hucct1細胞（人膽管上皮癌細胞）

HuCCT1細胞株源自一名56歲男性患者的肝內(nei) 膽管中分化腺癌，取自其腹水中的惡性細胞。HuCCT1細胞係測試結果顯示，EBV、HBV、HIV-1和HIV-2均為(wei) 陰性。基因變異特征：p.Lys1358fs*2 (c.4071_4072insGATT)，呈雜合子狀態。

hucct1細胞特征

• hucct1細胞生長方式：貼壁生長。

• hucct1細胞具有中等侵襲性，細胞漿中表達syndecan-1蛋白。

• hucct1細胞可應用於(yu) 上皮-間質轉化（EMT）研究：EMT相關(guan) 分子標誌物（如syndecan-1和S100A4）在膽管癌侵襲轉移中的作用

• hucct1細胞可用於(yu) 分子機製研究：膽管癌發生、發展和轉移的分子機製、S100A4在膽管癌侵襲中的作用

hucct1細胞參數表

hucct1人膽管上皮癌細胞培養教程

HuCCT1細胞傳代步驟

1. 傳(chuan) 代密度：80%-90%匯合度

2. 傳(chuan) 代比例：1:2至1:4（根據細胞生長速度和密度決(jue) 定）

具體步驟

• 棄去舊培養(yang) 基，使用PBS潤洗HuCCT1細胞1-2次。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液，37°C消化1-2分鍾。

• 加入2-3ml完全培養(yang) 基終止消化。

• 以900-1000rpm離心3-5分鍾。

• 棄去上清液，用新鮮培養(yang) 基重懸HuCCT1細胞。

• 按傳(chuan) 代比例將HuCCT1細胞分配到新的培養(yang) 容器中。

HuCCT1細胞複蘇步驟

• 在37°C水浴中快速解凍凍存的HuCCT1細胞（約1分鍾）。

• 將細胞懸液加入預熱的完全培養(yang) 基中。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用完全培養(yang) 基重懸HuCCT1細胞，並轉移到培養(yang) 容器中。

• 24小時後觀察HuCCT1細胞的貼壁情況，更換新鮮培養(yang) 基。

HuCCT1細胞凍存步驟

• 凍存液配方：92% FBS + 8% DMSO，或92% 完全培養(yang) 基 + 8% DMSO

• 凍存密度：200-300萬(wan) 細胞/ml，每管1ml

• 具體(ti) 步驟：

• a) 收集對數生長期的HuCCT1細胞。
  b) 按傳(chuan) 代方法處理HuCCT1細胞至離心後。
  c) 用凍存液重懸HuCCT1細胞，並輕輕混勻。
  d) 將細胞懸液分裝到凍存管中，做好標識。
  e) 使用程序降溫盒，放入-80°C冰箱中降溫2小時，然後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 胰酶消化時間：不同品牌胰酶消化時間差異較大，需嚴(yan) 格控製。

• 操作時輕柔：避免產(chan) 生過多氣泡。

• 使用低代次細胞：建議實驗中使用低代次HuCCT1細胞。

• 檢查細胞活性：凍存HuCCT1細胞轉入液氮後，建議及時複蘇一管以檢查細胞活性。

• 無菌操作：在所有操作過程中保持無菌。

• 細胞適應性：複蘇後的HuCCT1細胞可能需要一段時間才能恢複正常生長，建議密切觀察細胞狀態。可以考慮將原培養(yang) 基與(yu) 新配置的培養(yang) 基混合使用，逐步適應新的培養(yang) 條件。

• 培養(yang) 過程中黑點：若HuCCT1細胞培養(yang) 過程中出現黑點，需參見供應商說明以判斷原因。