
GIST-T1細胞係(人胃腸道間質瘤細胞係)
- 來源:胃腸道
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:GIST-T1細胞係攜帶kit基因外顯子11的突變;這種突變是GIST中最常見的基因變化之一。
GIST-T1細胞是從(cong) 一位47歲女性患者的胃腸道間質瘤(GIST)組織中分離出的細胞,該患者因胃部腫瘤接受了手術治療。GIST-T1細胞係是GIST研究中的重要模型,用於(yu) 探索此類腫瘤的發病機製及治療方法。
GIST-T1細胞呈梭形,表達間質瘤特異性標誌物;由於(yu) 其攜帶的特定基因突變和高度可移植性,GIST-T1細胞係廣泛用於(yu) GIST的基礎和臨(lin) 床研究,特別是用於(yu) 靶向藥物(如伊馬替尼)的敏感性測試和耐藥機製的探索。其穩定的遺傳(chuan) 特征和腫瘤形成能力為(wei) 研究GIST的生物學行為(wei) 以及新療法開發提供了理想的實驗平台。
GIST-T1細胞係特性特征
形態特征:GIST-T1細胞呈現梭形,具有典型的間質瘤細胞形態。
增殖活性:GIST-T1細胞係顯示出高度的增殖能力,在體(ti) 外培養(yang) 時能夠快速生長,並能在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤,且與(yu) 原發腫瘤的組織學特征相似。
GIST-T1細胞強烈表達CD117,這是一種重要的間質瘤標誌物,常用於(yu) GIST的診斷。
GIST-T1細胞係也表達DOG1,這是一種在GIST中高度特異性的標誌物,有助於(yu) 進一步確認腫瘤的性質。
突變情況:GIST-T1細胞係攜帶kit基因外顯子11的突變。這種突變是GIST中最常見的基因變化之一,通常與(yu) 腫瘤的發生和進展密切相關(guan) 。
信號通路:由於(yu) kit基因突變,GIST-T1細胞可能表現出異常的信號傳(chuan) 導活性,這為(wei) 研究靶向治療提供了基礎
GIST-T1細胞係參數表
細胞名稱 | GIST-T1細胞係(人胃腸道間質瘤細胞係) |
別名 | GIST-T-1; GISTT1; T1 |
細胞來源 | 47歲女性GIST患者胃腸道間質瘤組織 |
細胞類型 | 間質瘤細胞 |
形態特征 | 梭形 |
標誌物表達 | CD117(c-kit)陽性, DOG1陽性 |
基因特征 | kit基因外顯子11突變 |
常見症狀 | 腹痛、惡心、嘔吐、消化道出血、腹部腫塊等 |
惡性判定標準 | 腫瘤大小、核分裂率、浸潤和轉移情況 |
轉移特征 | 多見於腹腔種植和血行轉移,鮮有淋巴結轉移 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
溫度 | 37°C |
濕度 | 95% |
CO2濃度 | 5% |
傳代方式 | 胰酶消化 |
傳代頻率 | 3-4天/次 |
增倍時間 | 約48小時 |
增殖能力 | 高度增殖,能在體外快速生長 |
成瘤性 | 可在裸鼠皮下形成腫瘤,與原發腫瘤相似 |
藥物敏感性 | 對伊馬替尼敏感 |
基因檢測 | kit基因突變檢測是GIST診斷的重要環節 |
影像學檢查 | CT、MRI、超聲波、內鏡等用於腫瘤定位和評估大小 |
活檢方法 | 細針抽吸活檢或手術取樣進行病理檢查 |
培養教程
GIST-T1人胃腸道間質瘤細胞係培養教程
GIST-T1細胞的解凍
從(cong) 液氮罐中取出凍存的GIST-T1細胞管,立即置於(yu) 37°C的水浴中,輕輕搖動,直到GIST-T1細胞完全解凍(約1-2分鍾)。
迅速將解凍的GIST-T1細胞轉移至含有10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基中,混勻後進行離心(1000 rpm,5分鍾)。
丟(diu) 棄上清,重懸GIST-T1細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,準備接種。
GIST-T1細胞的接種
接種密度:GIST-T1細胞應以1×10^5個(ge) 細胞/mL的密度接種在培養(yang) 瓶中。
培養(yang) 條件:在37°C、5% CO₂的恒溫培養(yang) 箱中培養(yang) GIST-T1細胞,確保培養(yang) 環境穩定以促進其正常生長。
GIST-T1細胞的傳代
傳(chuan) 代頻率:當GIST-T1細胞達到70%-80%匯合時進行傳(chuan) 代,通常每3-4天傳(chuan) 代一次。
用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌GIST-T1細胞,去除殘留培養(yang) 基。
加入0.25%胰蛋白酶溶液,消化GIST-T1細胞1-3分鍾,觀察細胞逐漸從(cong) 培養(yang) 瓶壁上脫落。
使用新鮮培養(yang) 基終止胰酶反應,離心去除胰酶。
重新將GIST-T1細胞重懸於(yu) 培養(yang) 基中並接種到新的培養(yang) 瓶中。
GIST-T1細胞的維護與觀察
顯微鏡觀察:應定期使用倒置顯微鏡觀察GIST-T1細胞的形態,確保其生長狀態良好且無汙染。
培養(yang) 基更換:每2-3天更換一次培養(yang) 基,以保持GIST-T1細胞的健康狀態,避免代謝廢物的積累。
GIST-T1細胞的冷凍保存
當GIST-T1細胞達到對數生長期並密度適當時,收集細胞並用含10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)和90% FBS的冷凍液重懸。
將GIST-T1細胞懸液分裝至凍存管中,先在−80°C下預冷凍24小時,然後轉移至液氮罐中長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
上一篇:SGC7901細胞(人胃癌細胞)
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