
SW-13細胞(人腎上腺皮質小細胞癌細胞)
- 來源:腎上腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:病毒易感性:人脊髓灰質炎病毒1;水皰性口炎病毒; 同工酶:G6PD,B
SW-13細胞係源自一位55歲白人女性的腎上腺皮質小細胞癌,並於(yu) 1971年8月被成功分離。SW-13細胞係具有上皮樣形態,廣泛用於(yu) 癌症研究。
SW-13細胞的染色體(ti) 模態數為(wei) 63,其染色體(ti) 數通常在45到65之間波動。大約10%的細胞含有一對雙著絲(si) 粒染色體(ti) 。一些文獻指出,SW-13細胞係可能存在細胞遺傳(chuan) 不穩定性。
SW-13細胞特性
SW-13細胞係起源於(yu) 一例原發性小細胞癌,屬於(yu) 腫瘤分期的IV期,表明其為(wei) 晚期癌症
約10%的受檢細胞具有一對雙著絲(si) 粒染色體(ti) 。
病毒易感性:對人脊髓灰質炎病毒1型和水皰性口炎病毒具有易感性。
同工酶:同工酶譜顯示其表達葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)B型。
電鏡特征:通過電子顯微鏡觀察,SW-13細胞中可見許多燈泡狀間隙連接(BGJ)
SW-13細胞參數表
細胞名稱 | SW-13細胞(人腎上腺皮質小細胞癌細胞) |
細胞別稱 | SW-13;人腎上腺皮質癌細胞;SW 13; Scott and White No. 13 |
來源信息 | 人源;女性,55歲;腎上腺皮質;Ⅳ級原發性小細胞癌 |
建立時間/代數 | 1971年8月;10代以內 |
生長特性形態 | 貼壁生長;上皮細胞樣 |
安全等級 | 1級 |
培養基 | L15 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:100%空氣;溫度:37℃;不需要CO₂ |
特別提醒 | 不能通入CO₂,使用不透氣密封蓋T25培養瓶,每天換氣1-2次 |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
染色體信息 | 模態數63;範圍45-65;約10%細胞有一對雙著絲粒染色體 |
病毒易感性 | 人脊髓灰質炎病毒1;水皰性口炎病毒 |
同工酶 | G6PD,B型 |
電鏡特征 | 具有許多燈泡狀間隙連接(BGJ) |
支原體檢測 | 無 |
細胞規格 | 1x10^6 cells/T25或1mL凍存管; |
保藏機構 | 中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心 |
儲存條件 | -20℃ |
培養教程
SW-13人腎上腺皮質小細胞癌細胞培養教程
SW-13細胞複蘇
配製L15培養(yang) 基,加入10%胎牛血清(FBS)和1%青黴素-鏈黴素(P/S)。
將培養(yang) 基預熱至37℃。
從(cong) 液氮罐或-80℃冰箱中取出SW-13細胞凍存管。
在37℃水浴中迅速解凍(約1分鍾),同時輕輕搖晃。
用75%酒精消毒SW-13細胞凍存管外表麵。
將解凍後的SW-13細胞懸液轉移到含有5 mL預熱培養(yang) 基的15 mL離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾。
吸棄上清液,用2 mL完全培養(yang) 基輕輕重懸SW-13細胞沉澱。
將重懸的SW-13細胞加入T25培養(yang) 瓶中。
做好標記後,將培養(yang) 瓶放入37℃的培養(yang) 箱中,保持100%空氣環境。
24小時後,觀察SW-13細胞的貼壁情況。
吸棄舊培養(yang) 基,加入新鮮預熱的完全培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。
SW-13細胞培養
培養(yang) 基:L15 + 10% FBS + 1% P/S。
培養(yang) 環境:37℃,100%空氣環境,無需CO₂。
注意:SW-13細胞不需要CO₂環境。若無法提供100%空氣環境的培養(yang) 箱,可使用不透氣密封蓋的T25培養(yang) 瓶,並每天換氣1-2次。
日常維護:
每2-3天更換一次培養(yang) 基。
觀察SW-13細胞的形態和生長狀態,確保其健康。
SW-13細胞傳代
傳(chuan) 代準備:預熱完全培養(yang) 基至37℃;準備0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液。
吸棄培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。
用PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)洗滌SW-13細胞一次。
加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育2-5分鍾,觀察SW-13細胞是否開始脫落。
加入預熱的完全培養(yang) 基以中和胰蛋白酶。
輕輕吹打SW-13細胞,使其形成單細胞懸液。
以1000 rpm離心5分鍾,吸棄上清。
用完全培養(yang) 基重懸SW-13細胞,以1:3或1:4的比例進行傳(chuan) 代。
SW-13細胞凍存
凍存準備:配製凍存液:90%完全培養(yang) 基 + 10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)。
收集對數生長期的SW-13細胞,按傳(chuan) 代步驟處理。
重懸SW-13細胞於(yu) 凍存液中,細胞密度約為(wei) 1x10⁶ cells/mL。
分裝到凍存管中,每管1 mL。
逐步降溫:先放置於(yu) -80℃冰箱中4-6小時,然後轉移到液氮罐中長期保存。
培養環境對SW-13細胞基因表達的潛在影響
氣相條件:SW-13細胞需要100%空氣環境,不能通入CO₂。這種氣相要求可能會(hui) 影響SW-13細胞的代謝和相關(guan) 基因的表達。
培養(yang) 基成分:使用L15培養(yang) 基加10% FBS和抗生素。培養(yang) 基中的生長因子和營養(yang) 成分可能會(hui) 調節SW-13細胞的生長相關(guan) 基因表達。
溫度:37℃的培養(yang) 溫度可能會(hui) 影響SW-13細胞中熱休克蛋白等溫度敏感基因的表達。
不同時間點的SW-13細胞培養需求變化
複蘇階段:剛複蘇的SW-13細胞可能需要更頻繁的換液和觀察,以確保SW-13細胞成功貼壁和生長。
對數生長期:SW-13細胞生長旺盛,可能需要更多的營養(yang) 供應,建議每2-3天換一次培養(yang) 基。
傳(chuan) 代前:SW-13細胞密度較高時,可能需要更頻繁地換液,以維持培養(yang) 環境的穩定。
長期培養(yang) :定期檢查SW-13細胞的形態和生長狀態,以確保SW-13細胞特性的穩定性。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 (ATCC=CCL-105; Cosmic-CLP=909744; DepMap=ACH-001401; KCLB=10105) |
12 (CCRID; CLS=300349; ECACC=87031801; IZSLER=BS TCL 62; JCRB=JCRB9069) | |
D2S1338 | 19,20 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 (CCRID; CLS=300349; DepMap=ACH-001401; IZSLER=BS TCL 62; JCRB=JCRB9069; KCLB=10105) |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 31,32.2 |
FGA | 20 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 7,15 |
TH01 | 7 (JCRB=JCRB9069) |
7,8 (ATCC=CCL-105; CCRID; CLS=300349; Cosmic-CLP=909744; DepMap=ACH-001401; ECACC=87031801; IZSLER=BS TCL 62; KCLB=10105) | |
TPOX | 8 |
vWA | 17,19 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
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