SW948細胞（人結腸腺癌細胞）

SW948細胞係來源於(yu) 一位81歲白人女性患者的結腸腺癌。SW948細胞係取自其結腸組織，具體(ti) 為(wei) Dukes C級III型結腸腺癌。SW948細胞表現出上皮樣形態，用於(yu) 研究結腸癌的機製與(yu) 治療方法。

SW948細胞特性特征

• 致瘤性：sw948細胞在裸小鼠中具有致瘤性；皮下接種107個(ge) 細胞後，21天內(nei) 以100%頻率(5/5)形成腫瘤

• 癌基因表達：c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb和fos呈陽性、p53基因呈陽性；未檢測到N-myc和sis癌基因表達、abl和src基因呈陰性

• 抗原表達：血型：O型血；Rh陽性、角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性

• 基因表達：癌胚抗原(CEA)：7ng/106個(ge) 細胞/10天；結腸特異性抗原(CSAp)：750單位/0.5mL細胞超聲處理液；

• 通過免疫過氧化物酶染色，細胞角蛋白呈陽性。

• 同工酶特征：ES-D，1；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1，1-2；PGM3，1-2

• 細胞貼壁偏緊聚團生長，傳(chuan) 代時消化時間需延長；

• 有漂浮細胞和間隙空泡存在，是細胞正常特性，非細胞狀態異常。

SW948細胞參數表

SW948人結腸腺癌細胞培養教程

SW948細胞的傳代步驟

• 觀察匯合度：當SW948細胞達到80-90%匯合度時進行傳(chuan) 代。

• 清洗：用PBS輕輕清洗SW948細胞單層。

• 消化：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，在37°C孵育2-5分鍾。

• 終止消化：加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基，終止消化過程。

• 離心：以1000rpm離心5分鍾，收集SW948細胞。

• 接種：按1:3或1:4的比例將SW948細胞重新接種到新的培養(yang) 瓶中。

換液頻率

• 培養(yang) 基更換：通常每2-3天更換一次SW948細胞的培養(yang) 基。

SW948細胞凍存

• 凍存液配製：使用90%培養(yang) 基 + 10% DMSO的凍存液。

• 降溫：緩慢降溫至-80°C，然後轉移至液氮中進行長期保存。

SW948細胞複蘇

• 解凍：快速解凍凍存管於(yu) 37°C水浴中。

• 添加培養(yang) 基：緩慢將SW948細胞懸液加入預熱的培養(yang) 基中。

• 離心：離心去除DMSO。

• 接種：重懸SW948細胞並接種到培養(yang) 瓶中。

常見問題及解決方案

• 細胞生長緩慢或停滯

• 原因：SW948細胞的培養(yang) 基成分不適、血清質量差、培養(yang) 條件不合適。

• 解決(jue) 方法：檢查並更換培養(yang) 基和血清，確保培養(yang) 條件符合要求（37°C，5% CO2隻適用於(yu) DMEM體(ti) 係）。

  
  

• 細胞汙染

• 原因：操作不當、培養(yang) 基或器具汙染。

• 解決(jue) 方法：嚴(yan) 格無菌操作，定期更換培養(yang) 基，使用經過滅菌處理的器具。

  
  

• 細胞形態改變

• 原因：SW948細胞的培養(yang) 條件不適、細胞過度傳(chuan) 代、汙染。

• 解決(jue) 方法：調整培養(yang) 條件，避免過度傳(chuan) 代，定期監測細胞形態。

  
  

• 細胞貼壁不良

• 原因：培養(yang) 基成分不適、SW948細胞消化不完全或過度消化。

• 解決(jue) 方法：優(you) 化培養(yang) 基成分，控製胰酶消化時間，確保細胞適當貼壁。

  
  

• 細胞死亡率高

• 原因：凍存和複蘇過程不當、培養(yang) 基成分不適、汙染。

• 解決(jue) 方法：優(you) 化凍存和複蘇步驟，確保培養(yang) 基成分適當，嚴(yan) 格無菌操作。

  
  

• 細胞傳(chuan) 代問題

• 原因：SW948細胞的傳(chuan) 代比例不當、細胞密度過高或過低。

• 解決(jue) 方法：根據SW948細胞的生長情況調整傳(chuan) 代比例，保持適當的細胞密度。

  
  

• 細胞特性變化

• 原因：長期傳(chuan) 代、基因突變、汙染。

• 解決(jue) 方法：定期進行SW948細胞特性鑒定（如STR分析），確保細胞係的純度和真實性。

  
  

• 角蛋白表達減弱

• 原因：細胞狀態不佳、傳(chuan) 代次數過多。

• 解決(jue) 方法：優(you) 化培養(yang) 條件，限製傳(chuan) 代次數，保持SW948細胞的特性。

  
  

• 細胞凍存和複蘇問題

• 原因：凍存液配製不當、降溫速率不合適、複蘇過程不當。

• 解決(jue) 方法：使用正確的凍存液（90%培養(yang) 基+10%DMSO），緩慢降溫至-80°C後轉移至液氮中，快速解凍並緩慢加入預熱培養(yang) 基。