貨號：STM-CL-5280 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

NCM460細胞（人正常結腸上皮細胞）

來源：結腸粘膜
細胞特征：貼壁細胞，上皮細胞樣
培養(yang) 基：生長培養(yang) 基：1640+10% FBS+1% P/S
其他：NCM460細胞角蛋白的陽性率超過90% ；表達腸上皮標誌性的絨毛和人分泌成分

Tags：結腸上皮細胞

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價(jia) 格：￥ 2,300.00

提供STR鑒定報告

NCM460細胞係來源於(yu) 一名68歲西班牙裔男性的正常結腸上皮組織。患者因患有分化不良的胃腫瘤而接受部分胃切除術，手術切除的邊緣延伸至橫結腸部分。這部分橫結腸組織被病理學家確定為(wei) 正常，並用於(yu) NCM460細胞的原代培養(yang) 。
NCM460是通過體(ti) 外培養(yang) 技術從(cong) 正常結腸上皮細胞中分離並建立的人源正常結腸上皮細胞係。這些細胞表現出多克隆能力，能夠在體(ti) 外分化。

NCM460細胞特征

NCM460細胞角蛋白的陽性率超過90%
表達腸上皮標誌性的絨毛和人分泌成分
對內(nei) 皮標誌物（如因子VIII）和多種淋巴細胞標誌物（如CD4和CD23）呈陰性
偶爾有細胞亞(ya) 群的波形蛋白呈陽性
通過周期性酸希夫染色和免疫測定，顯示出神經內(nei) 分泌標誌物鉻粒蛋白的表達
存在粘蛋白陽性細胞
NCM460細胞不會(hui) 在軟瓊脂中生長
NCM460細胞在裸鼠中無致瘤性。

NCM460細胞參數表

細胞名稱	NCM460細胞（人正常結腸上皮細胞）
細胞別稱	NCM460 ； NCM-460
細胞類型	人正常結腸上皮細胞
來源	68歲西班牙裔男性的橫結腸正常組織
形態生長特性	上皮細胞樣；貼壁生長
生物安全等級	1級
致瘤性	在免疫抑製小鼠和半固體培養基中無致瘤性
收錄	LONZA
培養基	1640培養基；10% FBS；1% 青黴素/鏈黴素 (P/S)
培養環境	37℃，5% CO2，飽和濕度
換液周期	2-3天
傳代比例	1:2 - 1:4（視細胞生長速度及密度決定）
凍存液配方	92% FBS + 8% DMSO 或 92% 完全培養基 + 8% DMSO
細胞角蛋白表達	陽性率超過90%
腸上皮標誌物	表達絨毛和人分泌成分，陽性
內皮標誌物	因子VIII陰性
淋巴細胞標誌物	CD4和CD23陰性
波形蛋白	偶爾細胞亞群呈陽性
神經內分泌標誌物	表達鉻粒蛋白
粘蛋白	存在粘蛋白陽性細胞
多克隆能力	具有體外分化的多克隆能力
軟瓊脂生長	不在軟瓊脂中生長
分化能力	可從非專用細胞分化為具有專用特征和功能的專用組織
保存期限	液氮中永久保存

培養教程

NCM460人正常結腸上皮細胞培養教程

細胞複蘇

將含1mL NCM460細胞懸液的凍存管在37℃水浴中快速解凍。
將解凍的細胞懸液加入4-6mL預熱的完全培養(yang) 基中。
1000rpm離心3-5分鍾，棄上清。
用新的完全培養(yang) 基重懸細胞。
將細胞懸液轉移到含6-8mL完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。
37℃培養(yang) 過夜，次日觀察細胞狀態。

細胞傳代

當NCM460細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去培養(yang) 上清，用不含Ca2+和Mg2+的PBS輕輕潤洗細胞1-2次。
加入1-2mL 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液（用於(yu) T25瓶）。
37℃孵育1-2分鍾，觀察細胞脫落情況。
加入3-4mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
1000rpm離心3-5分鍾，棄上清。
用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸細胞。
按1:2至1:4的比例將細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中。
補充完全培養(yang) 基至6-8mL（T25瓶）。

換液周期

換液周期：每2-3天更換一次培養(yang) 基。
培養(yang) 基用量： T25瓶使用10-12mL，10cm培養(yang) 皿使用12-15mL。

細胞凍存

凍存液配方： 92% FBS + 8% DMSO 或 92%完全培養(yang) 基 + 8% DMSO。
凍存方法：按常規方法收集細胞，製備細胞懸液。緩慢降溫後轉入-80℃冰箱或液氮中長期保存。

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參考文獻

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