
HCT116細胞係(人結腸癌細胞)
- 來源:HCT116細胞是一種源自人類結腸癌的惡性細胞係,從(cong) 患有結腸癌的成年男性的結腸中分離。
- 細胞特征:HCT 116細胞具有典型的上皮細胞樣態,其形態特征表現為(wei) 貼壁生長。
- 培養(yang) 基:McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:癌胚抗原(CEA)每10天每106個(ge) 細胞1ng;
HCT 116細胞的來源可以追溯到1979年,當時美國科學家M·Brattain及其團隊首次成功地從(cong) 一位患有結腸癌的成年男性病人的組織樣本中分離出這種細胞。結腸癌是一種常見的惡性腫瘤,起源於(yu) 結腸(大腸)內(nei) 的上皮細胞,通常是由於(yu) 基因突變或其他遺傳(chuan) 變化導致細胞的異常增殖和惡性轉化。
HCT 116細胞係是從(cong) 一名實際患者的癌症組織中分離出來的,並且能夠在體(ti) 外條件下持續增殖和傳(chuan) 代。
HCT116細胞係是人結腸癌上皮細胞,具有ras原癌基因密碼子13的突變,可作為(wei) 該突變的PCR檢測陽性對照。其幹細胞染色體(ti) 數目接近二倍體(ti) ,模式數為(wei) 45(62%),多倍體(ti) 發生率為(wei) 6.8%。所有中期細胞均存在標記10q+和t(?8p;18q),80%的核型細胞存在t(9q;?16p-)。當存在t(9q;?16p-)時,N16為(wei) 單體(ti) ,否則為(wei) 二體(ti) ;而N10和N18始終為(wei) 單體(ti) ,其他染色體(ti) 均為(wei) 二體(ti) 。Q帶觀察顯示有Y染色體(ti) 存在,但並非所有細胞都具有(在G帶核型中,50%的細胞缺乏Y)。此外,HCT116細胞對裸鼠具有致瘤性。
在基因表達方麵,每10天每106個(ge) 細胞可檢測到1ng的癌胚抗原(CEA)。同工酶表達方麵,AK-1,ES-D,G6PD,GLO-I,PGM1和PGM3均為(wei) 陽性。通過免疫過氧化物酶染色,細胞對角蛋白呈陽性。對轉化生長因子β1(TGF-β1)和β2(TGF-β2)也呈陽性反應。
HCT116細胞係產品參數表
產品名稱 | HCT116細胞係(人結直腸腺癌細胞) |
組織來源 | 結腸腺癌;男性 |
細胞種屬 | 人類,Homo sapiens |
形態特征 | 上皮細胞形態,貼壁 |
培養基 | McCoy's 5A+10% FBS+1% P/S |
傳代方法 | 1:3-1:6 |
培養條件 | 空氣,95%; CO2, 5%,37℃ |
細胞特性 | - 通過免疫過氧化物酶染色,細胞對角蛋白呈陽性 - 對轉化生長因子 β1(TGF-β1)和 β2(TGF-β2)呈陽性 |
同工酶 | AK-1: 1;ES-D: 1-2;G6PD: B;GLO-I: 1;PGM1: 1;PGM3: 1 |
突變情況 | 在 ras 原癌基因的密碼子 13 中具有突變 用作 PCR 檢測的陽性對照 |
染色體數目 | 接近二倍體,模式數為45 (62%),多倍體發生率為6.8% |
細胞致瘤性 | 在裸鼠身上有致瘤性 |
基因表達 | 癌胚抗原 (CEA) 每10天每1×10^6個細胞1ng |
倍增時間 | ~17-48小時 |
培養基更新頻率 | 每2到3天更新 |
細胞汙染 | HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
染色體特征 | 標記 10q+ 和 t(?8p;18q)存在於所有中期;t(9q;?16p-)存在於 80% 的核型細胞中 |
N16 在存在 t(9q;?16p-)的情況下是單體(ti) 的,不存在 t 的情況下是二倍體(ti) 的; N10 和 N18 是單體(ti) 的,其他染色體(ti) 是二倍體(ti) 的 | |
Q 帶觀察 | 揭示 Y 染色體的存在,但並非所有細胞中都存在(在 G 帶核型中,50% 的細胞缺乏 Y) |
HCT116細胞係應用
探究藥物對結直腸癌細胞的影響: 例如,通過研究藥物對HCT116細胞增殖、遷移和侵襲的影響,可以深入了解結直腸癌發生和發展的機製。某些藥物如白黴素和Raddeanin A已被證明對HCT116細胞具有一定的抑製作用。
研究藥物對結直腸癌細胞生長的體(ti) 外作用機製: 包括細胞凋亡和細胞周期改變等。通過這些研究可以評估藥物的治療效果和副作用,以及探索其可能的作用機製。
探究藥物對結直腸癌治療的敏感性和耐藥性: 了解藥物對HCT116細胞的治療效果,有助於(yu) 預測患者對治療的響應,並為(wei) 個(ge) 體(ti) 化治療提供依據。
開發新的癌症相關(guan) 信號通路: 例如,研究Notch和Wnt信號通路在HCT116細胞中的作用,有助於(yu) 發現新的治療靶點。
開發LncRNA和miRNA在結直腸癌治療中的新途徑: 如YWHAE長鏈非編碼RNA通過調節信號通路與(yu) miRNA競爭(zheng) ,為(wei) 結直腸癌的治療提供新的思路。
此外,HCT116細胞也廣泛用於(yu) CRISPR/Cas9技術的研究中。通過CRISPR/Cas9技術,可以敲除或突變HCT116細胞中的特定基因,從(cong) 而深入研究這些基因在結直腸癌發生和發展中的作用機製,為(wei) 臨(lin) 床治療提供新的思路。
培養教程
一、培養條件:
培養(yang) 基: 使用RPMI-1640培養(yang) 基(不含Hepes),添加10%胎牛血清和1%雙抗,並且含有800ng/ml的Taxol。
溫度: 在37.0°C下進行培養(yang) 。
氣體(ti) 環境: 采用95%空氣和5%CO2的氣體(ti) 組合。
二、培養步驟:
細胞複蘇:
將含有HCT 116細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含有預熱DMEM完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。
離心後棄去上清液,重懸細胞,並加入含有完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,在37℃培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
細胞傳(chuan) 代:
細胞密度達到80%~90%時,去除培養(yang) 基,用PBS洗滌細胞。
加入含有胰蛋白酶的消化液消化細胞,終止消化後加入新的培養(yang) 基。
根據需要進行傳(chuan) 代,傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2~1:5。
三、細胞保存:
凍存條件: 使用90%血清和10%DMSO的凍存液,放入液氮中保存。
保存時間: 經過適當處理,HCT 116細胞可以保存至少兩(liang) 年。
四、注意事項:
無菌操作: 在進行HCT 116細胞培養(yang) 時,務必保持無菌操作,避免細菌和真菌的汙染。
細胞狀態: 細胞在培養(yang) 過程中應保持良好的狀態,生長密度適中,不宜過度密集或過度稀疏。
細胞檢測: 建議定期檢測HCT 116細胞的形態和生長狀態,確保細胞的穩定性和活力。
五、使用限製:
科研用途: HCT 116細胞僅(jin) 限於(yu) 科研用途,不得用於(yu) 臨(lin) 床治療或其他非科研目的。
合規操作: 在使用HCT 116細胞進行實驗時,應遵守相關(guan) 的倫(lun) 理規定和實驗室操作規程。
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STR鑒定及相關
STR點位信息
Amelogenin | X (CLS; PubMed=11416159; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
X,Y (AddexBio; ATCC; CCRID; Cosmic-CLP; DSMZ; ECACC; KCLB) | |
CSF1PO | 7,9,10,11 (Cosmic-CLP) |
7,10 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; DSMZ; ECACC; KCLB; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=25926053) | |
D2S1338 | 16 |
D3S1358 | 12,18,19 (CCRID; CLS; DSMZ) |
12,19 (PubMed=19372543; PubMed=25877200) | |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 10,12,14,15 (CLS) |
11,12,13,14 (DSMZ) | |
12,14 (CCRID; PubMed=19372543; PubMed=25877200) | |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 11,12,13,14 (DSMZ) |
11,13 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; ECACC; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=25926053) | |
D18S51 | 16,17 (CCRID; CLS; DSMZ; PubMed=19372543) |
17 (PubMed=25877200) | |
D19S433 | 12,13 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 18,23 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 12,13,14 (CLS) |
13,14 (DSMZ; PubMed=25877200) | |
TH01 | 8,9 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; DSMZ; ECACC; KCLB; PubMed=11416159; PubMed=19372543; PubMed=25877200) |
8,9,10 (PubMed=25926053) | |
TPOX | 8 (ECACC; KCLB; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
8,9 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; DSMZ) | |
vWA | 17 (PubMed=11416159; PubMed=19372543) |
17,21,22,23 (DSMZ) | |
17,22 (AddexBio; ATCC; CCRID; CLS; Cosmic-CLP; ECACC; KCLB; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
參考文獻
- 摘要:目的:研究沙棘、肉豆蔻及其組方對人結腸癌細胞株HCT-116生長及侵襲轉移的影響,探討其作...
- 解放軍醫學雜誌 > 2009年11期
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- 現代消化及介入診療 > 2020年7期
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