HCT116-Luc細胞（人結腸癌細胞熒光素酶標記）

HCT 116-Luc細胞係是一種應用於(yu) 癌症研究和藥物篩選的人源結腸癌細胞係，具有熒光素酶標記。hct116-luc細胞源自一名男性結腸癌患者的腫瘤組織，最早由M. Brattain等人在1979年成功分離。

hct116-luc細胞屬於(yu) 惡性腫瘤細胞類型，源於(yu) 結直腸癌，呈現典型的上皮樣形態，並以貼壁方式生長。在半固體(ti) 瓊脂糖培養(yang) 基中可形成克隆。此外，在無胸腺裸鼠模型中，HCT 116-Luc細胞顯示出顯著的致瘤性，能夠形成上皮樣的腫瘤結構，常被用於(yu) 腫瘤生物學相關(guan) 的實驗。

HCT 116-Luc細胞特有的生物發光功能。此標記是通過慢病毒介導的基因轉染，將熒光素酶（luc）基因導入細胞內(nei) ，從(cong) 而在特定底物（如D-熒光素）存在時產(chan) 生發光效應。該特性為(wei) 活體(ti) 成像提供了便利，使研究人員可以在實驗過程中實時監測腫瘤的增殖、轉移以及藥物幹預效果，顯著提升了成像及實驗數據的直觀性和可靠性。

HCT 116-Luc細胞特性特征

• 生長特性：hct116-luc細胞在半固體(ti) 瓊脂糖培養(yang) 基中能夠形成克隆，並在無胸腺裸鼠中具有致瘤性，能夠形成上皮樣腫瘤。

• 熒光素酶標記：hct116-luc細胞通過慢病毒轉染技術引入了熒光素酶（luc）基因，使其在存在底物（如D-熒光素）時發光。這一特性使得該細胞係在活體(ti) 成像和腫瘤監測中具有重要應用。
  

• 基因特征:hct116-luc細胞的基因組中包含與(yu) 結腸癌相關(guan) 的多種突變。例如，該細胞係通常攜帶K-Ras基因的突變，這在許多結腸癌病例中常見

HCT 116-Luc細胞參數表

HCT 116-Luc人結腸癌細胞熒光素酶標記培養教程

hct116-luc細胞的複蘇

• 複蘇hct116-luc細胞前，將水浴鍋預熱至37°C。
  

• 準備5 mL完全培養(yang) 基至15 mL離心管中備用。

• 從(cong) 液氮或-80°C冰箱中取出hct116-luc細胞凍存管，立即放入37°C的水浴中，輕輕搖晃以加速解凍（控製時間約為(wei) 1分鍾）。
  

• 將解凍的hct116-luc細胞懸液加入到預熱的培養(yang) 基中，輕輕混勻後以1000 rpm離心3-5分鍾。
  

• 小心吸棄上清液，保留hct116-luc細胞沉澱。

• 用2 mL完全培養(yang) 基輕柔地重懸hct116-luc細胞，並轉移至T25培養(yang) 瓶中。
  

• 做好標記，放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 複蘇後的hct116-luc細胞培養(yang) 24小時後，觀察貼壁情況，吸去舊培養(yang) 基並更換新鮮預熱的完全培養(yang) 基。
  

hct116-luc細胞的傳代

• 傳(chuan) 代時機：hct116-luc細胞培養(yang) 密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代操作。

• 棄去舊培養(yang) 基，並用無鈣鎂的PBS輕輕衝(chong) 洗hct116-luc細胞1-2次。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液（T25瓶使用1-2 mL），置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 顯微鏡下觀察hct116-luc細胞消化情況，細胞變圓並脫落後，迅速加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 吸出細胞懸液，以1000 rpm離心3-5分鍾後棄去上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸hct116-luc細胞，並按1:2的比例分配到新的T25瓶中培養(yang) 。

hct116-luc細胞的凍存

• 按照傳(chuan) 代方法消化並收集hct116-luc細胞至離心管中，並使用計數板確認細胞密度，推薦凍存密度為(wei) 1×10^6至1×10^7個(ge) 活細胞/mL。
  

• 使用90%完全培養(yang) 基和10% DMSO混合製成hct116-luc細胞凍存液。
  

• 用預冷的凍存液重懸hct116-luc細胞，將其分裝到1.2 mL凍存管中，每管約含1×10^6個(ge) 細胞。
  

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒內(nei) ，先在-80°C冰箱中過夜，隨後轉入液氮罐中儲(chu) 存。

注意事項

• 收到hct116-luc細胞後應檢查運輸狀態，若有異常情況需立即聯係供應商。

• 運輸過程中的培養(yang) 基不可用於(yu) 細胞培養(yang) ，應更換新鮮配製的完全培養(yang) 基。

• 在複蘇和傳(chuan) 代hct116-luc細胞時，避免過多機械損傷(shang) ，以提高細胞存活率和實驗效果。