
BS-C-1細胞(非洲綠猴腎細胞)
- 來源:腎
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:對多種病毒敏感,包括: 脊髓灰質炎病毒、SV40病毒、水泡性口炎病毒
BS-C-1細胞係是一種具有上皮形態的細胞,來源於(yu) 非洲綠猴(學名:Cercopithecus aethiops)的腎髒組織。BS-C-1細胞係於(yu) 1961年由Hopps等人通過原代培養(yang) 並篩選而建立,表現出自發永生化的特性,適用於(yu) 長期培養(yang) 。在病毒學和藥物篩選方麵廣泛應用,特別在病毒敏感性方麵表現突出。BS-C-1細胞係是合適的轉染宿主,可用於(yu) 檢測病毒,適合SV40載體(ti) 轉染的非洲綠猴腎細胞係。
BS-C-1細胞特性特征
染色體(ti) 頻率:2n=60,具有一條大型亞(ya) 中部中心標記染色體(ti) 。
染色體(ti) 特征:具備一條大型亞(ya) 中部標記染色體(ti) ,部分細胞含有次級收縮染色體(ti) 和雙著絲(si) 粒染色體(ti) 。
基因表達:主要表達角蛋白,表明其上皮細胞的特性。
免疫組化結果:通過免疫過氧化物酶染色,角蛋白呈陽性。
病毒易感性:對1型脊髓灰質炎病毒(Poliovirus type 1)敏感、對SV40病毒(SV40 virus)敏感、對水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus)敏感,包括奧賽(印第安納州)和格拉斯哥(印第安納州)的株係
BS-C-1細胞參數表
細胞名稱 | BS-C-1細胞(非洲綠猴腎細胞) |
細胞別稱 | BSC-1; BSC1; GMK, BSC-1; Biologics Standards-Cercopithecus-1 |
來源 | 非洲綠猴(Cercopithecus aethiops)腎髒組織 |
建立時間 | 1961年 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞類型 | 自發永生化細胞 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生物安全等級 | BSL-1 |
培養基 | MEM(含 NEAA)+10% FBS+1% P/S |
培養環境 | 空氣95%;CO₂ 5%;37℃ |
倍增時間 | ~72小時 |
傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
換液頻率 | 每周2-3次 |
凍存條件 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
凍存方式 | 液氮 |
病毒易感性 | 對SV40病毒、脊髓灰質炎病毒(Poliovirus type 1)、水泡性口炎病毒敏感 |
基因表達特征 | 表達角蛋白 |
染色體特征 | 2n=60,含一條大型亞中部中心標記染色體,部分細胞含雙著絲粒染色體。 |
培養代數 | 可培養至40-50代 |
保藏機構 | ATCC; CCL-26; BCRC; GDC0033; CLS; ECACC等 |
供應限製 | 僅供科研使用 |
應用領域 | 病毒學研究:用於病毒的傳播和分離研究。 |
藥物篩選和轉染實驗:特別適合SV40載體的轉染。 | |
基礎生物學研究:用於細胞增殖、分化等方麵的實驗。 |
培養教程
BS-C-1非洲綠猴腎細胞培養教程
BS-C-1細胞複蘇
將BS-C-1細胞凍存管從(cong) 液氮中取出後,迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍,輕輕搖動,直至BS-C-1細胞懸液完全融化。
將解凍後的BS-C-1細胞懸液緩慢加入4 mL完全培養(yang) 基中,輕輕混勻。
在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸BS-C-1細胞,輕輕吹打均勻。
將重懸的BS-C-1細胞轉移至培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿,加入8 mL培養(yang) 基。
放置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜,次日更換培養(yang) 基並觀察BS-C-1細胞的狀態。
BS-C-1細胞傳代
傳(chuan) 代條件:當BS-C-1細胞生長密度達到80%-90%時應進行傳(chuan) 代。
注意:觀察BS-C-1細胞是否開始變圓並脫落。
觀察BS-C-1細胞生長狀態,移去培養(yang) 瓶封口膜,將其置於(yu) 37℃下孵育2-3小時,使BS-C-1細胞恢複狀態。
棄去培養(yang) 基,用預溫的無鈣鎂PBS緩衝(chong) 液清洗BS-C-1細胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA),置於(yu) 37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾。
添加少量培養(yang) 基以終止消化,輕輕吹打使BS-C-1細胞完全脫壁。
將BS-C-1細胞懸液加入6-8 mL新鮮培養(yang) 基中混勻,再次在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清。
將BS-C-1細胞按比例(1:3或1:4)分裝到新的培養(yang) 瓶中,加入8 mL培養(yang) 基,並置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
BS-C-1細胞凍存
凍存條件:在BS-C-1細胞狀態良好且處於(yu) 對數生長期時進行凍存。
配製BS-C-1細胞凍存液:55%基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO。
收集BS-C-1細胞並離心,棄去上清後,用凍存液重懸BS-C-1細胞。
將BS-C-1細胞懸液分裝入凍存管,標記清晰。
將BS-C-1細胞凍存管放入-80℃冰箱中過夜,隨後轉移至液氮罐中保存。