
免疫球蛋白:SUPB15細胞內(nei) 表達免疫球蛋白(Ig),顯示出其B細胞的特性。
SUPB15細胞對表麵免疫球蛋白和EB病毒(EBV)檢測也呈陰性。
對CB1、Leu 1(CD5)、Leu2(CD8)、Leu3(CD4)、Leu4(CD3)、Leu5(CD2)、亮氨酸6(CD1a)、Leu9、Leu M1(CD15)、My9(CD33)、表麵免疫球蛋白(sIg-)和愛潑斯坦-巴爾病毒呈陰性。
血管新生相關(guan) 基因:SUPB15細胞中VEGF、Flt-1、PlGF、Ang1、Ang2和IGF-1等基因的表達相對較低,這些基因在血管新生的啟動及整個(ge) 血管形成過程中起重要作用。
藥物敏感性:SUPB15細胞對化療藥物(如長春新堿、柔紅黴素、左旋門冬酰胺酶及地塞米鬆)表現出不同程度的敏感性,尤其對柔紅黴素和地塞米鬆的敏感性較高。
SUPB15細胞參數表
細胞名稱 | SUPB15細胞(人Ph+急淋白血病細胞) |
別名 | Sup-B15; SUPB-15; SUPB15; SupB15; SupB15W; SupB15WT |
來源 | 一名8歲白人男性急性淋巴細胞白血病患者骨髓 |
細胞形態 | 圓形 |
生長狀態 | 懸浮生長 |
純度規格 | 99.99% |
培養基 | IMDM+20% FBS(澳洲胎牛)+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S |
培養條件 | 37°C,5% CO₂ |
保存條件 | 常溫培養或液氮凍存 |
細胞傳代 | 每3-4天傳代一次,細胞密度達到70%-80%時傳代 |
細胞密度 | 1-2 x 10^6 cells/mL |
免疫球蛋白表達 | 細胞質中表達免疫球蛋白 |
相關基因表達 | VEGF、Flt-1、PlGF、Ang1、Ang2、IGF-1等 |
抗原陽性 | CD10+、CD13+、CD38+、CD71+、HLA-DR+ |
抗原陰性 | CD1a-、CD2-、CD3-、CD4-、CD5-、CD8-、sIg- |
藥物敏感性 | 對柔紅黴素、左旋門冬酰胺酶和地塞米鬆敏感 |
IC50值 | 柔紅黴素:26.3 µmol/L,地塞米鬆:較高敏感 |
遷移侵襲能力 | 遷移和侵襲能力相對較低 |
細胞凋亡率 | 在藥物處理後早期凋亡率和晚期凋亡率分別為9.47%和4.77% |
細胞聚集 | 與基質細胞共培養時呈現聚集生長趨勢 |
培養教程
SUPB15人Ph+急淋白血病細胞培養教程
細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出凍存的SUPB15細胞管,迅速在37°C水浴中融化,確保迅速操作以保護SUPB15細胞活性。
將融化的SUPB15細胞緩慢加入預熱的完全培養(yang) 基中,輕輕混勻。
以100-150 g離心5分鍾,棄去上清液以保留SUPB15細胞。
使用5 mL預熱的培養(yang) 基重懸SUPB15細胞。
將重懸的SUPB15細胞接種到T25培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C,5% CO₂培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
常規傳代操作
SUPB15細胞通常每3-4天傳(chuan) 代一次,細胞密度達到0.5-1 x 10^6 cells/mL時進行傳(chuan) 代。
輕輕吹打SUPB15細胞懸液使其均勻分布。
取適量SUPB15細胞懸液,100 g離心5分鍾,棄去上清。
使用適量預熱培養(yang) 基重懸SUPB15細胞,並根據所需接種密度調整懸液體(ti) 積。
將重懸後的SUPB15細胞接種至新培養(yang) 瓶中,繼續在37°C,5% CO₂條件下培養(yang) 。
重要注意事項
SUPB15細胞對胎牛血清的質量要求較高,建議使用優(you) 質胎牛血清以確保SUPB15細胞的健康生長。
複蘇後的SUPB15細胞生長較慢,應優(you) 先選用複蘇良好的細胞進行實驗。
培養(yang) 基中需額外添加0.05 mM β-巰基乙醇,以提高SUPB15細胞的增殖活性。
SUPB15細胞密度不宜超過2 x 10^6 cells/mL,過高密度可能影響其生長狀態。
培養(yang) 過程中如SUPB15細胞出現團塊,可輕輕吹打以散開,確保其懸浮生長狀態。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 11,14 |
D13S317 | 8,14 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28,31 |
FGA | 19,20 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 21 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 15,17 |