snu398細胞係（人肝癌細胞）

SNU398細胞係於(yu) 1990年由J.-G. Park及其同事從(cong) 一名韓國患者的間變性肝細胞癌中提取，患者接受了脂質偶聯阿黴素和絲(si) 裂黴素C的經導管動脈栓塞治療。
SNU398細胞最初在含有5%熱滅活胎牛血清的ACL-4培養(yang) 基中培養(yang) ，建立細胞係後，培養(yang) 物被轉移至含有10%熱滅活胎牛血清的RPMI 1640培養(yang) 基中繼續培養(yang) 。

snu398細胞係特性特征

• SNU398細胞是非整倍體(ti) ，具有模態編號62。

• 抗原表達特征：血型：O型；Rh因子：陽性

• 形態學特征：培養(yang) 的細胞呈多核狀態、保留原始腫瘤中胞漿內(nei) 透明球的產(chan) 生特性

• 分子生物學特征：通過Southern blot雜交技術檢測到乙型肝炎病毒（HBV）DNA、未觀察到HBV基因組RNA的表達

• 原發腫瘤特征：單發結節，伴有結節周圍延伸、組織學上歸類為(wei) 小梁型

snu398細胞係參數表

snu398細胞係培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出含1 mL SNU398細胞懸液的凍存管，迅速轉移至37℃的水浴中。
  

• 在水浴中輕輕搖動凍存管，直至SNU398細胞完全解凍（約1-2分鍾）。

• 將解凍後的SNU398細胞懸液轉移至含4 mL培養(yang) 基的離心管中，輕輕混合。
  

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2 mL培養(yang) 基，輕輕吹打混勻SNU398細胞。

• 將SNU398細胞懸液轉移到含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，或加入6 cm培養(yang) 皿中，培養(yang) 過夜。
  

• 第二天更換培養(yang) 基，並檢查SNU398細胞密度。

細胞傳代

• 當SNU398細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清液，用無鈣鎂離子的PBS潤洗SNU398細胞1-2次。

• 加入1 mL消化液（0.25% Trypsin-0.02% EDTA），覆蓋SNU398細胞。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中，消化1-3分鍾，觀察SNU398細胞的消化情況。

• 當SNU398細胞大部分變圓並脫落時，取出培養(yang) 瓶，輕輕敲打瓶壁以幫助細胞脫落。

• 加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打混勻SNU398細胞。

• 將SNU398細胞懸液轉移至無菌離心管，1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2 mL培養(yang) 基，輕輕吹打混勻SNU398細胞。

• 按1:2比例將SNU398細胞懸液分至新的培養(yang) 皿或瓶中，繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 收集狀態良好的SNU398細胞，將細胞懸液轉移至無菌離心管。
  

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液，用PBS清洗SNU398細胞一次。

• 棄盡PBS後進行SNU398細胞計數。

• 根據SNU398細胞數量加入無血清凍存液，使細胞密度達到5×10^6~1×10^7/mL，輕輕混勻。
  

• 每支凍存管中加入1 mL SNU398細胞懸液，做好標識。

• 將凍存管置於(yu) -80℃冰箱，24小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。

• 記錄SNU398細胞凍存管位置以便後續取用。