NOZ細胞（人膽囊癌細胞係）

NOZ細胞係是從(cong) 一位48歲患有管狀腺癌膽囊癌的日本患者的膽囊組織中分離得，患者還患有癌性腹膜炎。

NOZ細胞特性特征

• 分子特征：NOZ細胞表達甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CEA），這兩(liang) 種蛋白質是常見的腫瘤標誌物，可用於(yu) 癌症診斷和監測。

• 分化特征：NOZ細胞是一種中等分化的管狀膽囊癌細胞，保留了原發腫瘤的某些特征。

• 體(ti) 內(nei) 成瘤性：NOZ細胞在裸鼠中具有成瘤能力，形成的腫瘤形態與(yu) 原發腫瘤相似。這表明它們(men) 保留了原始腫瘤的某些生物學特性。

• 上皮-間質轉化（EMT）特性：NOZ細胞可用於(yu) 研究EMT過程，這是癌細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程。

NOZ細胞參數表

NOZ人膽囊癌細胞係培養教程

NOZ細胞複蘇

• 解凍NOZ細胞：將凍存的NOZ細胞從(cong) 液氮中取出，迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍，期間輕輕搖動使NOZ細胞均勻解凍。

• 轉移NOZ細胞：將NOZ細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 離心分離：以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清。

• 重懸NOZ細胞：用新鮮培養(yang) 基重懸NOZ細胞，轉移到培養(yang) 瓶中。

• 初始培養(yang) ：第二天換液並檢查NOZ細胞密度。

NOZ細胞傳代步驟

• 傳(chuan) 代時機：當NOZ細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去上清：棄去培養(yang) 上清。

• 潤洗NOZ細胞：用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗NOZ細胞1-2次。

• 消化NOZ細胞：加入0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液，37℃消化1分鍾。

• 觀察脫落：輕輕拍打培養(yang) 瓶，觀察NOZ細胞是否脫落。

• 終止消化：加入含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 離心分離：以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清。

• 重懸NOZ細胞：用新鮮培養(yang) 基重懸NOZ細胞。

• 分配NOZ細胞：按1:2或1:3的比例將NOZ細胞分配到新的培養(yang) 瓶中。

NOZ細胞培養注意事項

• 首次傳(chuan) 代：首次傳(chuan) 代建議使用1:2的比例。

• 無菌操作：傳(chuan) 代時注意無菌操作，避免汙染。

• 定期觀察：定期觀察NOZ細胞形態和生長狀況。

• 細胞代數：保持NOZ細胞代數在10代以內(nei) ，以維持細胞特性。

NOZ細胞凍存

• 收集NOZ細胞：收集對數生長期的NOZ細胞。

• 離心分離：以1000 rpm離心8-10分鍾，棄去上清。

• 重懸NOZ細胞：用無血清凍存液重懸NOZ細胞。

• 分裝NOZ細胞：將NOZ細胞懸液分裝到凍存管中。

• 降溫方法：采用程序降溫或梯度降溫方法逐步降溫。

• 最終存儲(chu) ：將NOZ細胞保存在液氮中。

NOZ細胞培養問題及解答

• 複蘇過程中需要避免的錯誤：

• 不規則搖晃或未充分搖勻NOZ細胞，導致細胞分布不均。

• 解凍後未及時進行離心去除凍存液，影響NOZ細胞活性。

• 複蘇後未及時更換培養(yang) 基，第二天應換液並檢查NOZ細胞密度。

• 解凍過程過慢或過快，應在37℃水浴中迅速解凍NOZ細胞。

  
  

• 不同代次的培養(yang) 方法區別：

• 首次傳(chuan) 代建議使用1:2的傳(chuan) 代比例，以確保NOZ細胞有足夠的生長空間。

• 後續傳(chuan) 代可以根據NOZ細胞生長狀況調整為(wei) 1:2或1:3的比例。

• 應保持NOZ細胞代數在10代以內(nei) ，以維持細胞特性。

• 高代次的NOZ細胞仍能相對維持細胞在體(ti) 內(nei) 的生物學特性，但應注意觀察NOZ細胞狀態。

  
  

• 避免NOZ細胞死亡的培養(yang) 方法：

• 定期觀察NOZ細胞形態和生長狀況，及時進行傳(chuan) 代。

• 嚴(yan) 格控製NOZ細胞培養(yang) 條件：37℃，95%空氣 + 5% CO2。

• 使用正確的培養(yang) 基配方：90% DMEM（高糖）+ 10% FBS。

• 傳(chuan) 代時注意無菌操作，避免汙染NOZ細胞。

• 消化時間控製在1分鍾左右，避免過度消化導致NOZ細胞損傷(shang) 。

• 定期檢測支原體(ti) ，確保NOZ細胞無汙染。

• 傳(chuan) 代密度控製在80%-90%，避免過度生長。