SNU475細胞（人肝癌細胞）

SNU-475細胞係於(yu) 1990年從(cong) 一位韓國患者的原發性肝細胞癌中提取，患者在細胞毒性治療前提供了腫瘤組織樣本。最初，這些細胞在含有5%熱滅活胎牛血清的ACL-4培養(yang) 基中培養(yang) ，隨後轉移至補充10%熱滅活胎牛血清的RPMI 1640培養(yang) 基中進行長期培養(yang) 。SNU-475細胞係在肝癌研究中具有重要的實驗價(jia) 值。

SNU475細胞特性特征

• SNU-475細胞係為(wei) 非整倍體(ti) ，其模態編號為(wei) 61。
  

• SNU475細胞抗原表達為(wei) AB型血,Rh陽性。
  

• 原發腫瘤為(wei) 巨大生長型,組織學類型主要為(wei) 致密型和小梁型。

• 培養(yang) 的SNU475細胞呈現多核表型。

• SNU-475細胞係已驗證為(wei) 乙型肝炎病毒（HBV）DNA陽性，但未檢測到HBV基因組RNA的表達。

SNU475細胞參數表

SNU475人肝癌細胞培養教程

SNU475細胞複蘇

• 將冷凍的SNU475細胞懸液凍存管在37℃水浴中迅速搖動解凍，避免過度加熱導致SNU475細胞損傷(shang) 。
  

• 解凍後，立即將SNU475細胞懸液轉移至含有4 mL RPMI-1640培養(yang) 基（補充10%胎牛血清）的離心管中，混合均勻。

• 以1000 rpm的速度離心3分鍾，去除上清液以除去冷凍保護劑，確保SNU475細胞的活性。
  

• 用1-2 mL培養(yang) 基重新懸浮SNU475細胞，輕輕吹打使細胞分散均勻。
  

• 將SNU475細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入適量的培養(yang) 基（約8 mL），放置在37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
  

• 第二天更換新鮮培養(yang) 基，並檢查SNU475細胞的密度和狀態。

SNU475細胞傳代

• 當SNU475細胞覆蓋麵積達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。
  

• 棄去培養(yang) 基，用不含鈣鎂離子的PBS溶液洗滌SNU475細胞1-2次，以去除殘留的血清和培養(yang) 基成分。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的混合溶液），確保消化液完全覆蓋SNU475細胞單層。
  

• 棄去消化液，將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化約1分鍾。

• 觀察SNU475細胞，待大部分細胞變圓並開始脫落時，輕輕敲打培養(yang) 瓶，立即加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 加入6-8 mL培養(yang) 基，將SNU475細胞懸液轉移至無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，去除上清液。
  

• 將SNU475細胞按1:2的比例分配到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，加入8 mL新鮮培養(yang) 基，繼續在培養(yang) 箱中培養(yang) 。
  

SNU475細胞凍存

• 在SNU475細胞狀態良好時，收集細胞並轉移至無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，去除上清液。
  

• 用PBS溶液清洗SNU475細胞一次，去除殘餘(yu) 的培養(yang) 基，隨後進行細胞計數。
  

• 按SNU475細胞計數加入無血清細胞凍存液，使細胞密度達到5×10^6至1×10^7/mL，混合均勻。
  

• 將1 mL SNU475細胞懸液分裝至凍存管中，並做好標識。
  

• 將SNU475細胞凍存管先放置於(yu) -80℃冰箱中預凍24小時，然後轉入液氮罐中長期儲(chu) 存。
  

注意事項

• 操作過程中應嚴(yan) 格保持無菌條件，防止汙染SNU475細胞。

• 定期監測SNU475細胞的生長情況，確保細胞處於(yu) 良好狀態。

• 在傳(chuan) 代過程中，避免過度消化SNU475細胞，以免影響細胞的活力和生長能力。