Hacat人永生化角質形成細胞

HaCaT細胞的來源是一位62歲的男性患者（患有黑色素瘤）的病灶外圍正常皮膚組織，是體(ti) 外自發轉化的永生化角質細胞。HaCaT細胞具有某些與(yu) 皮膚癌相關(guan) 的特性。hacat細胞係在體(ti) 外培養(yang) 中獲得了永生化特性，能夠無限期地增殖而不會(hui) 自然凋亡。

細胞的特性：

• HaCaT細胞的來源為(wei) 一位黑色素瘤患者的正常皮膚組織，具有某些與(yu) 黑色素瘤相關(guan) 的特性。

• 雖然細胞源自患有黑色素瘤的患者，但HaCaT細胞本身並不是腫瘤細胞，而是永生化的表皮細胞係，保留了正常皮膚細胞的特性和功能。

• HaCaT細胞因其在體(ti) 外分化和增殖的高能力而被用於(yu) 人表皮細胞角化的研究，並解決(jue) 了培養(yang) 壽命短和細胞係之間可能遇到的變異等問題。

• 它們(men) 表達角蛋白、角化細胞交聯外膜蛋白以及中間絲(si) 相關(guan) 蛋白，這些蛋白在角質形成和皮膚細胞分化中起著重要的作用。HaCaT細胞具有部分至完全分化的表型，這使得它們(men) 成為(wei) 研究皮膚生物學和臨(lin) 床應用的理想模型。
  

形態和特性

HaCaT細胞在培養(yang) 條件下呈現貼壁生長的形態，聚團生長，具有典型的上皮細胞樣式。該細胞傳(chuan) 代後出現間隙顆粒物和懸浮細胞，貼壁細胞狀態正常的情況下為(wei) 正常現象，不影響增殖和實驗。

Hacat人永生化角質形成細胞產品參數表

培養基本原理

HaCaT細胞在培養(yang) 基中通過提供足夠的營養(yang) 物質和適宜的環境條件進行增殖和分化。培養(yang) 基中的成分能夠模擬體(ti) 內(nei) 細胞生長環境，促進細胞的正常生長和維持。

培養基準備

• 培養(yang) 基成分：使用DMEM培養(yang) 基，添加10%胎牛血清和抗生素。

• 混合均勻：將培養(yang) 基組分混合均勻，過濾滅菌後存儲(chu) 於(yu) 4℃避光條件下備用。

細胞複蘇

• 解凍：將含有HaCaT細胞的凍存管放入37℃水浴中迅速解凍。

• 稀釋：將解凍後的細胞懸液加入培養(yang) 基中，並在1000RPM條件下離心5min。

• 移植：將上清液棄去，補加適量的完全培養(yang) 基，然後將細胞懸液移植至培養(yang) 瓶中過夜。

• 檢查：第二天檢查細胞密度，並進行換液。

細胞傳代

• 條件：當細胞密度達到80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 消化：用胰蛋白酶-EDTA消化液對細胞進行消化，消化時間約為(wei) 5-10分鍾。

• 傳(chuan) 代：按照1:3的比例將細胞轉移到新的培養(yang) 瓶中，完成傳(chuan) 代培養(yang) 過程。

培養注意事項

• 消化前清洗：消化前用PBS清洗細胞2-3次，保持培養(yang) 環境的潔淨。
  

• 均勻鋪板：鋪板時要均勻，避免局部生長過密難以消化的情況發生。

• 換液頻率：每2~3天換液1次，保持培養(yang) 環境的穩定。

• 消化時間控製：消化時間可能受細胞分化程度和融合度的影響，需根據實際情況進行控製。

凍存方法

• 添加劑：在培養(yang) 基中添加40%FBS和5%DMSO作為(wei) 凍存液。

• 冷凍保存：將細胞冷凍保存後，可在需要時解凍使用。