
CTX細胞係(大鼠腦星形膠質細胞係)
- 來源:腦
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:標誌性蛋白:GFAP(膠質纖維酸性蛋白)、S100β;
CTX細胞通常是指大鼠腦部提取的原代星形膠質細胞,可能來自不同發育階段或腦部區域,主要為(wei) I型星形膠質細胞,形態上呈現上皮細胞樣,具有貼壁生長特性。CTX細胞廣泛應用於(yu) 基礎神經生物學研究,尤其適用於(yu) 藥物篩選等實驗需求。
CTX細胞係特性特征
標誌性蛋白:GFAP(膠質纖維酸性蛋白)、S100β;
CTX細胞可能表達多種與(yu) 星形膠質細胞相關(guan) 的表麵標誌物,如:CD44、GLAST(穀氨酸轉運體(ti) )。
CTX細胞係參數表
細胞名稱 | CTX細胞係(大鼠腦星形膠質細胞係) |
細胞類型 | I型星形膠質細胞 |
形態特征 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
細胞密度 | 通常超過1×10^6個/mL |
規格 | T25培養瓶或1mL凍存管包裝 |
用途 | 僅供科研使用 |
培養基組成 | 90% DMEM+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 溫度:37℃;CO₂濃度:5%;濕度:70%-80% |
運輸方式 | 幹冰運輸,使用1mL凍存管包裝 |
複蘇方法 | -80℃冰箱保存過夜後轉入液氮或直接複蘇 |
凍存液組成 | 胎牛血清(90%)、DMSO(10%) |
凍存密度 | 推薦凍存密度為1×10^6至1×10^7個活細胞/mL |
冷凍過程 | 使用程序降溫盒進行冷凍,-80℃冰箱中過夜後轉入液氮儲存 |
注意事項 | 所有操作應在二級生物安全台內進行,運輸用的培養基不能再用於細胞培養 |
注意事項 | 僅限於科學研究,不可用於動物或人類疾病治療 |
培養教程
CTX大鼠腦星形膠質細胞係培養教程
CTX細胞複蘇步驟
取出CTX細胞凍存管放入37℃水浴中,快速搖晃以完成解凍,盡量避免細胞在水浴中長時間暴露。
將解凍後的CTX細胞懸液加入含4-6 mL完全培養(yang) 基的離心管,1000 rpm離心3-5分鍾,棄去上清液。
用新鮮培養(yang) 基將CTX細胞重懸後,轉移至含6-8 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
第二天在顯微鏡下觀察CTX細胞的貼壁狀態和生長狀況,如有大量懸浮的死細胞,應及時更換培養(yang) 基。
CTX細胞傳代
當CTX細胞密度達到80%-90%時,需進行傳(chuan) 代。若過密,CTX細胞的形態和活性可能受影響,建議適時傳(chuan) 代。
洗滌:棄去上清液後,用無鈣鎂的PBS衝(chong) 洗CTX細胞1-2次。
消化:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,於(yu) 37℃下消化1-2分鍾。當大部分CTX細胞變圓並即將脫落時,加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
離心:將懸浮的CTX細胞轉入離心管,1000 rpm離心3-5分鍾後棄去上清液。
分裝:將CTX細胞按1:2比例分裝到新培養(yang) 瓶中,補充6-8 mL新鮮完全培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。
CTX細胞凍存
為(wei) 保證實驗的持續性,建議在CTX細胞培養(yang) 前3代時進行一批凍存操作。
凍存液:使用90%胎牛血清和10% DMSO為(wei) 凍存液。
細胞混合:將CTX細胞懸液與(yu) 凍存液按1:1比例混合,分裝至凍存管並標記好信息。
冷凍條件:將裝有CTX細胞的凍存管置於(yu) -80℃冷凍過夜,次日轉移至液氮中儲(chu) 存以供長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
- 《神經藥理學報》 2014年06期
- 摘要:目的:觀察開心散含藥血清對皮質酮(corticosterone)損傷大鼠大腦皮質星形膠質細...
- 《山東醫藥》 2023年27期
- 摘要:...清對缺氧缺糖/複氧複糖(OGD/R)損傷大鼠星形膠質細胞係CTX-TNA2的修複作用...
- 《中國實驗血液學雜誌》 2020年02期
- 摘要:...果陽性,證實模型建立成功。結論:NOD/SCID小鼠經腹腔注射CTX預處理後,每隻小...
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