Hepa 16細胞（小鼠肝癌細胞）

Hepa 1-6小鼠肝癌細胞係源自C57L/J小鼠自發產(chan) 生的BW7756肝癌，屬於(yu) C57/L小鼠肝癌細胞係Hepa-1的衍生係。與(yu) 通過化學轉化或誘導產(chan) 生的肝癌模型（如BNL、MH-129、MH134和MH-22A）不同，Hepa 1-6細胞代表了一種更接近人類肝癌發病機製的自發性模型。

Hepa 16細胞特性特征

• hepa16細胞是一種自發性肝癌模型,更接近人類肝癌的發病機製

• hepa16細胞表達多種肝髒相關(guan) 蛋白質,如甲胎蛋白（AFP）、α1抗胰蛋白酶和澱粉酶
  

• 經檢測,hepa16細胞鼠痘病毒（ectromelia virus）呈陰性

• hepa16細胞可以在無血清的培養(yang) 基中繁殖

• hepa16細胞可用於(yu) 構建小鼠肝癌模型,研究肝癌發病機製和治療方法；可用於(yu) 3D細胞培養(yang) 和癌症研究；是一種合適的轉染宿主

Hepa 16細胞參數表

Hepa 16小鼠肝癌細胞培養教程

細胞消化步驟

• 將培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基完全抽走，用5mL PBS潤洗培養(yang) 瓶1-2次，以去除Hepa16細胞殘留的培養(yang) 基成分。

• 吸盡PBS後，加入1mL預熱的0.25%胰酶-EDTA溶液，輕輕搖晃培養(yang) 瓶使胰酶均勻覆蓋瓶底，確保Hepa16細胞能夠被均勻消化。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中，進行消化處理，並每隔1分鍾觀察Hepa16細胞形態變化。

• 當Hepa16細胞明顯回縮並有部分開始脫落時，迅速加入3-4mL含有血清的培養(yang) 基以終止胰酶的消化作用。

• 輕柔地吹打培養(yang) 瓶以使貼壁的Hepa16細胞脫落，操作時應注意避免對Hepa16細胞造成機械損傷(shang) 。

細胞收集與洗滌

• 將消化後的Hepa16細胞懸液轉移至離心管中，以1000rpm離心3分鍾以收集Hepa16細胞沉澱。

• 小心吸去上清，加入適量預溫的培養(yang) 基後，輕輕重懸Hepa16細胞沉澱，確保Hepa16細胞均勻分布。

細胞接種

• 在新的培養(yang) 瓶中加入適量新鮮預溫的培養(yang) 基（T25培養(yang) 瓶推薦10mL，T75培養(yang) 瓶推薦15mL），為(wei) Hepa16細胞提供良好的生長環境。

• 將重懸後的Hepa16細胞懸液均勻地接種到培養(yang) 瓶中，可以使用十字法或“8”字法混勻，以確保Hepa16細胞在培養(yang) 瓶中的均勻分布。

• 輕輕搖晃培養(yang) 瓶使Hepa16細胞均勻分布，然後將其置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

細胞觀察與換液

• 在接種Hepa16細胞後24-48小時內(nei) ，觀察細胞的貼壁生長情況，確保Hepa16細胞正常貼壁。

• 每2-3天更換一次新鮮培養(yang) 基，吸去舊培養(yang) 基時應注意避免吸到Hepa16細胞層。

• 當Hepa16細胞密度達到80%左右時，開始下一輪傳(chuan) 代培養(yang) 。

注意事項

• Hepa16細胞貼壁較弱，因此消化時間應控製在較短的範圍內(nei) ，以避免過度消化影響Hepa16細胞的活力。

• 如果培養(yang) 瓶中出現較多Hepa16細胞碎片，可以通過PBS潤洗和換液的方式清除。

• 低密度培養(yang) 時，Hepa16細胞形態可能較為(wei) 多樣；而高密度培養(yang) 時，Hepa16細胞形態則相對均一。

• 一些貼壁的Hepa16細胞可能呈現發亮的球形，這屬於(yu) 正常現象，不影響Hepa16細胞的整體(ti) 狀態。