IEC-18細胞（大鼠回腸細胞）

IEC-18細胞係是一種來源於(yu) 大鼠（Rattus norvegicus）回腸的上皮細胞係，由A. Quaroni於(yu) 1979年建立，廣泛應用於(yu) 生物醫學研究，尤其是在腸道生理學和藥物代謝領域。IEC-18細胞係取自小腸末端的回腸部位，具有典型的上皮細胞形態，適合貼壁生長，是研究腸道功能和藥物作用機製的理想模型。

IEC-18細胞特性特征

• IEC-18細胞在生物醫學研究中被廣泛用於(yu) 研究腸道相關(guan) 的基因表達。例如：
  

• 轉運蛋白：如鈉依賴性葡萄糖轉運蛋白（SGLT1），參與(yu) 營養(yang) 物質的吸收。

• 酶類：如腸道消化酶，幫助分解食物成分。

• IEC-18細胞通常表達多種上皮標誌蛋白，例如：
  

• 粘附蛋白：如E-cadherin，參與(yu) 細胞間的粘附和信號傳(chuan) 導。

• 細胞骨架蛋白：如角蛋白，維持上皮細胞的結構完整性

IEC-18細胞參數表

IEC-18大鼠回腸細胞培養教程

收貨處理

• 檢查狀態：收到IEC18細胞後，立即檢查培養(yang) 瓶的完整性，確保培養(yang) 液無泄漏、渾濁或其他汙染現象。

• 消毒：用75%乙醇擦拭培養(yang) 瓶表麵，減少IEC18細胞在實驗中的汙染風險。

• 細胞穩定：在不打開瓶蓋的情況下，將T25培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中靜置2-4小時，使IEC18細胞適應培養(yang) 環境。

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存管，用75%乙醇消毒表麵後，將凍存管放入37℃水浴中快速搖晃解凍，約2分鍾。
  

• 解凍後的IEC18細胞懸液轉入離心管中，加入4 mL培養(yang) 基混勻，在1000 rpm離心3分鍾，去除DMSO上清。
  

• 將IEC18細胞重懸於(yu) 1-2 mL培養(yang) 基中，輕輕混勻後轉入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ，使IEC18細胞逐步適應培養(yang) 環境。
  

傳代操作

• 當IEC18細胞達到瓶底80%-90%時，可進行傳(chuan) 代。合適的細胞密度有助於(yu) 後續IEC18細胞的生長。
  

• 棄去培養(yang) 上清，使用不含鈣鎂的PBS洗滌IEC18細胞1-2次。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液，在37℃下孵育1-2分鍾，直至IEC18細胞變圓並輕鬆脫落。

• 加入新鮮培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打形成細胞懸液。

• 將IEC18細胞懸液按1:2比例分裝至新的培養(yang) 瓶中，加入8 mL培養(yang) 基，並保持適當密度以進行貼壁培養(yang) 。
  

凍存操作

• 收集IEC18細胞懸液，置於(yu) 無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，去除上清，用PBS輕輕洗滌。
  

• 將IEC18細胞重懸於(yu) 90% FBS和10% DMSO的凍存液中，細胞密度設定為(wei) 1-2 × 10⁶ cells/mL。
  

• 每支凍存管裝1 mL IEC18細胞懸液並貼上標記，以標明細胞係名稱及凍存日期。

• 將裝有IEC18細胞的凍存管放入程序降溫盒中，以-1°C/分鍾速率降溫後，先置於(yu) -80°C冰箱中保存24小時，再轉入液氮罐中長期儲(chu) 存。
  

複蘇操作

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的IEC18細胞，將凍存管放入37°C水浴中迅速解凍。
  

• 解凍後的IEC18細胞懸液轉入離心管，加入10 mL培養(yang) 基，1000 rpm離心3分鍾，去除DMSO。
  

• 複蘇後的IEC18細胞置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜，使細胞適應新環境後進入穩定培養(yang) 。
  

注意事項

• 細胞狀態：IEC18細胞在運輸和解凍過程中可能出現部分損失，收到後應盡快複蘇培養(yang) 。

• 培養(yang) 環境：將IEC18細胞置於(yu) 37°C、5% CO₂濕潤環境中培養(yang) ，確保培養(yang) 基定期更換，維持細胞的健康狀態。

• 無菌操作：所有操作均需在無菌環境中進行，避免汙染。

• 記錄保存：每次傳(chuan) 代和凍存操作中，需記錄IEC18細胞的密度、傳(chuan) 代次數及操作時間，以確保實驗可重複性和細胞狀態穩定。