MRC-5細胞培養(yang) 常見問題

MRC-5的推薦培養(yang) 密度是多少？

細胞種子密度對於(yu) 細胞獲得足夠的營養(yang) 和表麵積以進行良好的氣體(ti) 交換和生長是極其重要的。關(guan) 於(yu) MRC-5細胞的推薦接種密度，請參閱分析證書(shu) （COA），以獲得相應信息資料。

建議啟動種子密度：2.0 x 104到6.0 x 104個(ge) 活細胞/cm2

推薦培養(yang) 的種子密度：1.0 x 104至6.0 x 104活細胞/cm2

MRC-5細胞可以生長多久，直到它們開始衰老？

MRC-5細胞能夠在衰老開始前進行42至46次倍增（PDL）。PDL與(yu) 通道號不同。在常規亞(ya) 培養(yang) 過程中，計算這種正常二倍體(ti) 人類細胞係的PDL是非常重要的。這將確保細胞被最低限度地培養(yang) 並盡快冷凍，以免它們(men) 開始衰老。

傳(chuan) 代次數是指培養(yang) 物中的細胞被亞(ya) 培養(yang) 的次數，通常不考慮所涉及的接種密度或回收率。群體(ti) 倍增水平（PDL）是指自體(ti) 外初次分離以來，群體(ti) 中細胞倍增的總次數。這通常是四舍五入到最接近的整數的估計值。

MRC-5細胞的最大傳代次數是多少？

MRC-5細胞對DMSO敏感，解凍後應立即通過在9-10ml補充有10%胎牛血清的完全配製的Eagle’s Minimum Essential Medium中緩慢離心（125 x g離心10分鍾）除去冷凍保護劑。MRC-5成纖維細胞係來源於(yu) 正常肺組織，並且這些細胞能夠在衰老開始前進行42至46次倍增。

如果漂浮的MRC-5細胞沒有貼壁，該怎麽辦？

應保留在MRC-5培養(yang) 物中發現的漂浮物，並將其添加回培養(yang) 物中。初次接種後，不要丟(diu) 棄任何漂浮的細胞，因為(wei) 這些細胞仍然可以存活。通過溫和離心（以125xg離心5-10分鍾）將它們(men) 保留，並將它們(men) 添加回與(yu) 具有新鮮培養(yang) 基的貼壁細胞群體(ti) 相同的燒瓶中。該細胞係從(cong) 冷凍保存中完全複蘇可能很慢，隻需使用开云在线登录推薦的培養(yang) 基繼續生長細胞，直到它們(men) 膨脹並達到融合。MRC-5細胞可能需要長達6天的時間才能達到傳(chuan) 代融合。

MRC-5的完整培養基是如何製備的？

MRC-5細胞係使用的生長培養(yang) 基是配製的Eagle’s Minimum Essential medium EMEM，補充有10%未經熱滅活的胎牛血清。