小鼠表皮黑色素細胞（kaiyun网站安全）

小鼠表皮黑色素細胞主要來源於(yu) 小鼠皮膚的基底層，具有重要的色素生成功能。表皮黑色素細胞源自胚胎期的神經脊，隨著發育的推進，它們(men) 遷移至皮膚表皮及毛囊區域。表皮是由複層扁平上皮構成，其功能主要是保護皮膚免受物理、化學和生物性損傷(shang) 。在表皮的結構中，黑色素細胞占據基底層的少量區域，約占該層細胞的5%左右。

黑色素細胞的主要功能是合成黑色素，這一過程通過酪氨酸的酶促反應進行，最終生成的黑色素不僅(jin) 為(wei) 皮膚和毛發提供色素，還在吸收紫外線方麵起著重要作用，從(cong) 而減輕紫外線對皮膚的損害。黑色素細胞在皮膚的免疫防禦中扮演著至關(guan) 重要的角色。異常的黑色素細胞功能或數量變化可能導致多種皮膚色素病理狀態的發生，如白癜風和黃褐斑等。

小鼠表皮黑色素細胞特性特征

• 基因表達：小鼠表皮黑色素細胞表達多種與(yu) 黑色素合成相關(guan) 的基因，如TYR（酪氨酸酶）、TYRP1（酪氨酸酶相關(guan) 蛋白1）和MITF（黑色素細胞誘導因子）。MITF在黑色素細胞的發育、存活和功能中起關(guan) 鍵作用。

• 黑色素合成：黑色素細胞通過酪氨酸的氧化和聚合過程合成黑色素，主要有真黑色素和現象黑色素兩(liang) 種類型。合成的黑色素不僅(jin) 賦予皮膚顏色，還能有效吸收紫外線，保護皮膚免受紫外線傷(shang) 害。
  

• 信號傳(chuan) 導：小鼠表皮黑色素細胞對外界刺激（如紫外線）的反應能力強，通過MC1R（黑色素刺激受體(ti) ）等信號通路調節黑色素的合成。

• 基因組特征：研究發現與(yu) 黑色素合成相關(guan) 的多個(ge) 基因如KLF6、COMMD3等在調節黑色素小體(ti) 成熟和功能方麵發揮重要作用。全基因組篩選揭示了169個(ge) 與(yu) 人類色素沉著相關(guan) 的功能基因，這些基因在小鼠模型中也有相應的表達。
  

• 遺傳(chuan) 變異：不同品種的小鼠在黑色素合成能力上存在差異，例如C57BL/6小鼠表現出較高的黑色素合成能力，而其他品種可能表現出不同的表型

小鼠表皮黑色素細胞參數表

原代小鼠表皮黑色素細胞培養教程

小鼠表皮黑色素細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出小鼠表皮黑色素細胞的凍存管。
  

• 準備37℃水浴鍋，確保水位不超過凍存管的蓋子，以避免凍存液溢出並汙染。

• 將凍存管迅速浸入水浴鍋中，並輕輕搖動以加速凍存液的融化。
  

• 待凍存液完全融化後，使用75%的酒精噴灑凍存管表麵，擦拭去除外部的液體(ti) 。

• 將細胞懸液轉移到預先準備好的含10 mL M254完全培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 用PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）重懸細胞，再次離心5分鍾，確保去除殘留的凍存液。

• 將細胞重懸於(yu) M254/HMGS培養(yang) 基中，準備接種。

• 將重懸後的細胞按適宜濃度接種到細胞培養(yang) 板中。
  

• 將細胞板放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中，靜置培養(yang) 。

• 次日檢查細胞的貼壁情況，並根據需要更換培養(yang) 基。

小鼠表皮黑色素細胞傳代

• 當小鼠表皮黑色素細胞的匯合度達到80%-90%時，準備進行細胞傳(chuan) 代。使用0.25%胰蛋白酶進行細胞消化。
  

• 吸出原培養(yang) 基，用PBS洗滌一次，去除殘餘(yu) 培養(yang) 基。
  

• 加入適量的0.25%胰蛋白酶溶液，輕輕搖動培養(yang) 瓶，使其均勻覆蓋細胞。

• 在37℃條件下消化1-2分鍾，觀察細胞是否開始脫落。

• 快速加入2 mL含10%胎牛血清的培養(yang) 基，終止消化過程，並輕輕吹打形成細胞懸液。
  

• 將細胞懸液轉移至離心管中，進行1000 rpm、5分鍾的離心處理，棄去上清液。

• 將小鼠表皮黑色素細胞重懸於(yu) 新鮮的完全培養(yang) 基中，並根據需要調整細胞濃度。
  

• 將細胞懸液接種至新的培養(yang) 瓶中，繼續在37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

小鼠表皮黑色素細胞凍存

• 收集小鼠表皮黑色素細胞密度達到70%-80%的培養(yang) 物，用於(yu) 凍存。
  

• 吸出培養(yang) 基並加入0.25%胰蛋白酶溶液進行消化，通常消化2分鍾。
  

• 觀察細胞開始脫落後，立即加入血清終止消化。

• 轉移細胞懸液至離心管中，進行1000 rpm、5分鍾離心，棄去上清液。

• 加入含10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO）的冷凍保存液，重懸小鼠表皮黑色素細胞。DMSO作為(wei) 冷凍保護劑，能夠減輕低溫對細胞的損傷(shang) 。
  

• 將重懸後的細胞懸液分裝至凍存管中，並做好標記。

• 將凍存管置於(yu) -80℃的冷凍盒中，以慢速冷卻方式冷凍過夜。第二天，將凍存管轉移至液氮罐中進行長期保存。