細胞培養(yang) 
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品牌價(jia) 值 
貨號：STM-CL-7405 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管
DI TNC1細胞（大鼠腦間質細胞）
- 來源：腦
- 細胞特征：貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基：DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他：膠質纖維酸性蛋白（GFAP）：陽性； γ-氨基丁酸（GABA）攝取機製：高親(qin) 和力，受β-丙氨酸抑製
DI TNC1細胞係源自1日齡大鼠的腦間質組織，是通過1型星形膠質細胞的原代培養(yang) 建立的。在初始培養(yang) 3天後，使用含SV40早期致癌區的DNA構建體(ti) 對細胞進行轉染，該構建體(ti) 在GFAP啟動子（pGFA-SV-Tt）的控製下表達，從(cong) 而賦予細胞永生化特性。具體(ti) 過程包括脂質體(ti) 介導的轉染，將SV40大T抗原基因（SV40LT）導入細胞，隨後通過G418抗生素篩選陽性克隆，確保僅(jin) 成功整合該基因的細胞存活。
DI TNC1細胞展現了與(yu) 1型星形膠質細胞表型一致的特征，如對膠質纖維酸性蛋白（GFAP）的免疫反應性，以及對γ-氨基丁酸（GABA）的高親(qin) 和力攝取能力（可被β-丙氨酸抑製）。DI TNC1細胞表達水平上與(yu) 原代星形膠質細胞類似，產(chan) 生活性α2巨球蛋白，但轉鐵蛋白的表達量較低。DI TNC1細胞在神經發育、損傷(shang) 修複以及腦部疾病模型研究中具有重要的應用價(jia) 值。
DI TNC1細胞特性特征
DI TNC1細胞表現出GFAP的免疫反應性，這是一種標誌性蛋白，表明其為(wei) 星形膠質細胞。
γ-氨基丁酸（GABA）攝取機製：DI TNC1細胞具有高親(qin) 和力的GABA攝取機製，可被β-丙氨酸抑製的γ-氨基丁酸（GABA）的高親(qin) 和力攝取機製。
DI TNC1細胞產(chan) 生的α2巨球蛋白量與(yu) 原代星形膠質細胞相似，但轉鐵蛋白的產(chan) 生量較少。
DI TNC1細胞不產(chan) 生前腦啡肽A，也不表達2型星形膠質細胞特有的O4或A2B5表位，也不表達半乳糖苷。
致瘤性測試：在免疫抑製的小鼠中未顯示致瘤性，但在半固體(ti) 培養(yang) 基中能夠形成集落。
SV40T抗原：通過免疫染色，超過95%的DI TNC1細胞核中檢測到SV40T抗原，表明其成功轉染SV40早期致癌區DNA構建體(ti)
DI TNC1細胞參數表
| 細胞名稱 | DI TNC1細胞（大鼠腦間質細胞） |
| 細胞別稱 | DITNC1; DI-TNC1; DI TNC-1 |
| 來源 | 1日齡大鼠腦間質組織中的1型星形膠質細胞 |
| 細胞類型 | 腦間質細胞（成纖維細胞樣） |
| 形態特征 | 貼壁生長，成纖維細胞樣 |
| ATCC編號 | CRL-2005 |
| ECACC編號 | 98102214 |
| 生物安全等級 | BSL 2 |
| 用途 | 僅供科研使用 |
| 培養基組成 | DMEM（高糖）89%，胎牛血清（FBS）10%，抗生素/抗真菌劑（P/S）1% |
| 培養條件 | 溫度：37°C，二氧化碳濃度：5%，氣相：95%空氣 |
| 培養頻率 | 每2-3天傳代 |
| 倍增時間 | 24-30小時 |
| 凍存液組成 | 胎牛血清（FBS）90%，DMSO 10% |
| 基因表達特征 | α2巨球蛋白：與原代星形膠質細胞相似的表達水平；轉鐵蛋白：表達量較少 |
| 免疫反應性標記 | 膠質纖維酸性蛋白（GFAP）：陽性；γ-氨基丁酸（GABA）攝取機製：高親和力，受β-丙氨酸抑製 |
| 其他分子特征 | 神經粘附分子（N-CAM）：表達；層粘連蛋白（laminin）：表達 |
| 致瘤性測試 | 在免疫抑製小鼠中未顯示致瘤性，但在半固體培養基中能夠形成集落 |
| SV40T抗原 | 超過95%的DI TNC1細胞核中檢測到SV40T抗原，表明其成功轉染SV40早期致癌區DNA構建體 |
| 質量控製 | 細菌檢測：通過檢測；真菌檢測：通過檢測；支原體檢測：通過檢測；內毒素檢測：通過檢測；細胞複蘇活力：檢測；STR鑒定：確認細胞係身份 |
| 注意事項 | DI TNC1細胞含有SV40病毒DNA序列，建議在處理時使用適當的個人防護設備。 |
培養教程
DI TNC1大鼠腦間質細胞培養教程
DI TNC1細胞的複蘇
將凍存的DI TNC1細胞迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍，輕輕搖晃凍存管，使細胞懸液均勻。
將解凍後的DI TNC1細胞加入到4-6 mL完全培養(yang) 基中，輕輕混合均勻。
以1000 RPM的速度離心3-5分鍾，棄去上清液。
用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸DI TNC1細胞，然後將其轉移到培養(yang) 瓶中，加入6-8 mL完全培養(yang) 基。
將DI TNC1細胞的培養(yang) 瓶放置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中過夜，次日觀察細胞的生長情況。
DI TNC1細胞的傳代
傳(chuan) 代時機：當DI TNC1細胞生長密度達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。
用PBS緩衝(chong) 液洗滌DI TNC1細胞，去除殘留的培養(yang) 基。
加入適量0.25%胰蛋白酶消化DI TNC1細胞，待細胞變圓且脫落時（約2-5分鍾），加入完全培養(yang) 基中和消化作用。
輕輕吹打以分散DI TNC1細胞，形成單細胞懸液。
將細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶中，加入10 mL完全培養(yang) 基。
將DI TNC1細胞置於(yu) 37°C培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
DI TNC1細胞的凍存
凍存液準備：使用90%胎牛血清和10% DMSO配製凍存液。
收集生長良好的DI TNC1細胞，離心並棄去上清液。
用凍存液重懸DI TNC1細胞，將懸液分裝至凍存管中，每管約1 mL。
將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中過夜，隨後轉移至液氮罐中保存。
注意事項
操作DI TNC1細胞時，需佩戴防護設備，因為(wei) 該細胞係含有SV40病毒DNA序列。
定期觀察DI TNC1細胞的狀態，確保無汙染並維持細胞的良好生長狀態。