COS-1細胞（非洲綠猴SV40轉化的腎細胞）

COS-1細胞係（ATCC CRL-1650）源自非洲綠猴（Cercopithecus aethiops）的腎成纖維細胞，是通過將含有野生型T抗原的SV40病毒轉染至CV-1細胞獲得的。COS-1細胞株含有SV40基因組早期區域的組成型拷貝，因此能夠穩定表達T抗原。COS-1細胞對SV40病毒高度敏感，支持SV40的裂解性生長，可在40℃下有效複製ts A209突變株，並能擴增SV40早期缺失突變體(ti) 。

作為(wei) SV40轉化的細胞係，COS-1細胞適合用於(yu) 攜帶SV40 T抗原需求的轉染實驗，且表現出優(you) 異的轉染效率與(yu) 較高的穩定性，使其廣泛應用於(yu) 基因表達研究、重組蛋白的生產(chan) 以及疫苗開發等分子生物學領域。其標準命名為(wei) “COS-1 (African Green Monkey SV40-transformed Kidney Cell)”這些特性和高度的轉染能力使COS-1細胞成為(wei) 生命科學研究中重要的實驗工具。

COS-1細胞特性特征

• 病毒易感性：COS-1細胞對SV40病毒具有高度敏感性，能夠支持SV40病毒的複製。

• 永生化：通過SV40轉化獲得永生化能力，COS-1細胞中整合有SV40基因組完整早期區域的單個(ge) 拷貝。

• 表達基因：COS-1細胞主要表達SV40的T抗原。該抗原在細胞增殖和轉染中起關(guan) 鍵作用。
  

• 其他特征：EBNA陰性、Fc受體(ti) 陰性和補體(ti) 受體(ti) 陰性，這使得COS-1細胞在某些實驗中更具特異性。

• COS-1細胞能夠支持溫度敏感性A209病毒在40°C下的複製，這一特性使其在研究溫度敏感病毒時具有重要應用
  

COS-1細胞參數表

COS-1非洲綠猴SV40轉化的腎細胞培養教程

COS-1細胞複蘇

• 將凍存的COS-1細胞置於(yu) 37°C水浴中快速解凍，確保快速均勻地恢複細胞活性。
  

• 解凍後的COS-1細胞移入含有4 mL預熱的培養(yang) 基中，輕輕混勻，以防止凍存液對COS-1細胞的影響。
  

• 將COS-1細胞在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液以去除冷凍保護劑。
  

• 將COS-1細胞用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸，接種到培養(yang) 瓶中，並放入培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ，以幫助COS-1細胞適應新的培養(yang) 環境。
  

COS-1細胞傳代

• 觀察COS-1細胞的生長情況，傳(chuan) 代在COS-1細胞密度達到80%-90%時進行。
  

• 棄去COS-1細胞培養(yang) 的上清液，用無鈣鎂離子的PBS洗滌1-2次，以清除代謝產(chan) 物。
  

• 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C培養(yang) 1-2分鍾，觀察COS-1細胞是否圓化、脫附。
  

• 當COS-1細胞大部分脫附後，立即加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止胰酶作用，避免COS-1細胞受損。
  

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液，並用新鮮培養(yang) 基重懸COS-1細胞。
  

• COS-1細胞可按1:2至1:5比例分裝至新的培養(yang) 瓶，並補充8 mL培養(yang) 基，繼續培養(yang) 。
  

COS-1細胞凍存

• 使用92%胎牛血清和8% DMSO的混合液作為(wei) COS-1細胞的凍存液，或使用92%完全培養(yang) 基和8% DMSO，以確保COS-1細胞在凍存時維持較高的存活率。
  

• 待COS-1細胞狀態良好時，棄去培養(yang) 基，PBS洗滌後加入胰酶消化，待COS-1細胞變圓後加入培養(yang) 基終止消化。
  

• 通過離心收集COS-1細胞的沉澱，加入凍存液後輕輕重懸。
  

• 將COS-1細胞懸液分配至凍存管中，每管細胞密度保持在200-300萬(wan) /mL。
  

• 將COS-1細胞凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80°C冷凍過夜，然後轉移至液氮罐中長期保存。
  

注意事項

• 培養(yang) COS-1細胞的整個(ge) 過程中需保持無菌操作，以防止細菌汙染。

• 所有試劑在使用前需提前恢複至室溫，避免COS-1細胞暴露於(yu) 溫度波動。

• 定期檢查COS-1細胞的生長狀態，記錄COS-1細胞的生長速率和形態，必要時調整培養(yang) 條件。