
SNU-5細胞(人胃癌細胞) (暫不提供)
- 來源:轉移部位、腹水
- 細胞特征:懸浮細胞 ,懸浮液,多細胞聚集體(ti)
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:表達癌胚抗原(CEA)和腫瘤相關(guan) 抗原TAG-72,同時對左旋多巴脫羧酶(DDC)呈陽性反應,但對胃泌素受體(ti) 呈陰性
SNU-5細胞係來源於(yu) 一名33歲的亞(ya) 洲女性患者,該患者被診斷為(wei) 低分化胃癌,於(yu) 1987年從(cong) 患者的腹水樣本中分離建立。患者在接受化療治療後,包括使用了5-氟尿嘧啶、阿黴素以及絲(si) 裂黴素C等藥物,細胞仍表現出較強的生長能力。SNU-5細胞具備典型的亞(ya) 四倍體(ti) 染色體(ti) 數,其模態染色體(ti) 範圍在87到88之間,並且在大多數細胞中檢測到了18條以上的標記染色體(ti) 。常見的異常染色體(ti) 包括1號、7號、6號等多個(ge) 結構重排標記,是研究胃癌的分子機製提供了重要模型。
SNU-5細胞特性特征
癌症基因:表達c-myc和erb-B2基因,但不表達N-myc、L-myc和EGF受體(ti) 基因。
抗原表達:SNU-5細胞表麵表達癌胚抗原(CEA)和腫瘤相關(guan) 抗原TAG-72。抗原表達:O型血;Rh+
酶活性:SNU-5細胞對左旋多巴脫羧酶(DDC)呈陽性反應,但胃泌素受體(ti) 呈陰性。
表達標記:乙酰膽堿,毒蕈堿,表達;血管活性腸肽(VIP),表達;血管活性腸肽;毒蕈堿乙酰膽堿
致瘤性:SNU-5細胞在半固體(ti) 培養(yang) 基中的集落形成效率為(wei) 27%,顯示出其致瘤潛力。
轉移特性:SNU-5細胞具備較強的轉移能力,常用於(yu) 無胸腺裸鼠模型中進行腹膜腔轉移的研究。
SNU-5細胞廣泛應用於(yu) 胃癌的基礎研究、藥物篩選以及病理機製研究,尤其是在探索新型抗癌藥物及其作用機製方麵
SNU-5細胞參數表
細胞名稱 | SNU-5細胞(人胃癌細胞) |
別稱 | SNU5; NCI-SNU-5 |
細胞係編號 | ATCC CRL-5973 |
組織來源 | 胃;轉移部位:腹水 |
疾病特征 | 低分化胃癌 |
細胞形態 | 上皮樣 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
倍性 | 次四倍體(模態染色體數:87-88) |
表麵標誌 | 癌胚抗原(CEA)、TAG-72、左旋多巴脫羧酶(DDC) |
基因表達 | c-myc、erb-B2陽性;N-myc、L-myc、EGF受體陰性 |
無菌檢測 | 細菌、真菌、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性 |
致瘤性 | 在半固體培養基中的集落形成效率為27% |
培養基 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
傳代比例 | 1:2 - 1:4 |
傳代周期 | 每36-48小時傳代一次 |
換液頻率 | 每2-3天更換培養基 |
培養溫度 | 37℃ |
氣相組成 | 95%空氣 + 5%二氧化碳 |
凍存液組成 | 60%基礎培養基 + 30% 胎牛血清 + 10% DMSO |
保存條件 | 液氮儲存 |
運輸方式 | 凍存或幹冰運輸 |
安全性說明 | 所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在生物危害性,需在二級生物安全台內操作。 |
培養教程
SNU-5人胃癌細胞培養教程
收到SNU-5細胞後的初步處理
檢查SNU5細胞狀態:收到SNU5細胞後,首先檢查細胞運輸瓶的外觀是否完好,確保沒有破損、漏液或汙染。如果培養(yang) 液出現渾濁或其他異常現象,應立即聯係供應商。
顯微鏡觀察:使用顯微鏡觀察SNU5細胞生長狀態。打開運輸瓶的封口膜後,將T25培養(yang) 瓶放置在37℃培養(yang) 箱中靜置2-3小時,使SNU5細胞逐步適應環境。
SNU5細胞複蘇
解凍SNU5細胞:將凍存管從(cong) 液氮中取出,立即置於(yu) 37℃水浴中快速解凍,解凍過程中輕輕搖動凍存管,確保SNU5細胞均勻解凍。此過程應盡可能快,以防細胞受損。
離心:將解凍後的1 mL SNU5細胞懸液轉移至含有4 mL預熱的培養(yang) 基的離心管中,在1000 RPM下離心4分鍾,去除上清液。
SNU5細胞重懸:棄去上清後,加入1-2 mL新鮮的培養(yang) 基並輕輕吹打,使SNU5細胞均勻分布。
培養(yang) SNU5細胞:將細胞懸液轉移到預先鋪有8 mL培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中,靜置過夜以便SNU5細胞適應並貼壁。
SNU5細胞傳代
傳(chuan) 代條件:當SNU5細胞生長密度達到80%-90%時應進行傳(chuan) 代,以避免細胞過度密集影響生長。
細胞洗滌:棄去培養(yang) 基,用不含鈣鎂的PBS洗滌SNU5細胞1-2次,去除代謝廢物和殘留培養(yang) 液。
細胞消化:加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA消化液,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察SNU5細胞是否開始變圓並逐漸脫離瓶壁。
終止消化:當SNU5細胞大部分脫落後,加入適量培養(yang) 基終止消化,輕輕敲打瓶壁確保細胞完全脫離。
離心與(yu) 重懸:將SNU5細胞懸液離心,1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液後重新懸浮在1-2 mL培養(yang) 基中。
SNU5細胞分配:將重懸的SNU5細胞按照1:2的比例轉移至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,加入8 mL培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。
SNU5細胞凍存
SNU5細胞收集與(yu) 計數:SNU5細胞達到合適的密度時,棄去培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次,加入胰酶消化SNU5細胞,待細胞變圓脫落後加入培養(yang) 基終止消化。
離心:在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液。
SNU5細胞重懸與(yu) 凍存液準備:將SNU5細胞重新懸浮於(yu) 含10% DMSO和90%胎牛血清的凍存液中,確保每支凍存管中SNU5細胞密度至少為(wei) 1 x 10^6/mL,每支凍存管分裝1 mL細胞懸液,標注好相關(guan) 信息。
冷凍步驟:將SNU5細胞凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80℃冰箱2小時後,再轉入液氮罐中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 14,15 |
D13S317 | 8 (KCLB=00005) |
8,9 (ATCC=CRL-5973; Cosmic-CLP=908445; PubMed=25877200) | |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13.2,15 |
D21S11 | 29 |
FGA | 21 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 18,19 |
TH01 | 9 |
TPOX | 11 |
vWA | 15,16 |
參考文獻
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