
LoVo細胞(人結腸癌細胞)
- 來源:直結腸腺癌,轉移位置:左鎖骨上區
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
- 其他:lovo細胞表達腫瘤特異的核基質蛋白 CC-3 和 CC-4
LoVo細胞係是一種來源於(yu) 結腸腺癌的細胞係,最初於(yu) 1971年從(cong) 一名56歲白人男性患者的左鎖骨上區轉移瘤中分離。該患者患有結腸腺癌,且疾病已擴散至鎖骨上區域,病程為(wei) IV期(Dukes C期)。LoVo細胞的染色體(ti) 表現為(wei) 超二倍體(ti) ,核型較為(wei) 均一且穩定,包含3條標記染色體(ti) ,2S成分約占2.7%。lovo細胞在癌症、毒理學和免疫學研究中應用廣泛,是適合用於(yu) 轉染實驗的宿主。
lovo細胞特性特征
致瘤性:lovo細胞在裸小鼠中以100%的頻率(5/5)致瘤,接種10^7個(ge) 細胞後,21天內(nei) 出現腫瘤。
lovo細胞表達多種癌基因:myc+;myb+;ras+;fos+;p53+;sis;abl-;ros;src-;未檢測到N-myc和sis癌基因的表達。
抗原表達:HLA抗原表達HLA A11、B15、B17、Cw1、Cw3;血型: 表達B型血。
癌胚抗原(CEA): lovo細胞表達水平為(wei) 908 ng/10^6個(ge) 細胞/10天。
同工酶:ES-D,1;G6PD,B;PGD,A;PGM1,2;PGM3,1-2
腫瘤特異性核基質蛋白: 表達CC-3和CC-4。
CSAp: 表達陰性(CSAp-)
結腸抗原3: 表達陰性
lovo細胞參數表
細胞名稱 | LoVo細胞(人結腸癌細胞) |
細胞別稱 | LOVO;L0V0 |
患者信息 | 男性,56歲,結腸腺癌患者 |
組織來源 | 直結腸腺癌,轉移位置:左鎖骨上區 |
腫瘤分期 | IV期(Dukes C期) |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
致瘤性 | 在裸小鼠中以100%的頻率(5/5)致瘤,接種10^7個細胞後,21天內出現腫瘤 |
染色體特征 | 超二倍體,2S成分約占2.7%,所有S中期共有3條標記染色體 |
生物安全等級 | 1 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | DMEM/F12 (1:1) + 10% FBS + L-穀氨酰胺 + 胰島素 + 青黴素G + 鏈黴素 |
無血清培養基 | DMEM/F12 (1:1) + EGF (20 μg/L) + bFGF (20 μg/L) + LIF (20 μg/L) + 胰島素 (1 mg/L) + 地塞米鬆 (10^-7 mol/L) + 尼克酰胺 (10 mmol/L) + L-穀氨酰胺 (2 mmol/L) + 2-巰基乙醇 (50 μmol/L) + HEPES (5 mmol/L) |
培養條件 | 溫度: 37℃,氣相: 95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
傳代頻率 | 每周2-3次 |
癌基因表達 | c-myc+、K-ras+、H-ras+、N-ras+、Myb+、sis+、fos+、p53+;N-myc-、abl-、ros-、src- |
抗原表達 | HLA A11、B15、B17、Cw1、Cw3;B型血 |
癌胚抗原 | 908 ng/10^6個細胞/10天 |
CSAp表達 | CSAp陰性 |
結腸抗原3 | 表達陰性 |
同工酶 | ES-D: 1;G6PD: B;PGD: A;PGM1: 2;PGM3: 1-2 |
核基質蛋白 | 表達CC-3和CC-4 |
細胞代數 | 10代以內 |
SP細胞比例 | 約0.58%±0.04%(能形成腫瘤細胞球的細胞);腫瘤球形成細胞數:173.68±11.02 (SD) |
培養教程
LoVo人結腸癌細胞培養教程
LoVo細胞複蘇
預熱水浴至37℃。準備無菌培養(yang) 基及相關(guan) 培養(yang) 器具。
從(cong) 液氮罐中取出LoVo細胞凍存管,迅速置於(yu) 37℃水浴中,輕輕搖動約1-2分鍾,直至LoVo細胞完全融化。
將融化後的LoVo細胞懸液轉移至裝有10 mL預熱培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液。
用5 mL新鮮培養(yang) 基輕輕重懸LoVo細胞。
將重懸後的LoVo細胞懸液移入T25培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。
LoVo細胞傳代方法
傳(chuan) 代準備:當LoVo細胞密度達到80%-90%匯合時,準備進行傳(chuan) 代。
準備新鮮培養(yang) 基。
用PBS洗滌LoVo細胞,去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。
加入0.25%胰蛋白酶,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中孵育2-5分鍾,觀察LoVo細胞從(cong) 培養(yang) 瓶表麵脫落。
加入培養(yang) 基中和胰蛋白酶,輕輕吹打混勻LoVo細胞。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液。
將LoVo細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,按1:2至1:3比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
注意事項
無菌操作: 所有操作應在生物安全櫃內(nei) 進行,以防止LoVo細胞汙染。
細胞監測: 定期檢查LoVo細胞的形態和生長情況,以確保其健康狀態。
細胞凍存: 傳(chuan) 代後的LoVo細胞可進行凍存,使用含10% DMSO的冷凍保存液。
LoVo細胞在不同培養基中的生長特性
含血清培養基 (SSM)
生長特性: 在含血清培養(yang) 基中,LoVo細胞以貼壁方式生長。細胞在接種後數小時內(nei) 開始貼壁,48小時後形成均勻的貼壁細胞層。
細胞形態: LoVo細胞呈不規則多邊形,生長舒展,細胞間連接緊密,邊界清晰。
生長速度: LoVo細胞生長速度較快,細胞體(ti) 積較大。
無血清培養基 (SFM)
生長特性: 在無血清培養(yang) 基中,LoVo細胞傾(qing) 向於(yu) 形成懸浮的腫瘤球。細胞在24-48小時內(nei) 形成小的腫瘤球,72小時後腫瘤球體(ti) 積增大。
細胞形態: LoVo細胞形成的腫瘤球結構較鬆散,部分腫瘤球形態致密且一致。
生長速度: LoVo細胞在無血清培養(yang) 基中的生長相對較慢,細胞體(ti) 積較小,並且具有自我更新和分化的潛力。
無血清培養基中添加物的作用
表皮生長因子 (EGF): 促進LoVo細胞增殖和生長,增強細胞生存能力。
堿性成纖維生長因子 (bFGF): 支持LoVo細胞增殖和分化。
白血病抑製因子 (LIF): 維持LoVo細胞的未分化狀態,促進自我更新。
胰島素: 促進LoVo細胞代謝和生長,增強細胞粘附性。
地塞米鬆: 具有抗炎作用,調節LoVo細胞生長環境。
尼克酰胺: 促進LoVo細胞代謝,增強生存能力。
L-穀氨酰胺: 提供氨基酸,支持LoVo細胞生長和代謝。
2-巰基乙醇: 作為(wei) 抗氧化劑,保護LoVo細胞免受氧化損傷(shang) 。
HEPES: 作為(wei) 緩衝(chong) 劑,維持LoVo細胞培養(yang) 基pH值的穩定。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11,13,14 (AddexBio=C0009011/380; CCRID; CLS=300266; PubMed=25877200) |
10,14 (KCLB=10229) | |
11,12,13 (RCB=RCB1639) | |
11,12,13,14,15 (DSMZ=ACC-350) | |
11,13,14 (ATCC=CCL-229; ECACC=87060101; JCRB=IFO50067; JCRB=JCRB9083; PubMed=25926053) | |
11,14 (Cosmic-CLP=907790) | |
D2S1338 | 16,17,18 (DSMZ=ACC-350; PubMed=15771911) |
17,18 (ATCC=CCL-229; CCRID; PubMed=25877200) | |
D3S1358 | 14,15,16,17 (ATCC=CCL-229) |
14,16 (PubMed=15771911) | |
14,16,17,18 (CCRID) | |
14,16,17 (DSMZ=ACC-350) | |
14,17 (PubMed=25877200_130903) | |
14,18 (KCLB=10229; PubMed=25877200_584429) | |
D5S818 | 11,12,13 (AddexBio=C0009011/380; ATCC=CCL-229; DSMZ=ACC-350; JCRB=IFO50067; JCRB=JCRB9083; PubMed=25926053; RCB=RCB1639) |
11,13 (CCRID; CLS=300266; Cosmic-CLP=907790; ECACC=87060101; KCLB=10229; PubMed=25877200) | |
D7S820 | 9.3,10,11 (AddexBio=C0009011/380; ATCC=CCL-229; CCRID; DSMZ=ACC-350; JCRB=IFO50067; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
10,11 (CLS=300266; Cosmic-CLP=907790; ECACC=87060101; JCRB=JCRB9083; KCLB=10229; RCB=RCB1639) | |
D8S1179 | 9,10 (DSMZ=ACC-350; PubMed=15771911) |
10 (ATCC=CCL-229; CCRID; PubMed=25877200) | |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,11,12 (DSMZ=ACC-350) |
9,12 (AddexBio=C0009011/380; ATCC=CCL-229; CCRID; CLS=300266; Cosmic-CLP=907790; ECACC=87060101; JCRB=IFO50067; JCRB=JCRB9083; PubMed=15771911; PubMed=25877200; PubMed=25926053; RCB=RCB1639) | |
D18S51 | 13,17,18 (DSMZ=ACC-350; PubMed=11416159) |
13,18 (ATCC=CCL-229; CCRID; CLS=300266; PubMed=15771911; PubMed=25877200) | |
D19S433 | 14,15 (ATCC=CCL-229; CCRID; DSMZ=ACC-350; PubMed=25877200) |
15 (PubMed=15771911) | |
D21S11 | 29,31.2 (ATCC=CCL-229; CCRID; DSMZ=ACC-350; PubMed=15771911; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
29,31.2,32.2 (CLS=300266) | |
FGA | 18,19,20 (DSMZ=ACC-350; PubMed=15771911) |
18,20 (ATCC=CCL-229; CCRID; CLS=300266; PubMed=11416159; PubMed=25877200) | |
Penta D | 9,10,14 (CLS=300266) |
10,14 (ATCC=CCL-229; DSMZ=ACC-350; PubMed=25877200) | |
Penta E | 9,16 (DSMZ=ACC-350) |
10,16 (ATCC=CCL-229; CLS=300266; PubMed=25877200) | |
SE33 | 19.2,20.2,25.2 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17,18,19 (DSMZ=ACC-350) |
17,18 (AddexBio=C0009011/380; ATCC=CCL-229; CCRID; CLS=300266; Cosmic-CLP=907790; ECACC=87060101; JCRB=IFO50067; JCRB=JCRB9083; KCLB=10229; PubMed=11416159; PubMed=25877200; PubMed=25926053; RCB=RCB1639) | |
17,19 (PubMed=15771911) | |
參考文獻
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