
Bel7405細胞(人肝癌細胞) (暫不提供)
- 來源:肝髒
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:90%RPMI-1640+10%FBS
- 其他:AFP(甲胎蛋白)免疫熒光反應陽性
Bel-7405細胞係是一種源自53歲男性肝癌患者的細胞株,由中國科學家於(yu) 1974年通過手術切除的肝組織建立。Bel7405細胞株屬於(yu) 肝細胞癌(Hepatocellular Carcinoma, HCC)類型,細胞形態呈現典型的上皮樣結構,具備貼壁生長的特性。
Bel7405細胞在生物學特性上接近原代肝癌細胞的模型,Bel-7405細胞被廣泛用於(yu) 肝癌基礎研究,特別是在研究藥物耐藥性和肝癌幹細胞特性等方麵。
Bel7405細胞特性特征
Bel7405細胞具有快速生長的特性,通常在6-7天內(nei) 可完成一次傳(chuan) 代。
在異種接種實驗中,Bel-7405細胞顯示出高成瘤率,通常在3-4天內(nei) 形成腫瘤。
Bel7405細胞染色體(ti) 中有一大而長的近端著絲(si) 點染色體(ti) ,是該細胞株的標記染色體(ti) 。
Bel7405細胞在培養(yang) 過程中保持了與(yu) 原代肝癌細胞相似的遺傳(chuan) 特性,未發生明顯的生物學改變。
AFP(甲胎蛋白)免疫熒光反應陽性,表明其肝癌特性。
Bel7405細胞的代謝酶(如LDH、G6PD、TAT)及超微結構特征與(yu) 臨(lin) 床肝癌相似
Bel7405細胞參數表
細胞名稱 | Bel7405細胞(人肝癌細胞) |
別稱 | BEL7405;人肝癌細胞;Bel-7405; BEL 7405; Bel 7405 |
年齡性別 | 53歲,男性 |
疾病特征 | 肝細胞癌(Hepatocellular Carcinoma, HCC) |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
細胞規格 | 1×10⁶ cells/T25培養瓶或1mL凍存管 |
支原體檢測 | 陰性 |
保藏機構 | 上海中科院 |
培養基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 95%空氣 + 5%二氧化碳;37℃ |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO,液氮儲存 |
傳代比例 | 1:2至1:4 |
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%時進行傳代 |
倍增時間 | 約23小時 |
換液頻率 | 每周2-3次 |
成瘤特性 | 異種接種後成瘤率高,3-4天可成瘤 |
分子標誌物 | AFP免疫熒光反應陽性 |
基因特征 | 細胞染色體中有一大而長的近端著絲點染色體 |
應用領域 | 藥物耐藥性研究、肝癌幹細胞特性研究、治療靶點篩選 |
特別說明 | 僅供科研使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
培養教程
Bel7405人肝癌細胞培養教程
Bel7405細胞接收
收到Bel7405細胞後,檢查凍存管或培養(yang) 瓶有無破損或漏液情況。
使用75%酒精擦拭Bel7405細胞培養(yang) 瓶外壁進行消毒。
將Bel7405細胞置於(yu) T25培養(yang) 瓶中,並放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中靜置2-4小時,以促進細胞狀態恢複。
通過顯微鏡檢查Bel7405細胞的貼壁和生長狀況,記錄並拍攝細胞照片以備後續參考。
Bel7405細胞傳代
傳(chuan) 代時機:當Bel7405細胞達到80%-90%匯合時,應進行傳(chuan) 代操作。
棄去舊培養(yang) 基: 小心倒棄Bel7405細胞的舊培養(yang) 基,避免擾動細胞層。
洗滌細胞: 使用無鈣、鎂的PBS緩衝(chong) 液輕柔洗滌Bel7405細胞1-2次。
消化細胞: 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,確保消化液均勻覆蓋Bel7405細胞。將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化約1分鍾。
觀察消化進程: 在顯微鏡下觀察Bel7405細胞大部分變圓並脫落時,加入6-8 mL培養(yang) 基終止消化。
離心: 將Bel7405細胞懸液轉入無菌離心管中,以1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液。
重懸與(yu) 分瓶: 將Bel7405細胞沉澱重懸於(yu) 1-2 mL新鮮培養(yang) 基中,按1:2或1:4比例分瓶,補充8 mL培養(yang) 基後放入培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
Bel7405細胞凍存
凍存液由90%胎牛血清和10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)組成,適用於(yu) Bel7405細胞的凍存。
當Bel7405細胞培養(yang) 至80%-90%匯合時,按傳(chuan) 代步驟收集細胞。
將Bel7405細胞重懸於(yu) 凍存液中,分裝至凍存管,輕輕混勻。
將凍存管放入-80℃冰箱過夜,隨後轉入液氮中長期保存。
注意事項
汙染監控:定期檢查Bel7405細胞的培養(yang) 基是否變色或渾濁,並觀察細胞形態是否異常。若發現汙染,及時處理並棄用汙染的培養(yang) 物。
無菌操作:進行所有操作時,應在生物安全櫃中進行,嚴(yan) 格遵守無菌操作規程,以避免Bel7405細胞的汙染。
科研用途限製:Bel7405細胞僅(jin) 限用於(yu) 科研,不可用於(yu) 臨(lin) 床診斷或治療。
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參考文獻
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