COLO205細胞係（人結腸癌細胞）

COLO 205人結腸癌細胞由T·U·Sample等人於(yu) 1957年從(cong) 一名患有結腸癌的70歲白人男性的腹水中分離而建係。取樣前，該患者已接受5-氟尿嘧啶治療4-6周。

COLO205細胞係特性

• COLO205細胞是上皮細胞類型，具有超三倍體(ti) 染色體(ti) 組，常見的標記染色體(ti) 包括M1、M2、M4、M5、M6以及其他5條，多數為(wei) 單體(ti) 狀態。

• COLO 205細胞在裸鼠中具有致瘤性，以1×10^7個(ge) 細胞皮下接種能在21天內(nei) 形成腫瘤，頻率為(wei) 100% (5/5)。

• 基因表達包括癌胚抗原（CEA）1.5至4.1ng/10^6細胞/10天，角蛋白，白細胞介素10（IL-10），並且COLO205細胞對角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性。

• COLO 205細胞源自與(yu) COLO 201相同患者的組織，表達與(yu) GA733-2腫瘤相關(guan) 抗原相關(guan) 的36kD細胞表麵糖蛋白。

• COLO205細胞在CSAp（細胞表麵抗原）方麵呈陰性反應。

• 同工酶：ES-D，1-2；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1, 1-2；PGM3，1-2

• COLO 205細胞表達與(yu) GA733-2腫瘤相關(guan) 抗原相關(guan) 的36000道爾頓細胞表麵糖蛋白。
  

COLO205細胞係參數表

COLO205細胞係培養

傳代方法

• 收集COLO 205細胞的懸浮細胞到離心管中，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗1-2次。由於(yu) 細胞貼壁不牢，PBS潤洗後細胞會(hui) 脫落，所以PBS也要回收到離心管中。

• 加入0.25% (w/v) 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中 (T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。觀察COLO 205細胞消化情況，細胞大部分變圓並脫落時加入3-4mL含10%FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 將懸浮細胞、PBS清洗液中的COLO 205細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。補加1-2mL培養(yang) 液重懸混勻，按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL完全培養(yang) 基。

• 傳(chuan) 代比例推薦1:2到1:5，每2-3天換液。

細胞凍存

• 凍存液: 55%基礎培養(yang) 基 + 40%FBS + 5%DMSO

• 將COLO 205細胞按上述配方製備凍存液，置於(yu) 液氮中儲(chu) 存。

細胞複蘇

• 解凍：在37°C水浴中輕柔搖動解凍COLO 205細胞，約2分鍾。取出後用70%乙醇消毒。

• 移液：將COLO 205細胞移入含9mL完全培養(yang) 基的離心管中，以約125 x g離心5-7分鍾。

• 重懸：將COLO 205細胞重懸於(yu) 推薦的完全培養(yang) 基中，避免培養(yang) 基堿化。建議在加入COLO 205細胞前將培養(yang) 基在培養(yang) 箱中放置至少15分鍾以達到正常pH（7.0-7.6）。

• 培養(yang) ：37°C培養(yang) 箱中培養(yang) ，推薦5% CO₂環境。