SW48細胞係（人結腸腺癌細胞係）

SW48細胞係是一種來源於(yu) 人類結腸腺癌的細胞，最初從(cong) 一名82天大的白人女性四級Dukes C結直腸癌患者的大腸組織中分離。SW48細胞係適合作為(wei) 轉染宿主。

SW48細胞係特性特征

• 致瘤性：SW48細胞在裸小鼠身上具有致瘤性，皮下接種10^7個(ge) 細胞的裸鼠在21天內(nei) 以100%的頻率（5/5）出現腫瘤。
  

• 抗原表達：HLA-A32、A33、B27、B35；AB型血；Rh+ 

• 癌胚抗原（CEA）：0.6 ng/10^6個(ge) 細胞/10天。

• 角蛋白：SW48細胞通過免疫過氧化物酶染色，角蛋白呈陽性。

• 同工酶：ES-D，1；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1，1；PGM3，1-2

• SW48細胞CSAp陰性（CSAp-）。

• KRAS突變：SW48細胞具有KRAS基因突變
  

SW48細胞係參數表

SW48人結腸腺癌細胞係培養教程

SW48細胞複蘇步驟

• 在37℃水浴中迅速解凍含1 mL SW48細胞懸液的凍存管，輕輕搖晃。
  

• 解凍後立即加入4 mL培養(yang) 基，混合均勻。

• 在1000 rpm條件下離心3分鍾，棄去上清液。
  

• 加入1-2 mL培養(yang) 基，輕輕吹打混勻。

• 將所有SW48細胞懸液加入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，過夜培養(yang) 。
  

• 第二天換液並檢查SW48細胞密度。

SW48細胞傳代步驟

• 當SW48細胞密度達到80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗SW48細胞1-2次。

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液，覆蓋所有SW48細胞，棄去多餘(yu) 溶液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1分鍾。

• 在顯微鏡下觀察SW48細胞消化情況，SW48細胞變圓並脫落時，立即停止消化，加入少量培養(yang) 基終止反應。

• 按每瓶6-8 mL補加培養(yang) 基，混勻後裝入無菌離心管，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yang) 基吹勻。

• 按1:2比例將SW48細胞懸液分到新皿或瓶中，加入8 mL培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

SW48細胞凍存步驟

• 在SW48細胞生長良好時進行凍存。
  

• 收集SW48細胞及培養(yang) 液，裝入無菌離心管，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 加入適量凍存液於(yu) SW48細胞沉澱中，輕輕吹打混勻。
  

• 將SW48細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 mL。
  

• 逐步降溫至-80℃，然後轉移至液氮罐中長期保存。

汙染防控注意事項

• SW48細胞培養(yang) 過程中可能出現黑色顆粒或小黑點，應密切關(guan) 注。
  

• 如果小黑點有增殖趨勢，可能是汙染，需要及時處理。

• 如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響SW48細胞生長和實驗，可能是SW48細胞碎片或血清中的沉澱物。

  
  

• 培養(yang) 基選擇：

• 推薦使用Leibovitz's L-15培養(yang) 基，不可通入二氧化碳，否則會(hui) 產(chan) 生細胞毒性。

• 如無無二氧化碳培養(yang) 箱，可使用DMEM培養(yang) 基，此時需通入5%二氧化碳。