SK-MEL-1細胞（人皮膚黑色素瘤細胞）

SK-MEL-1細胞係由Herbert F. Oettgen及其同事於(yu) 1966年從(cong) 一名29歲的白人男性惡性黑色素瘤患者的胸導管中分離。
SK-MEL-1細胞係代表了已發生轉移的黑色素瘤細胞，具有顯著的惡性特性，且SK-MEL-1細胞係具有淋巴係統轉移的能力。SK-MEL-1細胞係表現出黑色素基因的表達。

SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細胞特性特征

• 黑色素生產(chan) ：SK-MEL-1細胞能夠產(chan) 生黑色素。電子顯微鏡檢測顯示，細胞中的色素顆粒與(yu) 自身合成和吞噬作用相關(guan) 。
  

• 抗原性：在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體(ti) 內(nei) 發現了針對SK-MEL-1細胞的抗體(ti) ，具有特定的抗原表達模式。

• 血型：A型，Rh陽性。

• 生長特性：SK-MEL-1細胞呈懸浮生長，細胞形態為(wei) 球形。
  

• 致瘤性：在裸鼠中可形成色素沉著的惡性黑色素瘤，在皮質酮處理的倉(cang) 鼠頰囊中也可形成腫瘤。
  

• 轉移性：通過淋巴係統進行轉移。

• 染色體(ti) ：SK-MEL-1細胞的染色體(ti) 數目為(wei) 53~73，性染色體(ti) 為(wei) XY。

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；PGM1，1；PGM3，1

SK-MEL-1細胞參數表

SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細胞培養教程

SK-MEL-1細胞複蘇

• 將含有1 mL SK-MEL-1細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速解凍，注意避免水進入凍存管。
  

• 解凍後立即用75%酒精擦拭管外表麵，置於(yu) 無菌操作台中。

• 將解凍的SK-MEL-1細胞懸液轉移至含有4-6 mL預熱完全培養(yang) 基的離心管中。
  

• 以1000 RPM離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2 mL預熱完全培養(yang) 基重懸SK-MEL-1細胞，輕輕吹打混勻。
  

• 將細胞懸液轉移至含有5-6 mL預熱完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
  

SK-MEL-1細胞培養

• 培養(yang) 基：使用90% MEM（含NEAA）+ 10% FBS + 1% PS，或DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S。

• 培養(yang) 條件：氣相：95%空氣 + 5% CO2。溫度：37℃。

• 換液頻率：每2-3天換液一次。

SK-MEL-1細胞傳代

• 當SK-MEL-1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2-1:4。

• 棄去培養(yang) 上清，用PBS潤洗SK-MEL-1細胞1-2次。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 輕敲培養(yang) 瓶後加入少量培養(yang) 基終止消化，離心後按1:2-1:4比例分到新的培養(yang) 瓶中。

• 傳(chuan) 代周期：24-48小時。

SK-MEL-1細胞凍存

• 待SK-MEL-1細胞生長狀態良好時進行凍存。
  

• 將SK-MEL-1細胞懸液按比例分裝到凍存管中。

• 逐步降溫至-80℃，然後轉移至液氮中長期保存。

其他注意事項

• 質量檢測：SK-MEL-1細胞的細菌、真菌、支原體(ti) 檢測均為(wei) 陰性。

• 倍增時間：SK-MEL-1細胞的倍增時間約為(wei) 100小時。

• 致瘤性：SK-MEL-1細胞在裸鼠中形成色素性惡性黑色素瘤；可的鬆處理的倉(cang) 鼠頰囊也會(hui) 形成腫瘤。

• 抗原表達：SK-MEL-1細胞表達A型血抗原和Rh+抗原。

SK-MEL-1細胞在長時間培養中的常見變異

• SK-MEL-1細胞形態變化：SK-MEL-1細胞通常呈球形懸浮生長，長期培養(yang) 可能導致細胞形態發生變化，如細胞聚集或形態不均一。

• 生長速率變化：SK-MEL-1細胞的倍增時間約為(wei) 100小時，長期培養(yang) 可能導致生長速度減慢，出現細胞衰老或生長停滯現象。

• 染色體(ti) 不穩定性：SK-MEL-1細胞的染色體(ti) 數目為(wei) 53-73，長期培養(yang) 可能加劇染色體(ti) 的不穩定性，導致染色體(ti) 數目和結構的進一步變異。

• 黑色素生產(chan) 變化：SK-MEL-1細胞能夠產(chan) 生黑色素，但在長期培養(yang) 中，黑色素的生產(chan) 量可能會(hui) 發生變化，出現減少或不均勻的情況。

• 基因表達變化：長期培養(yang) 可能導致SK-MEL-1細胞的基因表達譜改變，影響細胞功能和特性。

• 支原體(ti) 汙染：盡管SK-MEL-1細胞經過支原體(ti) 檢測，但長期培養(yang) 中仍有可能出現支原體(ti) 汙染，影響正常生長和實驗結果。

SK-MEL-1細胞的抗體反應情況

• 惡性黑色素瘤患者：在63%的惡性黑色素瘤患者體(ti) 內(nei) 發現了針對SK-MEL-1細胞的抗體(ti) ，表明這些細胞在黑色素瘤患者中具有較強的免疫原性。

• 其他疾病患者：在10%的其他疾病患者體(ti) 內(nei) 發現了針對SK-MEL-1細胞的抗體(ti) ，顯示出一定的交叉免疫反應性。

• 抗原表達：SK-MEL-1細胞表達A型血抗原和Rh陽性抗原，這些抗原可能在免疫反應中發揮作用。