
CV-1細胞(非洲綠猴腎細胞)
- 來源:正常腎
- 細胞特征:貼壁細胞,成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
- 其他:CV-1細胞特別適合作為(wei) 基因轉染的宿主,尤其是通過SV40載體(ti) 的轉染。SV40病毒載體(ti) 的轉染實驗在CV-1細胞中有較高的成功率
CV-1細胞係是從(cong) 一隻成年雄性非洲綠猴(學名:Chlorocebus aethiops)的腎組織中分離出的細胞係,由Jensen等人於(yu) 1964年建立。CV-1細胞係廣泛應用於(yu) 病毒學和細胞生物學研究,用在Rous肉瘤病毒轉化實驗中。CV-1細胞係具備較強的適應性和增殖能力,也用於(yu) 轉染實驗,是SV40載體(ti) 的理想宿主。
CV-1細胞特性特征
染色體(ti) 特征:CV-1細胞係為(wei) 假二倍體(ti) ,其模式染色體(ti) 數目為(wei) 60,48%的細胞中觀察到該數目。多倍體(ti) 率為(wei) 4.4%。在細胞中發現了多個(ge) 標記,包括可能缺失的N11和未知來源的M3等。
基因組特征:N11和N16在大多數細胞中均為(wei) 單拷貝,同時檢測到X和Y染色體(ti) 。
CV-1細胞對多種病毒表現出易感性,包括:人類脊髓灰質炎病毒1型、單純皰疹病毒、東(dong) 部馬腦炎病毒、西馬腦炎病毒、加利福尼亞(ya) 腦炎病毒、SV40病毒、SARS冠狀病毒(SARS-CoV)
轉染宿主:CV-1細胞適合通過SV40載體(ti) 進行轉染,被廣泛應用於(yu) 基因轉染實驗。
病毒研究:CV-1細胞常用於(yu) 病毒的生產(chan) 和效能測試,以及其他病毒學實驗
CV-1細胞參數表
細胞名稱 | CV-1細胞(非洲綠猴腎細胞) |
細胞別稱 | Cv-1; CV 1; CV-1.K; CV1 |
細胞來源 | Chlorocebus aethiops成年雄性非洲綠猴的腎髒組織 |
建立時間 | 1964年,由Jensen等人建立 |
供體信息 | 141天雄性非洲綠猴 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣,貼壁生長 |
培養基 | MEM(ATCC 改良)+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 溫度:37°C,CO₂濃度:5% |
傳代方式 | 胰酶消化 |
傳代比例 | 1:2至1:4 |
換液頻率 | 每周2-3次 |
凍存條件 | 90%胎牛血清 + 10% DMSO |
生物安全等級 | 1,操作需在二級生物安全台內進行 |
質量檢測 | 無細菌、真菌、支原體汙染,所有檢測均為陰性 |
染色體特征 | 假二倍體,模式染色體數目為60,48%的細胞中觀察到 |
多倍體率 | 4.4%,在細胞中發現多個標記 |
X/Y染色體檢測 | X和Y染色體均被檢測到,所有細胞中均存在 |
病毒易感性 | 人類脊髓灰質炎病毒1型、單純皰疹病毒、東部馬腦炎病毒、西馬腦炎病毒、加利福尼亞腦炎病毒、SV40病毒、SARS冠狀病毒(SARS-CoV) |
生長特性 | 貼壁生長,適合在標準培養條件下繁殖。 |
基因特征 | N11和N16在大多數細胞中均為單拷貝。 |
標記特征 | 發現了幾個標記,包括可能缺失的N11和未知來源的M3等。 |
培養教程
CV-1非洲綠猴腎細胞培養教程
CV-1細胞複蘇步驟
解凍:將凍存的CV-1細胞從(cong) 液氮中取出,迅速置於(yu) 37°C水浴中,輕輕搖動,約1-2分鍾完全解凍。
初步培養(yang) :將解凍後的CV-1細胞懸液轉移至含10% FBS的培養(yang) 基中,並輕輕混勻,以減少滲透壓的變化對細胞的影響。
離心去除冷凍保護劑:以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液。
重新懸浮和接種:用新鮮培養(yang) 基重懸CV-1細胞,並接種至適當的培養(yang) 瓶中(如T25或T75瓶),置於(yu) 培養(yang) 箱中恢複生長。
CV-1細胞的傳代方法
觀察細胞狀態:在顯微鏡下檢查CV-1細胞的形態,確保其健康、無汙染。
更換培養(yang) 基:通常每3天更換一次培養(yang) 基,以確保CV-1細胞所需的營養(yang) 充足。
使用0.25%的胰酶溶液,處理CV-1細胞3-5分鍾,觀察細胞是否開始脫落。
輕輕吹打培養(yang) 瓶,以促進CV-1細胞的完全分離。
傳(chuan) 代比例:根據細胞密度,可選擇1:2至1:4的比例進行傳(chuan) 代,確保CV-1細胞在新的培養(yang) 瓶中充分生長。
重新接種:將消化後的CV-1細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,移至新的培養(yang) 瓶中。
CV-1細胞的冷凍保存
選擇對數生長期的CV-1細胞:在細胞生長的對數期進行冷凍保存,以確保較高的活性。
冷凍液:使用90% FBS和10% DMSO的冷凍保護液。
分裝:將CV-1細胞懸液分裝到凍存管中,標記清楚。
逐步降溫:先將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中,24小時後轉移至液氮中長期保存。