MEL細胞係（小鼠紅白血病細胞係）

MEL細胞係來源於(yu) 小鼠紅白血病，是一種經過永生化處理的細胞係。MEL細胞最初從(cong) 小鼠的骨髓或外周血中分離得到，並經過特殊處理以便在實驗室環境下長期培養(yang) 和傳(chuan) 代。

MEL細胞具有以下特征

• 細胞形態：呈淋巴母細胞樣，通常為(wei) 圓形。

• 生長特性：以懸浮方式生長，即細胞在培養(yang) 液中漂浮，而非附著在培養(yang) 瓶底部。

• 分化潛能：二甲基亞(ya) 碸（DMSO）DMSO可誘導MEL小鼠紅白血病細胞向紅係分化。

• 應用：廣泛用作研究紅細胞分化機製和血紅蛋白合成的模型。

• 染色體(ti) 數目：細胞染色體(ti) 數目在35到44之間

MEL細胞係參數表

MEL小鼠紅白血病細胞係培養教程

MEL細胞傳代方法

• 觀察細胞密度：當MEL細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 輕輕混勻：輕輕混勻培養(yang) 皿中的MEL細胞懸液。

• 收集細胞懸液：將MEL細胞懸液收集到離心管中，900 rpm離心3-5分鍾。

• 棄去上清：棄去上清液。

• 重懸細胞：加入適量新鮮完全培養(yang) 基，輕輕重懸MEL細胞。

• 分配細胞：按1:2到1:4的比例將MEL細胞懸液分配到新的培養(yang) 容器中。

• 補足培養(yang) 基：補足培養(yang) 基至適當體(ti) 積。

• 繼續培養(yang) ：將培養(yang) 容器放回37℃，5% CO2培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

MEL細胞注意事項

• 懸浮生長：MEL細胞為(wei) 懸浮生長，但部分MEL細胞可能會(hui) 輕微貼壁。如遇此情況，輕輕晃動培養(yang) 基或輕柔吹打即可使MEL細胞脫落。

• 輕柔操作：操作時動作要輕柔，避免產(chan) 生過多氣泡，以免影響MEL細胞狀態。

• 避免胰酶：不需要使用胰酶消化MEL細胞。

• 調整比例：傳(chuan) 代時，具體(ti) 分配比例可根據MEL細胞生長速度和密度進行調整。

MEL細胞凍存方法

• 收集細胞：收集對數生長期的MEL細胞，900 rpm離心3-5分鍾。

• 棄去上清：棄去上清液，用預冷的凍存液重懸MEL細胞。

• 調整濃度：調整MEL細胞濃度至200-300萬(wan) /ml。

• 分裝：每管分裝1 ml MEL細胞懸液。

• 程序降溫：將凍存管放入程序降溫盒，-80℃冰箱中過夜。

• 長期保存：次日轉入液氮中長期保存。

MEL細胞複蘇方法

• 解凍：將凍存管從(cong) 液氮中取出，迅速放入37℃水浴中快速解凍。

• 轉移細胞：將解凍的MEL細胞懸液轉移到離心管中。

• 緩慢滴加培養(yang) 基：緩慢滴加預溫的完全培養(yang) 基，輕輕混勻MEL細胞。

• 離心：900 rpm離心5分鍾，去除DMSO。

• 重懸細胞：棄去上清，用新鮮完全培養(yang) 基重懸MEL細胞。

• 培養(yang) ：將MEL細胞懸液轉移到培養(yang) 容器中，補足培養(yang) 基，放入37℃，5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

避免MEL細胞附著瓶底的方法

• 收集細胞：將培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中的MEL細胞懸液收集到離心管中。

• 離心：在900 rpm條件下離心3-5分鍾。

• 棄去上清：小心棄去上清液。

• 重懸細胞：加入1-2 ml新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打混勻MEL細胞懸液。

• 分配細胞：將MEL細胞懸液按1:2到1:4的比例分配到新的培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中，每個(ge) 新容器中加入適量培養(yang) 基。

• 輕輕晃動：如果發現部分MEL細胞附著在瓶底，輕輕晃動培養(yang) 基或輕柔吹打，使MEL細胞脫落。