
NCI-H716細胞係 (人結直腸腺癌細胞係)
- 來源:盲腸;疾病:結直腸腺癌
- 細胞特征:半貼半懸, 上皮細胞,懸浮並部分聚團生長
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H716細胞含有多巴脫羧酶;細胞質中有核心致密的內(nei) 分泌型顆粒
NCI-H716細胞係是一種人源結直腸腺癌細胞係,於(yu) 1984年從(cong) 一名33歲白人男性結直腸腺癌患者的盲腸腹水中分離。該患者在細胞係建立前接受過5-氟尿嘧啶(5-FU)治療。ncih716細胞係表現出淋巴母細胞樣形態,是一種亞(ya) 二倍體(ti) 人類細胞係。
NCI-H716細胞係細胞特性
染色體特征
模態數為(wei) 61,範圍為(wei) 55到64
模式染色體(ti) 數目61出現在28%的細胞中
高倍體(ti) 率為(wei) 1.2%
每個(ge) 細胞中有12條標記染色體(ti) ,包括t(7q, 16q)、t(5p, 7p)等
每個(ge) 細胞中都發現大量雙微染色體(ti) (DM)
21號染色體(ti) 缺失;9、11、13、20、22號染色體(ti) 和X染色體(ti) 為(wei) 單拷貝
Q帶載玻片製備中未檢測到Y染色體(ti)
生長特性
半貼壁半懸浮生長
細胞形態:上皮細胞樣,主要呈懸浮狀態,少量貼壁,部分細胞形成聚團
倍增時間:約50小時
生化特性
含有多巴脫羧酶
細胞質中有核心致密的內(nei) 分泌型顆粒
不表達TAG-72或CA19-9抗原
不產(chan) 生癌胚抗原(CEA)
同工酶譜
AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1-2
致瘤性
在裸小鼠中具有強烈致瘤性。皮下注射1×10^7個(ge) 細胞後,21天內(nei) 100%(5/5)的裸鼠形成腫瘤。
NCI-H716細胞係參數表
細胞名稱 | NCI-H716細胞係 (人結直腸腺癌細胞係) |
細胞 別稱 | NCI-H716 ; NCI H716; h716; H-716; NCIH716 |
種屬組織來源 | 人(Homo sapiens); 盲腸;結直腸腺癌 |
患者信息 | 33歲白人男性 |
建係時間 | 1984年 |
建係前處理 | 5-氟尿嘧啶(5-FU)治療 |
細胞類型 | 癌細胞;腺癌細胞 |
生長特性 | 半貼壁半懸浮生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,主要懸浮,少量貼壁,部分形成聚團 |
特殊形態 | 淋巴母細胞樣 |
倍增時間 | 約50小時 |
基礎培養基 | RPMI-1640+10% FBS+青黴素/鏈黴素(PS) |
培養環境 | 37°C,5% CO2 |
傳代比例 | 1:3-1:4 |
換液頻率 | 每周2-3次 |
凍存液成分 | 55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮 |
複蘇方法 | 37°C水浴,快速解凍 |
特殊酶 | 多巴脫羧酶 |
細胞內顆粒 | 核心致密的內分泌型顆粒 |
抗原表達 | 不表達TAG-72、CA19-9、CEA |
同工酶譜 | AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, PGM3 |
致瘤性 | 裸小鼠中表現出強烈的致瘤性,接種10^7個細胞的裸鼠在21天內以100%的頻率形成腫瘤 |
藥物敏感性 | 5-FU:已經過治療,可能存在耐藥性 |
生物安全等級 | BSL-1 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞代數 | 10代以內 |
保藏信息 | ATCC(編號CCL-251); 中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心 |
主要用途 | 結直腸癌研究、腸道內分泌功能研究、藥物篩選和評估、腫瘤生物學研究 |
培養教程
NCI-H716人結直腸腺癌細胞係培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出NCI-H716細胞凍存管,迅速在37°C水浴中解凍
解凍後,立即將細胞懸液轉移至預熱的培養(yang) 基中以最大限度地保持細胞活力
通過1000rpm的離心步驟清除凍存液,然後重新懸浮細胞並轉移至預先準備好的培養(yang) 瓶中
日常培養
每隔2-3天更換一次培養(yang) 基,以維持細胞在70-80%的密度範圍內(nei) 生長
定期觀察細胞的形態和生長狀態,確保細胞健康和培養(yang) 條件的維持
細胞傳代
收集NCI-H716細胞的懸浮部分,輕柔地吹洗培養(yang) 瓶底部以收集輕度貼壁的細胞
通過1000rpm的離心步驟清除舊培養(yang) 基,然後將細胞重新懸浮並按照1:3-1:4的比例傳(chuan) 代到新的預熱培養(yang) 瓶中
細胞凍存
收集對數生長期的NCI-H716細胞以確保最佳凍存效果
準備適合細胞的凍存液:含55%基礎培養(yang) 基,40% FBS和5% DMSO
調整細胞密度至1-5×10^6 cells/mL後,分裝細胞懸液至凍存管中,先放置於(yu) -80°C過夜,隨後長期存儲(chu) 於(yu) 液氮罐中
注意事項
NCI-H716細胞主要以懸浮生長為(wei) 主,少量貼壁,傳(chuan) 代時需特別注意收集懸浮細胞以確保細胞健康和一致性
定期檢查細胞的形態和生長狀態,確保細胞培養(yang) 條件的穩定性和無菌性
細胞代數不應過高,建議在10代以內(nei) 使用細胞以保持其生物學特性和實驗結果的一致性
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 14,16 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 11 (AddexBio=C0009022/5006; ATCC=CCL-251; CCRID; Cosmic-CLP=908458; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
12 (KCLB=10251) | |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 12.2,14,15 (CCRID) |
15 (ATCC=CCL-251; PubMed=25877200) | |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 15,18.2 |
D21S11 | 32.2 |
FGA | 20,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 7,12 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 (CCRID) |
16,17 (AddexBio=C0009022/5006; ATCC=CCL-251; Cosmic-CLP=908458; KCLB=10251; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
