HCT-15細胞係（人結直腸腺癌細胞係）

HCT-15是從(cong) 一位男性Dukes' C期直腸癌患者的大腸組織中分離出的結直腸腺癌細胞係，廣泛應用於(yu) 癌症和毒理學研究。hct15細胞係是轉染實驗的理想宿主。

雖然DNA指紋圖譜顯示該細胞係與(yu) DLD-1細胞係來源於(yu) 同一患者，但同工酶分析和細胞遺傳(chuan) 學檢測結果仍存在一定差異，導致一些疑問尚未解決(jue) 。

HCT-15細胞是一種準二倍體(ti) 細胞係，其中76%的細胞表現出模式染色體(ti) 數46（50個(ge) 中期的染色體(ti) 數範圍為(wei) 41至47），多倍體(ti) 發生率為(wei) 5.1%。染色體(ti) 核型為(wei) 46, XY，-8，-11，-17，t(8:17)(p23)，inv(11)(p15.3q13.1)。Y染色體(ti) 長度較N22稍長，q臂末端有一大段異色熒光。

HCT-15細胞係特性特征

• hct15細胞在裸小鼠身上致瘤,皮下接種10^7個(ge) 細胞的裸鼠在21天內(nei) 以100%的頻率（5/5）出現腫瘤。

• hct15細胞為(wei) CSAp陰性(CSAp-)，但角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。癌胚抗原(CEA)表達量為(wei) 5.4ng/10^6個(ge) 細胞/10天。
  

• hct15細胞的同工酶譜為(wei) :ES-D,2;G6PD,B;PEP-D,1;PGD,A;PGM1,1-2;PGM3,1
  

HCT-15細胞係參數表

HCT-15人結直腸腺癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將凍存的HCT-15細胞迅速放入37°C的水浴中融化，盡量縮短融化時間以減少HCT-15細胞的損傷(shang) 。

• 將融化後的HCT-15細胞懸液轉移至15ml離心管中，加入5ml預熱的完全培養(yang) 基進行稀釋。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液，隨後用5ml新鮮的培養(yang) 基重懸HCT-15細胞。

• 將重懸後的HCT-15細胞接種到T25培養(yang) 瓶中，並加入適量的培養(yang) 基，確保HCT-15細胞充分擴展。

常規傳代

• HCT-15細胞的傳(chuan) 代頻率為(wei) 每2-3天進行一次，以維持HCT-15細胞的良好生長狀態。

• 在傳(chuan) 代過程中，首先棄去舊的培養(yang) 基，並用PBS緩衝(chong) 液洗滌HCT-15細胞層，以去除殘留的血清和代謝廢物。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，並在37°C下消化3-5分鍾，期間通過顯微鏡觀察HCT-15細胞的脫落情況。

• 一旦HCT-15細胞脫落，立即加入培養(yang) 基終止消化作用。

• 將HCT-15細胞懸液轉移至15ml離心管中，以1000rpm離心5分鍾。

• 棄去上清後，加入新鮮培養(yang) 基重懸HCT-15細胞，並按1:3的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

• HCT-15細胞應在37°C、5% CO2培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ，以確保HCT-15細胞穩定的生長環境。

注意事項

• HCT-15細胞複蘇後，應盡快更換新鮮培養(yang) 基，以促進HCT-15細胞恢複。

• 若HCT-15細胞呈懸浮狀態，需及時離心並用含15% DMSO的培養(yang) 基重懸HCT-15細胞。

• 培養(yang) 過程中，需定期檢查HCT-15細胞的生長狀態，確保HCT-15細胞健康並避免過度生長。

• 操作過程中需嚴(yan) 格遵循無菌技術，以防止HCT-15細胞交叉汙染。

FBS濃度對細胞生長的影響

• 低濃度FBS培養(yang) 基：在含10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基中，HCT-15細胞保持良好的上皮細胞樣貼壁生長。當FBS濃度降低至5%時，HCT-15細胞增殖速度明顯減慢，生長狀態不佳。

• 無血清培養(yang) 基：HCT-15細胞在無血清培養(yang) 基中無法正常生長，出現大量HCT-15細胞脫落和死亡。因此，無血清培養(yang) 基不適合HCT-15細胞的常規培養(yang) ，建議補充至少10%的FBS。

• 高濃度FBS培養(yang) 基：當FBS濃度提高至15%或20%時，HCT-15細胞的增殖速度與(yu) 10% FBS組相比並無顯著差異。過高的血清濃度可能會(hui) 對HCT-15細胞的生理狀態產(chan) 生不利影響，因此不建議在常規培養(yang) 中使用過高濃度的FBS。