HT29 人結腸癌細胞

HT-29細胞是一種人類結腸腺癌細胞係，最初由J·Fogh在1964年通過移植培養(yang) 方法和含有15% FBS的F12培養(yang) 液從(cong) 一名44歲的白人女性結腸腺癌患者的原發腫瘤中分離出來。HT-29人結腸癌細胞在培養(yang) 中以貼壁生長方式展現上皮細胞樣的形態，生長快速，倍增時間約為(wei) 36-60小時。其生長特性包括形成大的單層和大型細胞群，並且在良好條件下呈現不規則的三角形。

HT29人結腸癌細胞係是一種合適的轉染宿主，HT-29細胞在裸鼠中表現出致瘤性，能夠形成良性的腺癌，與(yu) 結腸原發性腫瘤（I級）一致，並且在類固醇處理的倉(cang) 鼠中也有腫瘤形成的能力。這些細胞在實驗室中的應用十分廣泛，主要用於(yu) 癌症研究和毒理學研究中。

HT-29細胞具有合成多種重要蛋白質的能力，包括IgA、CEA、轉化生長因子β結合蛋白和粘液素等。此外，它們(men) 還表達多種致癌基因，如c-myc、K-ras、H-ras、Myb、sis和fos，並過度產(chan) 生p53抗原。這些特性使得HT-29人結腸癌細胞成為(wei) 了癌症研究領域的重要工具。

基因表達：IgA分泌成分；癌胚抗原；轉化生長因子β結合蛋白；粘蛋白；myc+；ras+；myb+；fos+；sis+；p53+；abl-；ros；src-；血型A；Rh+；（HLA：A1；A3；B12；B17；Cw5）；

HT29 人結腸癌細胞具有超微結構特征，有微絨毛、微絲(si) 、帶深色顆粒的大型空泡線粒體(ti) 、帶遊離核糖體(ti) 的光滑和粗糙內(nei) 質網、脂滴、少數初級溶酶體(ti) 和許多次級溶酶體(ti) 。這些細胞表達尿激酶受體(ti) ，但不具有可檢測的纖溶酶原激活劑活性。

HT-29人結腸癌細胞對CD4表達呈陰性，但細胞表麵表達半乳糖神經酰胺（一種可能的HIV替代受體(ti) ）。

HT29 人結腸癌細胞對c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos癌基因的表達呈陽性。p53抗原產(chan) 生過多，並且p53基因的密碼子273中存在G->a突變，導致Arg->His取代。未檢測到N-myc癌基因的表達。

HT29 人結腸癌細胞參數表

HT29 人結腸癌細胞成瘤驗證

（A）HT29細胞係在 M-NSG 小鼠皮下成瘤曲線 ；（B）HT29 細胞係在成瘤過程中小鼠體(ti) 重變化趨勢（n=5）

HT29人結腸癌細胞培養操作指南

1. 複蘇細胞

• 從(cong) 液氮中取出HT29人結腸癌細胞凍存管，置於(yu) 37℃水浴中，輕搖解凍。

• 解凍後，將HT29細胞懸液與(yu) 適量細胞培養(yang) 基混合均勻。

• 在1000RPM條件下離心4-6分鍾，棄去上清液，補充培養(yang) 基後吹勻。

• 將所有HT29細胞懸液加入培養(yang) 瓶中，培養(yang) 過夜。

2. 細胞傳代

• 當HT29細胞密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 上清，用PBS潤洗HT29細胞1-2次。

• 加入1ml消化液於(yu) 培養(yang) 瓶中，37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 觀察HT29細胞消化情況，判斷消化終點後迅速終止消化，補充培養(yang) 基。

• 吹勻，離心4-6分鍾，棄去上清液，再次補充培養(yang) 基。

• 將HT29細胞懸液分到新皿中或瓶中。

3. 細胞凍存

• 棄去培養(yang) 基後，用PBS清洗HT29細胞，加入胰酶進行消化。

• 加入含血清的培養(yang) 基終止消化後，離心去除上清液。

• 加入新鮮配製的含DMSO的凍存液，凍存管標明HT29細胞種類、日期等信息。

注意事項

• 收貨後觀察HT29細胞瓶是否完好，培養(yang) 液是否漏液等異常情況。

• 用75%酒精擦拭HT29細胞瓶表麵，檢查細胞狀態。

• 細胞貼壁後，定期換液並維持細胞正常培養(yang) 。

• 用相同條件的培養(yang) 基進行HT29細胞培養(yang) ，注意培養(yang) 基的配比。

• 收到HT29細胞後前3天拍照記錄細胞狀態，便於(yu) 跟蹤細胞生長情況。

• HT29人結腸癌細胞僅(jin) 供科研使用。