LS1034細胞（人結腸腺癌細胞）

LS1034細胞係是一種人結腸腺癌上皮細胞係，於(yu) 1989年從(cong) 一名54歲高加索男性的盲腸癌活檢中分離，患者被診斷為(wei) Dukes C型中度至低分化的結腸癌，表明腫瘤已侵入周圍組織但未轉移，患者沒有表現出家族性腺瘤性息肉病（FAP），正常組織沒有APC基因缺失。

LS1034細胞在癌症研究中具有重要意義(yi) ，特別是在癌胚抗原（CEA）表達和生物學特性研究方麵。LS1034細胞的遺傳(chuan) 特征顯示模態號為(wei) 77，涉及1、7、14、X及18號染色體(ti) 的7個(ge) 標記。LS1034細胞廣泛應用於(yu) 結直腸癌的基礎研究和藥物篩選等領域。

LS1034細胞特性特征

• 染色體(ti) 標記：LS1034細胞涉及1、7、14、X和18號染色體(ti) 的標記。具體(ti) 表現為(wei) 單體(ti) 7和單體(ti) 14的存在，而正常的5號或18號染色體(ti) 未被觀察到。

• 致瘤性：在裸鼠體(ti) 內(nei) 能夠形成腫瘤，表明其具有較強的致瘤能力。

• 癌症基因：p53+（突變，245位Gly-->Ser突變）；APC（突變、缺失，GAAAAGATT-->密碼子1309處的GATT）

• 表達癌胚抗原（CEA），超過90%的LS1034細胞表麵表達CEA。

• LS1034細胞表達主要組織相容性（MHC）I類抗原和β2微球蛋白，但未檢測到II類抗原（HLA-DR、DQ和DP）。
  

• 生長因子：未檢測到可測量量的潛在轉化生長因子β-1（TGF-β-1）分泌。皮摩爾濃度的TGF-β-1、TGF-β-2和TGF-β-3對LS1034細胞的增殖有抑製作用。

• LS1034細胞具有多藥耐藥性（MDR），能夠在無血清培養(yang) 基中增殖，顯示出其對藥物治療的抵抗能力。
  

• LS1034細胞在含有5%胎牛血清的甲基纖維素培養(yang) 基中，集落形成效率為(wei) 3%。與(yu) 含有血清的半固體(ti) 培養(yang) 基相比，無血清甲基纖維素的集落形成能力提高了600%

LS1034細胞參數表

LS1034人結腸腺癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 檢查凍存管是否完好，確保無漏液現象。
  

• 將凍存管置於(yu) 37℃水浴中迅速解凍，輕輕搖晃以混勻含有1 mL LS1034細胞的懸液。

• 解凍後，加入4 mL RPMI-1640培養(yang) 基（含10%胎牛血清和1%抗生素），混合均勻。
  

• 在1000 rpm條件下離心3分鍾，棄去上清液。
  

• 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打均勻以重懸LS1034細胞。
  

• 將LS1034細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入適量培養(yang) 基，培養(yang) 過夜。
  

• 第二天檢查LS1034細胞狀態並更換培養(yang) 基。
  

細胞傳代

• 當LS1034細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗LS1034細胞1-2次。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），確保液體(ti) 覆蓋所有LS1034細胞。
  

• 棄去消化液，放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察細胞狀態，若細胞變圓並脫落，輕輕敲擊瓶壁並加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 補加6-8 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕混勻後轉移至無菌離心管中，在1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打均勻。

• 將LS1034細胞懸液按1:2比例分配到新的T25瓶或其他合適容器中，放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
  

細胞凍存

• 收集狀態良好的LS1034細胞及其培養(yang) 液，裝入無菌離心管中，在1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清液並用PBS清洗一次。
  

• 計數LS1034細胞，並調整至5×10⁶至1×10⁷/mL的濃度，加入無血清凍存液（如90%胎牛血清+10% DMSO），輕輕混勻。
  

• 清晰標識凍存管，將其放入-80℃冰箱冷凍24小時後轉入液氮儲(chu) 存，並記錄位置以便日後取用。