
SNU-719細胞(人胃癌細胞)
- 來源:胃癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:SNU-719細胞株存在p53和c-Ki-ras基因突變
SNU-719細胞株源自一名53歲男性胃癌患者的原發性腺癌組織,該患者有100包/年的吸煙史,細胞株於(yu) 1984年建立。經過光學和電子顯微鏡的形態學分析,確認SNU-719為(wei) 中等分化的胃腺癌細胞,具有典型的上皮樣形態,並通過貼壁形式生長。
SNU-719細胞的增殖能力較強,在適宜的培養(yang) 條件下生長迅速。主要以彌漫性單層生長,表現出上皮細胞樣的特征。
SNU-719細胞特性特征
基因突變:SNU-719細胞株存在p53和c-Ki-ras基因突變,這些突變與(yu) 腫瘤的發展密切相關(guan) 。
表達特征:在SNU-719細胞上清液和裂解物中,通過放射免疫測定法檢測到腫瘤標誌物,如癌胚抗原(CEA)、α-胎蛋白(α-FP)、糖類抗原19-9(CA 19-9)和組織多肽抗原(TPA)的表達。
信號通路:SNU-719細胞株在Notch信號通路相關(guan) 配體(ti) 和受體(ti) 的表達上表現出高水平,這使其成為(wei) 研究胃癌幹細胞特性的一個(ge) 重要模型。
應用領域:SNU-719細胞株廣泛應用於(yu) 基礎研究、藥物篩選以及治療策略的發展,為(wei) 胃癌的研究提供了重要實驗模型
SNU-719細胞參數表
細胞名稱 | SNU-719細胞(人胃癌細胞) |
細胞別稱 | SNU719; NCI-SNU-719 |
種屬來源 | 人 |
年齡/性別 | 53歲;男性 |
組織來源 | 胃 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生物安全等級 | 1 |
規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 抗生素 |
氣相組成 | 95%空氣 + 5%二氧化碳 |
培養溫度 | 37℃ |
倍增時間 | ~24-30小時 |
基因突變 | p53和c-Ki-ras基因突變 |
腫瘤標誌物 | CEA, α-FP, CA 19-9, TPA |
信號通路 | Notch信號通路相關配體和受體高表達 |
凍存液成分 | 無血清凍存液,含10% DMSO |
儲存方式 | 液氮儲存或-80℃冰箱 |
背景簡介 | SNU-719細胞來自一名53歲男性原發性腺癌患者的胃組織,經過光學和電子顯微鏡的形態學研究確認其為中等分化的腫瘤細胞,具有高濃度的TPA。 |
應用領域 | 廣泛用於基礎研究、藥物篩選及治療策略開發,為胃癌研究提供重要模型。 |
培養教程
SNU-719人胃癌細胞培養教程
SNU719細胞接收後的處理
收到SNU719細胞後,首先檢查運輸培養(yang) 瓶是否完好,觀察是否有漏液或培養(yang) 液渾濁的現象。
使用顯微鏡檢查SNU719細胞的生長狀態,確保細胞在運輸過程中未受損。
移除封口膜,將SNU719細胞的培養(yang) 瓶放置於(yu) 37℃的培養(yang) 箱中孵育2-3小時,使細胞適應培養(yang) 條件。
輕輕棄去運輸培養(yang) 基,添加6mL預熱的完全培養(yang) 基(RPMI-1640培養(yang) 基,補充10%胎牛血清和1%抗生素)。
SNU719細胞複蘇步驟
配置完全培養(yang) 基:RPMI-1640基礎培養(yang) 基中添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素(雙抗)。
從(cong) 液氮中取出1mL凍存的SNU719細胞,將其迅速置於(yu) 37℃水浴中搖晃解凍,時間約為(wei) 1分鍾。注意避免過度搖晃以防細胞損傷(shang) 。
解凍後,將SNU719細胞轉移至4mL預熱的完全培養(yang) 基中,輕輕混勻。
以1000rpm離心4分鍾,去除上清液,保留SNU719細胞沉澱。
用1-2mL新鮮的完全培養(yang) 基輕輕重懸SNU719細胞。
將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶,置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
在培養(yang) 24小時後檢查SNU719細胞的貼壁情況。若未貼壁,可能為(wei) 細胞存活率低,可更換新鮮培養(yang) 基並繼續培養(yang) 。
SNU719細胞傳代步驟
當SNU719細胞覆蓋80%-90%的培養(yang) 瓶麵積時,即可進行傳(chuan) 代。
棄去舊培養(yang) 基,使用無鈣鎂的PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)輕輕衝(chong) 洗SNU719細胞1-2次,以去除培養(yang) 基殘留。
加入1mL 0.25%胰酶溶液,放入37℃培養(yang) 箱中消化約1-2分鍾,觀察SNU719細胞在顯微鏡下的脫落情況。
當大多數SNU719細胞變圓並開始脫落時,立即加入完全培養(yang) 基終止消化過程。
將細胞懸液收集於(yu) 無菌離心管中,在1000rpm下離心4分鍾,棄去上清液。
用新鮮的完全培養(yang) 基重懸SNU719細胞,將其按比例分配到新培養(yang) 瓶中(通常加入8mL培養(yang) 基至T25瓶中),繼續在37℃、5% CO₂環境下培養(yang) 。
SNU719細胞凍存步驟
在SNU719細胞生長狀況良好且傳(chuan) 代前進行凍存準備。先用PBS輕輕衝(chong) 洗細胞一次,然後加入1mL胰酶消化。
消化後,用血球計數板對SNU719細胞進行計數。根據細胞數量加入適量的培養(yang) 基,並添加二甲基亞(ya) 碸(DMSO),使最終濃度達到10%。
每支凍存管中加入1mL SNU719細胞懸液,並做好標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,首先在-80℃下預凍2小時,然後轉移至液氮中長期儲(chu) 存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 13,15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 21,23 |
Penta D | 10,11 |
Penta E | 11,16 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,18 |
參考文獻
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