
SNU-182細胞(人肝癌細胞)
- 來源:肝
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Southern blot雜交可檢測到乙型肝炎病毒(HBV)DNA
SNU-182細胞係於(yu) 1989年建立,來源於(yu) 一位24歲的韓國男性肝癌患者。SNU-182細胞係是在患者接受細胞毒性治療前,從(cong) 其原發性肝細胞癌組織中提取。
SNU-182細胞是非整倍體(ti) ;模態數=70;含有單個(ge) 細胞核。
SNU-182細胞特征特性
Southern blot雜交可檢測到乙型肝炎病毒(HBV)DNA
SNU-182細胞不表達HBV基因組RNA
表達特征:抗原表達:O型血;Rh陽性
形態學特征:原發腫瘤為(wei) 單發結節;組織學上主要呈現小梁型和小腺泡型結構;
病毒學特征:攜帶HBV DNA,但不表達HBV基因組RNA;此特征表明細胞可能來自HBV感染相關(guan) 的肝癌患者,但病毒處於(yu) 非活躍狀態。
SNU-182細胞參數表
細胞名稱 | SNU-182細胞(人肝癌細胞) |
來源信息 | 人類;24歲;男性;亞洲(韓國) |
組織類型 | 肝癌 |
細胞特性 | 上皮細胞樣;貼壁生長 |
核型 | 非整倍體;模態染色體數70 |
抗原表達 | O型血;Rh陽性 |
病毒狀態 | HBV DNA陽性;HBV RNA陰性 |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 37℃;95%空氣+5%CO2;濕度70-80% |
傳代方法 | 1:2至1:4;每周2-3次 |
凍存條件 | 90%FBS+10%DMSO;梯度降溫;液氮儲存 |
安全等級 | 2級 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25瓶或1mL凍存管 |
質量控製 | 無支原體;複蘇存活率>90%;STR檢測通過 |
保藏信息 | ATCC;編號CRL-2235 |
生長特性 | 倍增時間約46小時 |
運輸方式 | 複蘇發貨(T25瓶)或凍存發貨(幹冰) |
用途限製 | 僅供科研使用 |
培養教程
SNU-182人肝癌細胞培養教程
SNU-182細胞複蘇
將含1 mL SNU-182細胞懸液的凍存管在37℃水浴中快速解凍。
加入4 mL預熱的完全培養(yang) 基,混合均勻。
以1000 rpm離心3分鍾,棄上清。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸SNU-182細胞。
將細胞懸液轉移到含6-8 mL完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。
在37℃條件下培養(yang) 過夜,次日觀察SNU-182細胞狀態並更換培養(yang) 基。
SNU-182細胞傳代
當SNU-182細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
首次傳(chuan) 代建議1:2比例,之後根據細胞生長情況調整為(wei) 1:2至1:4;每周傳(chuan) 代2-3次。
棄舊培養(yang) 基,PBS洗滌1-2次。
加入適量胰酶,37℃消化3-5分鍾。
加入等體(ti) 積培養(yang) 基終止消化。
以1000 rpm離心3-5分鍾,棄上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸SNU-182細胞,按所需比例接種到新培養(yang) 瓶中。
SNU-182細胞凍存
使用無血清凍存液;調整SNU-182細胞密度至1×10^6 cells/mL;將細胞懸液分裝到凍存管中。
使用程序降溫盒,在-80℃冰箱中保存過夜;次日轉入液氮中長期保存。
培養基優化建議
基礎培養(yang) 基: 可嚐試使用DMEM或特定的肝細胞培養(yang) 基以提高SNU-182細胞的生長率。
血清濃度: 增加血清濃度至15-20%,或嚐試使用特殊處理的血清(如胎牛血清替代物)來促進SNU-182細胞的生長。
生長因子: 添加表皮生長因子 (EGF) 或肝細胞生長因子 (HGF) 可能會(hui) 刺激SNU-182細胞的生長。
添加劑: 增加丙酮酸鈉至2%,提高穀氨酰胺濃度,添加非必需氨基酸 (NEAA)。
抗氧化劑: 考慮添加N-乙酰半胱氨酸 (NAC) 或維生素C,以減少氧化應激,提高SNU-182細胞的生存率。
pH值調整: 確保培養(yang) 基pH在7.2-7.4之間,根據SNU-182細胞的生長情況進行微調。
抗生素濃度: 如果可能,考慮減少或去除青黴素-鏈黴素,因為(wei) 長期使用可能會(hui) 影響SNU-182細胞的生長。
特殊補充物: 可以考慮添加肝細胞特異性的補充物,如胰島素、轉鐵蛋白、硒等,以促進SNU-182細胞的健康生長。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D3S1358 | 16,18 (PubMed=25877200) |
17 (KCLB=00182) | |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 11,14 (AddexBio=C0015003/4954; ATCC=CRL-2235; Cosmic-CLP=1240216; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
14 (KCLB=00182) | |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 16 |
D21S11 | 29,34.2 |
FGA | 22,24 |
Penta D | 9 |
Penta E | 20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 (AddexBio=C0015003/4954; ATCC=CRL-2235; Cosmic-CLP=1240216; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
17,18 (KCLB=00182) |
參考文獻
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