SK-MEL-28細胞（人惡性黑色素瘤細胞）

SK-MEL-28細胞是一種人類惡性黑色素瘤細胞係，源自一名51歲男性患者的皮膚組織中的黑素細胞。
SK-MEL-28細胞係是一種亞(ya) 四倍體(ti) 人類細胞係，模態染色體(ti) 數為(wei) 90，存在於(yu) 50%的細胞中，倍性較高的細胞比例為(wei) 3.6%。
SK-MEL-28細胞係具有非常複雜的核型，大多數細胞共有18條或更多標記染色體(ti) 。特定染色體(ti) 異常包括der(1)t(1;2)(p36.1;q21)、del(1)(q2101)等，每個(ge) 細胞有兩(liang) 個(ge) 拷貝；t(2p14q)、t(3q7p)等，每個(ge) 細胞隻有一個(ge) 拷貝。Y/常染色體(ti) 易位標記der(20)t(Y;20)(q11.23;q13.3)每個(ge) 細胞有兩(liang) 個(ge) 拷貝。每個(ge) 細胞有兩(liang) 條正常的X染色體(ti) ，正常的Y染色體(ti) 、N1和N11缺失，N19每個(ge) 細胞有五個(ge) 或更多拷貝。

SK-MEL-28細胞特性特征

• 致瘤性：SKMEL28細胞能夠在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成惡性黑色素瘤（大圓細胞型）。
  

• 抗原表達：A型血；Rh+；HLA A11、A26、B40、DRw4。

• 同工酶：AK-1，1-2；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；PGM1，1；PGM3，1。

• 基因特征：SKMEL28細胞表達突變型B-Raf (V600E)和野生型N-Ras。

• SK-MEL-28細胞係具有輕度色素沉著特性，保留了原發腫瘤的許多特征。
  

SK-MEL-28細胞參數表

SK-MEL-28人惡性黑色素瘤細胞培養教程

SK-MEL-28細胞複蘇

• 將凍存管在37°C水浴中快速解凍。

• 加入4 mL預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混合均勻。

• 1000 rpm離心3分鍾，棄去上清液。

• 重懸SK-MEL-28細胞於(yu) 1-2 mL新鮮培養(yang) 基中。

• 將細胞懸液轉移至培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中。

• 添加適量培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

SK-MEL-28細胞傳代

• 當SK-MEL-28細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 用PBS輕柔清洗細胞1-2次。

• 加入1 mL 0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA消化液。

• 37°C孵育1-2分鍾，觀察細胞脫落情況。

• 加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸SK-MEL-28細胞。

• 按1:2或1:3比例接種到新的培養(yang) 容器中。

• 每周傳(chuan) 代2-3次。

SK-MEL-28細胞凍存

• 使用無血清凍存液或含5% DMSO + 20% FBS的基礎培養(yang) 基。

• 將SK-MEL-28細胞懸液以1×10^6 cells/mL的密度分裝到凍存管中。

• 使用程序降溫或-80°C冰箱緩慢降溫。

• 24小時後轉移到液氮中長期保存。

傳代比例調整建議

• 標準傳(chuan) 代比例：SK-MEL-28細胞的標準傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2至1:3，每周傳(chuan) 代2-3次，這一比例適合大多數情況。

• 提高細胞生長速度：可嚐試將傳(chuan) 代比例調整為(wei) 1:3至1:4，以提供更多生長空間。需要密切觀察SK-MEL-28細胞的狀態。

• 靈活調整：根據SK-MEL-28細胞的生長情況調整傳(chuan) 代頻率和比例。細胞生長快時，增加傳(chuan) 代頻率或擴大比例；生長慢時，減少頻率或縮小比例。

• 首次傳(chuan) 代建議：使用1:2比例進行SK-MEL-28細胞的首次傳(chuan) 代，根據細胞適應情況逐步調整。

培養條件優化建議

• 培養(yang) 基選擇：除了EMEM或MEM基礎培養(yang) 基，還可以考慮使用專(zhuan) 門為(wei) SK-MEL-28細胞優(you) 化的培養(yang) 基，如ZM0997，以提高細胞活性。

• 培養(yang) 環境：確保培養(yang) 箱內(nei) 溫度保持在37°C，氣相條件穩定在95%空氣 + 5%二氧化碳。

• pH值維持：pH值保持在7.2-7.4，定期檢查並調整。

• 細胞密度控製：SK-MEL-28細胞在密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代，避免過度匯合或過於(yu) 稀疏。

• 換液頻率：根據SK-MEL-28細胞的生長速度和代謝情況，適當增加換液頻率，以保持培養(yang) 基新鮮。

• 添加生長因子：考慮在培養(yang) 基中添加特定生長因子或營養(yang) 補充劑，以促進SK-MEL-28細胞的生長和活性。

• 減少應激：在操作過程中，盡量減少SK-MEL-28細胞受到的機械和化學應激，如控製消化時間，輕柔操作等。