貨號：STM-CL-5227 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

MET5A細胞（人間皮細胞）

來源：膜間皮細胞；SV40轉化
細胞特征：貼壁細胞，上皮細胞樣
培養(yang) 基：M199+10% FBS+ 0.5% ITS-G（100×）+3.3 nM EGF+400 nM hydrocortisone+1%P/S
其他：經過SV40轉化的永生化細胞係

Tags：間皮細胞

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價(jia) 格：￥ 1,450.00

提供STR鑒定報告

MET-5A細胞係源自正常成人胸膜液中的間皮細胞，轉染過程中使用了含有SV40病毒早期區基因和RSV長末端重複序列（LTR）的pRSV-T質粒，采用DNA鍶磷酸鹽共沉澱法。轉染後的細胞進行了連續傳(chuan) 代，並每周更換培養(yang) 基，經過28天後，對轉化的克隆進行了獨立培養(yang) 。

pRSV-T質粒的關(guan) 鍵作用是通過SV40大T抗原抑製細胞周期調控蛋白，如p53和pRb，使MET-5A細胞能夠逃過正常的細胞周期檢查點，保持持續的增殖能力，從(cong) 而實現了細胞的永生化。

MET-5A細胞表現出間皮細胞的特征，包括對波形蛋白（vimentin）、細胞角蛋白（cytokeratin）和SV40T抗原的陽性染色表達。這些細胞同時表達間皮細胞和上皮細胞的某些標記物，反映了它們(men) 的間皮細胞起源和上皮樣形態。

MET5A細胞特性

特殊性質：經過SV40轉化的永生化細胞係，但在免疫抑製小鼠中未顯示致瘤性
體(ti) 外特性：能在半固體(ti) 培養(yang) 條件下形成集落
MeT-5A細胞對波形蛋白、角蛋白和SV40T抗原呈陽性染色。
轉染MET-5A細胞使用了pRSV-T質粒，含有SV40病毒的早期區基因和RSV長末端重複序列（LTR）。
轉染方法采用了DNA鍶磷酸鹽共沉澱法。

MET5A細胞參數表

細胞名稱	MET5A細胞（人間皮細胞）
細胞別稱	MeT5A; MeT5A; Met5A; MET5A; MesothelialcellstransfectedwithpRSV-T5A)
物種來源	人源(Homo sapiens); 非癌個體胸膜液
細胞信息	間皮來源上皮樣細胞係; 上皮細胞樣，貼壁生長; 約1990年
轉染載體/基因/啟動子	pRSV-T質粒; SV40早期區基因; RSV長末端重複序列(LTR)
轉染方法/染色體	DNA鍶磷酸鹽共沉澱法; 可能為非整倍體（需驗證）
基礎培養基	M199基礎培養基(86%); 特級胎牛血清(10%); 青黴素-鏈黴素(1%)
添加劑	ITS(1%); HEPES(2%); NaHCO3(1.5g/L)
生長因子	氫化可的鬆(400 nM); 重組人EGF(3.3 nM)
培養環境	37℃; 5% CO2; 70-80%濕度; pH 7.2-7.4（需驗證）
生長特性	強貼壁性; 首次傳代1:2; 70-80%匯合度時傳代
倍增時間	約24-48小時（需驗證）
凍存液/溫度/複蘇率	90%血清+10%DMSO; -80℃短期/液氮長期; >80%存活（需驗證）
STR鑒定/細胞標記物	已通過; 波形蛋白(+), 細胞角蛋白(+), SV40 T抗原(+)
其他可能標記物	鈣網蛋白(+), 中間絲蛋白(+)（需驗證）
主要用途	間皮細胞生物學研究; 化學和生物製劑篩選; 毒理學研究; 間皮瘤研究（對照）
體外特性/轉染效率	半固體培養可形成集落; 轉染效率中等（需驗證）
細胞因子/酶/粘附分子	IL-6, IL-8; MMP-2, MMP-9; ICAM-1, VCAM-1（均需驗證）
生物安全等級/致瘤性/病毒檢測	BSL-1; 免疫抑製小鼠中無致瘤性; 已進行病毒檢測（結果需驗證）
細胞數量/規格	>1x10^6個細胞/包裝; T25瓶或1mL凍存管
永生化狀態/細胞周期	SV40轉化永生化; 持續增殖，繞過正常細胞周期檢查點
細胞壽命/藥物敏感性	理論上無限傳代; 對特定化療藥物的敏感性（需驗證）
應激反應/基因表達	氧化應激反應可能異於kaiyun网站安全; 基因表達譜可能有差異（需驗證）
主要用途	前列腺癌研究，藥物篩選，雄激素信號通路研究，EMT研究
細胞庫編號	ATCC: CRL-1740; ECACC: 89110211; BCRJ: 0149; BCRC: 60088

培養教程

MET5A人間皮細胞培養教程

MET-5A細胞複蘇步驟

將凍存管在37°C水浴中快速解凍（1-2分鍾）。
將解凍的MET-5A細胞懸液轉移到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中。
以1000 RPM離心3-5分鍾。
棄上清，用完全培養(yang) 基重懸MET-5A細胞。
將MET-5A細胞懸液轉移到含6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。
在37°C下培養(yang) 過夜。
次日觀察MET-5A細胞生長情況和密度。

MET-5A細胞傳代步驟

當MET-5A細胞密度達80-90%時進行傳(chuan) 代。
棄培養(yang) 上清，用PBS洗滌1-2次。
加入0.25% 胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液（T25瓶用1-2mL）。
37°C消化1-2分鍾，觀察MET-5A細胞脫落情況。
加入3-4mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
以1000 RPM離心3-5分鍾。
棄上清，用1-2mL培養(yang) 液重懸MET-5A細胞。
按1:2比例將MET-5A細胞分到新培養(yang) 瓶中。
添加6-8mL新鮮完全培養(yang) 基。
後續傳(chuan) 代可根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

STR鑒定及相關

Amelogenin	X,Y
CSF1PO	10,12
D2S1338	18,19
D3S1358	17,18
D5S818	12
D7S820	10
D8S1179	12,13
D13S317	11,13
D16S539	12
D18S51	15,23
D19S433	15
D21S11	31.2
FGA	22,23
Penta D	10,11
Penta E	10,16
TH01	6,9.3
TPOX	8 (ATCC=CRL-9444)
TPOX	8,11 (IZSLER=BS CL 214)
vWA	15,18