
MC38小鼠結腸癌細胞
- 來源:結腸腺癌;C57BL/6;
- 細胞特征:貼壁, 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:MC38細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因
MC38小鼠結腸癌細胞的來源和建係過程:由M.H.Tan等使用1, 2-二甲基肼誘導C57BL/6小鼠產(chan) 生結腸腺癌,然後從(cong) 腫瘤組織中獲取結腸腺癌上皮細胞係,去除成纖維細胞得到MC38細胞係。
MCA-36結腸腺癌細胞係也是通過相同的誘導方法在BALB/c小鼠中建立的,不同之處在於(yu) 對胰酶敏感,因此篩選方法有所不同。在體(ti) 外培養(yang) 條件下,MC38細胞傳(chuan) 代10次,MCA-36細胞傳(chuan) 代12次後均未觀察到形態學變化。
體(ti) 內(nei) 實驗結果顯示,將MC38和MCA-36純化的腫瘤細胞分別在BALB/c和C57BL/6小鼠皮下再植,腫瘤生長無組織學變化。
MC38小鼠結腸癌細胞產品參數表
細胞名稱 | MC38小鼠結腸癌細胞 |
細胞別稱 | MC38;MC38-LU;小鼠結腸癌細胞 |
種屬來源 | C57BL/6小鼠 |
組織來源 | 結腸 |
生長特性 | 貼壁 |
特性 | 上皮樣,貼壁生長 |
細胞形態 | MC38細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因 |
藥物篩選濃度 | MC38-LUC細胞puro藥篩濃度為(wei) 1. 0ug/ml,培養(yang) 過程中可不用再添加puro ,如若擔心抗性隨著傳(chuan) 代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶 或 1mL凍存管 |
培養基 | DMEM+10% FBS+PS+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%穀氨酰胺+1%HEPES |
培養條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 液氮凍存(凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO) |
運輸條件 | 幹冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶) |
分子標記 | 熒光素酶 |
支原體檢測 | 無 |
建係方法 | 使用1, 2-二甲基肼誘導C57BL/6小鼠產(chan) 生結腸腺癌,然後從(cong) 腫瘤組織中獲 取結腸腺癌上皮細胞係,去除成纖維細胞得到MC38細胞係 |
體外傳代 | MC38細胞傳代10次,MCA-36細胞傳代12次後未觀察到形態學變化 |
培養教程
MC38細胞(小鼠結腸癌細胞)培養教程
培養(yang) 液配方:
45ml DMEM+5ml 胎牛血清+500ul 雙抗
凍存液配方:
90% 血清+10% DMSO
細胞複蘇:
將保存在-80℃中的MC38細胞凍存管置於(yu) 37℃水浴鍋中融化。
將融化的細胞轉移到5 mL離心管中,以180 g離心5分鍾,然後棄上清。
加入1 mL細胞培養(yang) 液(DMEM + 10% FBS)重懸MC38細胞。
將懸浮的細胞轉移到8 mL培養(yang) 皿中。
在37℃、5% CO2條件下培養(yang) MC38細胞。
細胞換液:
棄去培養(yang) 液,用1 ~2ml的PBS清洗MC38細胞,洗淨。
棄掉PBS,加入8 mL培養(yang) 液。
細胞傳代:
取對數生長期的MC38細胞,用1 mL PBS洗淨。
加入1 mL胰酶消化,等MC38細胞變圓時加入1 mL細胞培養(yang) 液停止消化。
將消化後的MC38細胞培養(yang) 液轉移到5 mL離心管中,以180 g離心5分鍾,然後棄上清。
加入2 mL細胞培養(yang) 液重懸MC38細胞,並將其轉移到新的培養(yang) 皿中。
在37 ℃、5% CO2條件下培養(yang) MC38細胞。
細胞凍存:
取對數生長期的MC38細胞,用1 mL PBS洗淨。
加入1 mL胰酶消化,等MC38細胞變圓時加入1 mL細胞培養(yang) 液停止消化。
將消化後的MC38細胞培養(yang) 液轉移到5 mL離心管中,以180 g離心5分鍾,然後棄上清。
加入1 ml細胞凍存液(90% 血清 + 10% DMSO)。
置於(yu) 冰箱凍存。
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參考文獻
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