NCI-H508細胞（人結腸直腸腺癌細胞）

NCI-H508細胞係源自一名55歲的白人男性結直腸腺癌患者的盲腸腹壁轉移組織，患者曾接受5-氟尿嘧啶治療。
NCI-H508細胞胞具有以下特征：模態數為(wei) 102，範圍在71到131之間，大多數細胞患有糖尿病。

NCI-H508細胞具有以下分子特征、表達特征和基因特征

• 致瘤性：在裸小鼠中，接種107個(ge) 細胞的裸鼠在21天內(nei) 以100%的頻率（5/5）出現腫瘤。

• 抗原表達：表達A型血和Rh+血型，CA19-9抗原。

• 基因表達：癌胚抗原（CEA）表達為(wei) 1709 ng/mL/10^6細胞/10天。

• 同工酶：AK-1為(wei) 1，ES-D為(wei) 1，G6PD為(wei) B型，GLO-I為(wei) 2，Me-2為(wei) 1，PGM1為(wei) 1，PGM3為(wei) 1。

• 其他特征：NCI-H508細胞包含多巴脫羧酶和CEA，但不表達TAG-72抗原。

NCI-H508細胞參數表

NCI-H508人結腸直腸腺癌細胞培養教程

NCI-H508細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出NCI-H508細胞凍存管，迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍。

• 將NCI-H508細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H508細胞，轉移到培養(yang) 瓶中。

日常培養

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 觀察NCI-H508細胞生長狀態，保持細胞密度在適當範圍內(nei) 。

NCI-H508細胞傳代步驟

• 當NCI-H508細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗NCI-H508細胞1-2次。

• 加入2 ml 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液。

• 置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 顯微鏡下觀察NCI-H508細胞，大部分變圓並脫落時，加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 補加培養(yang) 基至6-8 ml，輕輕打勻。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。

• 用1-2 ml新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H508細胞。

• 按1:2到1:4的比例將NCI-H508細胞分配到新的培養(yang) 瓶中。

NCI-H508細胞凍存

• 用PBS清洗NCI-H508細胞後，加入1 ml胰酶消化。

• NCI-H508細胞脫落後，加入1 ml含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清。

• 用1 ml血清重懸NCI-H508細胞，加入適量血清和DMSO（終濃度5%）。

• 調整NCI-H508細胞密度至少1x10^6/ml。

• 將NCI-H508細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 ml。

• 使用程序降溫盒，將NCI-H508細胞凍存管置於(yu) -80℃冰箱至少2小時。

• 最後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 定期檢查NCI-H508細胞形態和生長狀態。

• 保持無菌操作，預防汙染。

• NCI-H508細胞代數不宜過高，建議在10代以內(nei) 使用。

• 定期進行支原體(ti) 檢測。

補充說明

• NCI-H508細胞在不同實驗條件下的表現：

• 在標準培養(yang) 條件下（37℃，5% CO2，RPMI-1640 + 10% FBS），NCI-H508細胞生長良好，倍增時間約為(wei) 32小時。

• 對某些化療藥物（如5-氟尿嘧啶）可能表現出一定的耐藥性。

• 在三維培養(yang) 條件下可能形成類器官結構。

• 作為(wei) 轉移性癌細胞，在侵襲和遷移實驗中可能表現出較強的能力。

  
  

• NCI-H508細胞凍存注意事項：

• 使用完全培養(yang) 基加5% DMSO作為(wei) 凍存介質。

• NCI-H508細胞密度不應低於(yu) 1x10^6/ml。

• 凍存過程應緩慢進行，使用程序降溫盒。

  
  

• NCI-H508細胞傳(chuan) 代步驟所需時間：

• 消化時間：1-2分鍾。

• 離心時間：4分鍾。

• 其他操作（如PBS清洗、加培養(yang) 基、分裝等）：約10-15分鍾。

• 整個(ge) NCI-H508細胞傳(chuan) 代過程大約需要20-30分鍾。