
PLC/PRF/5細胞(人肝癌亞(ya) 力山大細胞)
- 來源:肝癌;亞(ya) 力山大細胞
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:plcprf5細胞能夠分泌乙型肝炎病毒表麵抗原(HBsAg)
PLC/PRF/5細胞係是一種人肝癌細胞係,源自一名24歲非洲男性肝癌患者的原發性肝細胞癌組織。plcprf5細胞係常用於(yu) 癌症、傳(chuan) 染病及性傳(chuan) 播疾病的研究。
PLC/PRF/5細胞被稱為(wei) "亞(ya) 力山大細胞",此名稱可能與(yu) 最初進行細胞分離的研究人員或實驗室有關(guan) 。
plcprf5細胞特征特性
plcprf5細胞能夠分泌乙型肝炎病毒表麵抗原(HBsAg)
plcprf5細胞保留了許多與(yu) 原發性肝癌相關(guan) 的基因表達特征
plcprf5細胞能夠穩定傳(chuan) 代,保持其特性
plcprf5細胞最初受支原體(ti) 汙染,經BM-cycline處理後已淨化
plcprf5細胞參數表
細胞名稱 | PLC/PRF/5細胞(人肝癌亞力山大細胞) |
細胞別稱 | PLC-PRF-5; PLC PRF 5; PLC/PRF5; PLCPRF5; PLC-8024; PLC8024; PLC; Alexander cells;Alexander; Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5 |
細胞類型 | 人肝癌亞力山大細胞 |
原始來源 | 24歲非洲男性肝癌患者的原發性肝細胞癌組織 |
支原體狀態 | 經BM-cycline處理,已清除支原體汙染 |
形態特性 | 上皮細胞樣,多角形;貼壁生長 |
培養基 | PLC/PRF/5細胞專用培養基,已包含細胞生長所需的各種成分 |
培養環境 | 溫度:37°C;CO2濃度:5%;傳代方式:貼壁傳代 |
分泌與表達 | 分泌乙型肝炎病毒表麵抗原(HBsAg);保留原發性肝癌相關基因表達特征 |
細胞質量 | 含量:>1x10^6細胞數;STR鑒定; |
研究用途 | 癌症、傳染病、性傳播疾病研究;細胞培養、轉染、藥物篩選等實驗 |
儲存要求 | 儲存溫度:-196°C(液氮);運輸溫度:幹冰 |
生物安全 | 生物安全等級:BSL-2 |
穩定性 | 能夠穩定傳代 |
培養教程
PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞培養教程
複蘇步驟
將PLC/PRF/5細胞凍存管從(cong) 液氮罐中取出,迅速放入37°C水浴中,輕輕搖動約1-2分鍾,直至PLC/PRF/5細胞完全融化。
用75%酒精消毒凍存管外表麵後,在無菌操作台上打開管蓋,將PLC/PRF/5細胞懸液轉移到預先準備好的含有10 ml完全培養(yang) 基的離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液。
用新鮮的完全培養(yang) 基輕輕重懸PLC/PRF/5細胞沉澱,確保混勻。
將PLC/PRF/5細胞懸液轉移到PLC/PRF/5細胞培養(yang) 瓶中,加入10-15 ml的完全培養(yang) 基,置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
傳代步驟
當PLC/PRF/5細胞匯合度達到70-80%時,準備進行傳(chuan) 代。
小心吸去PLC/PRF/5細胞培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。
用PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌PLC/PRF/5細胞一次,以去除殘留的培養(yang) 基。
加入適量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,放入37°C培養(yang) 箱中消化1-3分鍾,觀察PLC/PRF/5細胞是否脫落。
當大部分PLC/PRF/5細胞脫落時,加入完全培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打使PLC/PRF/5細胞形成單細胞懸液。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液,用新鮮培養(yang) 基重懸PLC/PRF/5細胞。
按1:3或1:4的比例將PLC/PRF/5細胞接種到新的培養(yang) 瓶中,加入適量完全培養(yang) 基,放入培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
凍存步驟
按傳(chuan) 代步驟收集PLC/PRF/5細胞。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液,用含10% DMSO的凍存培養(yang) 基重懸PLC/PRF/5細胞。
將PLC/PRF/5細胞懸液分裝到凍存管中,每管1-2 ml。
將PLC/PRF/5細胞凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80°C冰箱中過夜。
次日將PLC/PRF/5細胞凍存管轉移到液氮罐中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D1S1656 | 14 |
D2S441 | 12,14 |
D2S1338 | 19 (CLS=300315; PubMed=25877200) |
19,22 (ATCC=CRL-8024; CCRID) | |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 12 |
D6S1043 | 13,21 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 13,16 |
D12S391 | 15,20 (CCRID) |
20 (CLS=300315; PubMed=25877200) | |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 11,13 |
D21S11 | 30,33.2 |
FGA | 19.2,25 |
Penta D | 6,10 |
Penta E | 10,16 |
TH01 | 7,8 (CLS=300315; ECACC=85061113; JCRB=IFO50069; JCRB=JCRB0406; KCLB=28024; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
8 (ATCC=CRL-8024; CCRID) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15,16 |
參考文獻
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