Hep G2細胞培養(yang) 常見問題

Hep G2細胞的數量如何計數？

因為(wei) 細胞大小因時間和具體(ti) 培養(yang) 物之間的差異而不同，所以融合培養(yang) 容器中的細胞數量各不相同。不同的培養(yang) 條件或不同的培養(yang) 時間會(hui) 影響細胞大小。此外，Hep G2細胞有相互堆疊的生長趨勢，這增加了細胞計數的範圍。因此，含有80-90%融合度的單個(ge) T-75培養(yang) 瓶大概含有1.2×105至2.8×105個(ge) 活細胞/cm2。

Hep G2[HEPG2]細胞的生長特性和形態是什麽？

培養(yang) 基：Hep G2[HEPG2]細胞培養(yang) 使用含有10%胎牛血清（FBS）的Eagle's Minimum Essential Medium（EMEM）培養(yang) 基。

Hep G2細胞具有上皮樣形態，最初附著在細胞的小塊中，許多簇仍處於(yu) 懸浮狀態。幾天後，細胞從(cong) 貼壁的細胞集落向外延伸生長。細胞會(hui) 堆積在粘附的集落上，形成多層外觀形狀，這種情況比較常見。Hep G2是一種貼壁細胞係。然而，一些細胞培養(yang) 物比其他細胞培養(yang) 物需要更長的時間才能附著。在從(cong) 冷凍保存中恢複的第一周，Hep G2培養(yang) 物中如有漂浮細胞是正常的。如果存在大量漂浮物，特別是在生長的第一周，請在前3天不要進行如何操作。如果仍然有很多漂浮物，用台盼藍檢查細胞存活情況。不要丟(diu) 棄漂浮的細胞，當每2或3天更換新鮮培養(yang) 基時，應通過溫和離心（125xg；離心5-10分鍾）將其保留並添加回粘附群體(ti) 。分離或丟(diu) 棄活的漂浮細胞會(hui) 使培養(yang) 物過於(yu) 稀釋，生長會(hui) 滯後（或停止）。

緩慢的貼壁和生長有時可以通過將血清濃度提高到15-20%來改善。

培養(yang) 條件的細微變化，特別是生長培養(yang) 基中使用的血清的pH和質量，可能會(hui) 影響細胞表現出的結塊量。細胞也趨向於(yu) 液泡狀，尤其是在匯合處。完整的生長培養(yang) 基應補充高質量、低內(nei) 毒素、未經熱滅活的胎牛血清。使用這種血清，可以幫助圓形細胞簇更好地粘附並壓平為(wei) 單層。

為什麽Hep G2[HEPG2]細胞在用胰蛋白酶傳代培養後形成團塊而不貼壁？

如果胰蛋白酶消化後胰蛋白酶沒有被中和，可能會(hui) 導致細胞結塊而無法貼壁。使用胰蛋白酶消化（胰蛋白酶-EDTA溶液）後，用完整的生長培養(yang) 基完全中和胰蛋白酶-EDTA，輕輕離心，然後將細胞重置於(yu) 新鮮培養(yang) 基中。

培養(yang) 條件的細微變化，特別是生長培養(yang) 基中使用的血清的pH和質量，也可能影響細胞表現出的結塊量。