
OVCAR5細胞(人轉移性胃腸癌細胞)
- 來源:癌症患者的腹水
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:OVCAR-5細胞表達多種與(yu) 癌症相關(guan) 的基因,包括HER2、CA-125等
OVCAR5細胞係是1980年代由美國國立癌症研究所(NCI)從(cong) 一名67歲未經治療的晚期卵巢癌患者的腹水中建立。OVCAR5細胞在癌症研究和藥物開發領域中廣泛使用。盡管OVCAR5細胞最初被認為(wei) 是源自卵巢癌,近年來的研究表明其可能來源於(yu) 胃腸道組織,而非卵巢。OVCAR5細胞不僅(jin) 在癌症的侵襲性生長研究中表現突出,還為(wei) 探索胃腸道癌的生物學特性提供了重要的工具。
OVCAR5細胞特性特征
基因突變:OVCAR-5細胞在KRAS基因中存在純合的Gly12Val突變,突顯了其較強的遷移和侵襲能力。
生物標誌物:OVCAR5細胞過度表達claudin-4,這是一種與(yu) 癌症惡性程度相關(guan) 的重要標記物,參與(yu) 細胞間的粘附和屏障功能。
細胞增殖:OVCAR-5細胞在適宜的培養(yang) 條件下(如RPMI-1640培養(yang) 基、10%胎牛血清)能夠快速增殖,適合用於(yu) 體(ti) 外實驗和藥物篩選。
侵襲性:OVCAR5細胞表現出高侵襲性,適合用於(yu) 研究轉移機製及治療耐藥性
OVCAR5細胞參數表
細胞名稱 | OVCAR5細胞(人轉移性胃腸癌細胞) |
別稱 | OVCAR 5; NIH:OVCAR-5; OVCAR.5; OVCAR5; Ovcar5; OVCA5 |
種屬來源 | 人(Homo sapiens) |
組織來源 | 腹水(來源於未經治療的晚期卵巢癌患者) |
疾病類型 | 高級別卵巢漿液性腺癌 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞密度 | >1×10⁶ cells |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 雙抗 |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣,5%二氧化碳;濕度:70%-80% |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
凍存條件 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測 | 陰性 |
基因特征 | KRAS基因純合Gly12Val突變 |
生物標誌物 | 過度表達claudin-4 |
致瘤性 | 在裸鼠實驗中表現出致瘤性 |
用途 | 癌症研究、藥物開發、轉移機製研究 |
運輸條件 | 常溫運輸(T25瓶),幹冰運輸(凍存管) |
培養教程
OVCAR5人轉移性胃腸癌細胞培養教程
OVCAR5細胞培養步驟
從(cong) 液氮中取出凍存的OVCAR5細胞,立即在37℃水浴中解凍,約1-2分鍾,期間輕輕搖動凍存管。
解凍後迅速將OVCAR5細胞轉移到含有RPMI-1640和10%胎牛血清的培養(yang) 基中,以減少DMSO的毒性影響。
以1000 rpm離心5分鍾,去除上清液。
加入新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基重懸OVCAR5細胞,確保細胞均勻分布。
將重懸的OVCAR5細胞按1×10⁶ cells/mL的密度接種到T25或T75培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中孵育,確保OVCAR5細胞的正常生長。
每日通過顯微鏡觀察OVCAR5細胞生長狀態,檢查是否有細菌或真菌汙染。
每3-4天更換一次培養(yang) 基,調整傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2到1:6,確保OVCAR5細胞在最佳狀態下繼續增殖。
細胞傳代
當OVCAR5細胞的匯合度達到70%-80%時,進行傳(chuan) 代。
使用無鈣鎂PBS清洗OVCAR5細胞後,加入0.25%胰蛋白酶消化細胞2-3分鍾。
當觀察到OVCAR5細胞開始脫落時,加入含有FBS的培養(yang) 基中和胰蛋白酶,輕輕吹打細胞以確保完全脫離。
通過離心去除胰蛋白酶後,將OVCAR5細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,並接種到新的培養(yang) 瓶中。
細胞凍存
在OVCAR5細胞處於(yu) 對數生長期時,收集細胞並用90%胎牛血清+10% DMSO的凍存液重懸。
將OVCAR5細胞分裝到凍存管中,先在-80℃冰箱中預冷24小時,隨後轉移至液氮中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,13 (Cosmic-CLP=905969; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=30485824) |
12,13 (Millipore=SCC259) | |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 10,13 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31 |
FGA | 23 |
Penta D | 12 |
Penta E | 9,16 (PubMed=25877200) |
9,16,17 (Millipore=SCC259) | |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |
參考文獻
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