
COLO320細胞(人結直腸腺癌細胞)
- 來源:結直腸
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:90% RPMI-1640+10% FBS+ 1% P/S
- 其他:COLO320細胞能夠合成多種生物活性物質,包括複合胺和腎上腺素
COLO320細胞是一株源自55歲女性乙狀結腸中度未分化腺癌的細胞係,其腫瘤組織已確診為(wei) Dukes C型,癌細胞已經擴散至淋巴結,但尚未遠處轉移。COLO320細胞能夠產(chan) 生多種激素,包括血清素和腎上腺素,並且其表達MYC mRNA。COLO320細胞具備合成複合胺及腎上腺素的能力,常用於(yu) 結直腸癌相關(guan) 的基礎科研及藥物篩選。
COLO320細胞特性特征
生長特性:COLO320細胞係表現為(wei) 貼壁生長,細胞形態類似於(yu) 上皮細胞。
激素合成:COLO320細胞能夠合成多種生物活性物質,包括複合胺和腎上腺素。
COLO320細胞還可以產(chan) 生血清素(5-羥色胺)和去甲腎上腺素。
基因表達:該細胞係表達MYC mRNA,這與(yu) 細胞增殖和腫瘤形成相關(guan) 。
COLO320細胞參數表
細胞名稱 | COLO320細胞(人結直腸腺癌細胞) |
別稱 | COLO320;人結直腸腺癌細胞 |
年齡性別 | 女,55歲 |
組織來源 | 乙狀結腸中度未分化腺癌 |
腫瘤分期 | Dukes C型 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞代數 | 10代以內 |
生物安全等級 | 1 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳;溫度:37℃;濕度:70%-80% |
凍存條件 | 90%血清 + 10% DMSO,液氮儲存 |
運輸方式 | 幹冰運輸或複蘇存活細胞 |
傳代密度 | 達到80%-90%時進行傳代 |
傳代比例 | 1:2 |
激素合成 | 血清素、腎上腺素、複合胺 |
基因表達 | 表達MYC mRNA |
細胞用途 | 僅供科研使用 |
特別說明 | 僅限於科學研究,絕不可用於人類疾病的治療產品使用 |
培養教程
COLO320人結直腸腺癌細胞培養教程
COLO320細胞複蘇步驟
解凍細胞:將含有1 mL COLO320細胞懸液的凍存管在37℃水浴中快速解凍,期間輕輕搖晃使COLO320細胞均勻分布。
離心清洗:將解凍後的COLO320細胞懸液轉移至含4-6 mL完全培養(yang) 基的離心管中,混勻後以1000 RPM離心3-5分鍾,棄去上清。
重懸細胞:用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸COLO320細胞,轉移到T25培養(yang) 瓶中。
細胞培養(yang) :將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中孵育過夜,觀察COLO320細胞的貼壁情況。
COLO320細胞傳代
細胞密度檢查:當COLO320細胞達到80%-90%匯合時,進行傳(chuan) 代。
PBS清洗:棄去舊培養(yang) 基,用無鈣鎂的PBS清洗COLO320細胞1-2次,清除殘餘(yu) 的培養(yang) 基成分。
加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA溶液,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,期間觀察COLO320細胞形態變化。
當COLO320細胞變圓並脫落時,輕輕敲擊培養(yang) 瓶,使所有COLO320細胞脫落,並加入培養(yang) 基終止消化。
在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液後,用適量培養(yang) 基重懸COLO320細胞。
傳(chuan) 代比例:按1:2比例將COLO320細胞懸液均勻分配至新的培養(yang) 瓶中,補加8 mL培養(yang) 基後,繼續37℃培養(yang) 。
COLO320細胞凍存
凍存液配製:90%胎牛血清 + 10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)用於(yu) COLO320細胞的凍存。
細胞消化與(yu) 計數:按傳(chuan) 代步驟消化COLO320細胞,並計數,確保每凍存管中COLO320細胞的密度不低於(yu) 1×10^6/mL。
重懸細胞:將COLO320細胞重懸於(yu) 凍存液中,按1 mL/凍存管分裝。
程序降溫:將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,先放入-80℃冰箱2小時後再轉入液氮罐中長期保存COLO320細胞。
注意事項
無菌操作:確保整個(ge) 過程無菌,避免COLO320細胞培養(yang) 時的汙染。
培養(yang) 基更換:複蘇或傳(chuan) 代後的COLO320細胞應使用新鮮完全培養(yang) 基,避免使用舊培養(yang) 基。
細胞狀態監控:複蘇後的COLO320細胞需及時檢查其貼壁、生長狀態,若發現汙染,應立即采取措施處理。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 18,25 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 16.2 (PubMed=25877200) |
17 (DSMZ=ACC-144) | |
D21S11 | 33.2 |
FGA | 20 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 11 (DSMZ=ACC-144) |
11,13 (PubMed=25877200) | |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 15,18 |