GS-HEPG2人肝癌細胞亞(ya) 型

GS-HEPG2是一種由Omasa和Suga首次發現的人肝癌細胞亞(ya) 型，來源於(yu) 一名15歲男性的肝母細胞癌，是細胞Hep-G2細胞的亞(ya) 型。與(yu) HepG2細胞係類似，該亞(ya) 型細胞過表達穀氨酰胺合成酶基因（glutamine synthetase），因此在研究人工肝支持係統時具有潛在應用價(jia) 值。

GS-HEPG2人肝癌細胞特性特征

• 基因表達：HepG2細胞能夠表達多種與(yu) 肝髒功能相關(guan) 的蛋白質：白蛋白、甲胎蛋白、轉鐵蛋白、α2-巨球蛋白等。

• GSHEPG2細胞中還表達胰島素受體(ti) 和胰島素樣生長因子II（IGF II）受體(ti) 。

• 生物轉化代謝酶：GSHEPG2細胞保留了完整的生物轉化代謝酶，包括I相和II相酶，能夠進行藥物代謝和解毒。

GS-HEPG2人肝癌細胞參數表

GS-HEPG2人肝癌細胞亞型培養教程

細胞複蘇步驟

• 快速解凍：將凍存的HEPG2細胞管在37°C水浴中迅速解凍，解凍時輕輕搖勻以確保均勻加熱，解凍完成後應立即進行後續操作。

• 離心分離：解凍後的HEPG2細胞以800 rpm離心5分鍾，去除上清液。

• 重懸細胞：使用含15%胎牛血清的DMEM培養(yang) 基重懸HEPG2細胞，確保均勻分散。

• 細胞接種：將重懸後的HEPG2細胞接種於(yu) 培養(yang) 瓶或培養(yang) 板中，每平方厘米接種1×10⁴個(ge) 細胞。

• 培養(yang) 條件：將HEPG2細胞置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代步驟

• 洗滌：使用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液洗滌HEPG2細胞2-3次，去除培養(yang) 基殘留。

• 消化細胞：加入0.25%的胰蛋白酶溶液，置於(yu) 37°C消化0.5-1分鍾，觀察HEPG2細胞開始變圓時終止消化。

• 終止消化：加入含有胎牛血清的培養(yang) 基終止胰蛋白酶活性，並輕輕吹打HEPG2細胞，使其懸浮。

• 離心收集：將HEPG2細胞懸液以800 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 重懸與(yu) 接種：使用新鮮的DMEM培養(yang) 基重懸HEPG2細胞，並按照每平方厘米接種1×10⁴個(ge) 細胞的密度接種至新培養(yang) 瓶中。T25培養(yang) 瓶建議接種密度為(wei) 1×10⁴個(ge) 細胞/cm²。

• 培養(yang) ：將HEPG2細胞置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

注意事項

• 空泡現象：HEPG2細胞在培養(yang) 過程中可能會(hui) 出現空泡，屬於(yu) 正常現象，不會(hui) 影響其生長能力。

• 血清濃度調節：當HEPG2細胞增殖速度減慢時，可適當提高胎牛血清的濃度至15%-20%以促進生長。

• 培養(yang) 基的pH值：若發現HEPG2細胞貼壁性較差，應檢查培養(yang) 基的pH值，若偏離正常範圍應及時進行調整。

• 傳(chuan) 代操作：在傳(chuan) 代過程中，吹打懸浮HEPG2細胞時應盡量減少機械性損傷(shang) ，控製力度和吹打次數，以減少細胞受損。

• 定期傳(chuan) 代：應定期監測HEPG2細胞的生長狀態，傳(chuan) 代時機的選擇對細胞狀態的穩定性至關(guan) 重要。