BEL-7402細胞（人肝癌細胞）

BEL-7402人肝癌細胞是由中國科學家陳瑞銘於(yu) 1974年建立的，來源於(yu) 一位53歲男性肝癌患者的手術切除標本。作為(wei) 人肝細胞癌（HCC）的一種典型細胞係，BEL-7402細胞在傳(chuan) 代過程中表現出穩定性，未發生顯著的生物學改變，且具有無限傳(chuan) 代能力，是研究肝癌發生、發展及治療的理想模型。

BEL-7402細胞的生物學特性與(yu) 原代肝癌細胞相似，顯示出上皮細胞樣的形態，並在培養(yang) 中表現出貼壁生長和快速增殖的特性，其倍增時間約為(wei) 20小時。

BEL-7402細胞特性特征

• 染色體(ti) 數目不足三倍體(ti) ，有一個(ge) 異常的近端著絲(si) 點染色體(ti)
  

• bel7402細胞間接免疫熒光法檢測AFP（甲胎蛋白）呈陽性反應

• LDH同工酶譜與(yu) 人胚肝及臨(lin) 床肝癌相近，與(yu) 成年人肝細胞不同

• STR檢測位點與(yu) HeLa細胞相同，提示可能存在交叉汙染

• 在異種移植實驗中，BEL-7402細胞能夠在處理過的Wistar大鼠中形成腫瘤結節，表明其具備較強的成瘤能力。

BEL-740人肝癌細胞參數表

BEL-7402人肝癌細胞培養教程

BEL-7402細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的BEL-7402細胞管，迅速置於(yu) 37°C的水浴中快速融化。

• 融化後，將BEL-7402細胞懸液轉移至15 mL的離心管中，並加入5 mL已預溫的培養(yang) 基。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，然後用5 mL培養(yang) 基重懸BEL-7402細胞。

• 將重懸的BEL-7402細胞接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中，添加10 mL預溫培養(yang) 基。

• 將BEL-7402細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2和飽和濕度的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

BEL-7402細胞常規傳代

• 當BEL-7402細胞生長至80%匯合時，棄去培養(yang) 基，並用PBS緩衝(chong) 液洗滌細胞2次。

• 加入2 mL預溫的0.25%胰酶-EDTA消化液，置於(yu) 37°C下消化5-10分鍾，期間通過顯微鏡觀察BEL-7402細胞的脫壁情況。

• 當BEL-7402細胞開始脫壁時，加入5 mL培養(yang) 基終止消化反應。

• 將BEL-7402細胞懸液轉移至15 mL離心管中，1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，用預溫的培養(yang) 基重懸BEL-7402細胞，並根據需要進行細胞計數。

• 按1:2到1:3的比例將BEL-7402細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，並添加適量的預溫培養(yang) 基繼續培養(yang) 。

BEL-7402細胞凍存

• 在BEL-7402細胞處於(yu) 對數生長期時，將其消化成單細胞懸液，並通過離心收集細胞。

• 用凍存液（90% FBS + 10% DMSO）重懸BEL-7402細胞，並調整細胞濃度至1-2×10^6 cells/mL。

• 將BEL-7402細胞懸液分裝到凍存管中，先置於(yu) -80°C冰箱過夜保存。

• 次日將BEL-7402細胞凍存管轉移到液氮罐中進行長期保存。