sk-mel-2細胞（人皮膚黑色素瘤細胞）

SK-MEL-2細胞係是一種源自60歲白人男性的多邊形形態細胞係。sk-mel-2細胞最初是從(cong) 患者惡性黑色素瘤的皮膚轉移組織中分離，尤其是大腿部位的轉移病灶。
SK-MEL-2細胞係從(cong) 亞(ya) 二倍體(ti) 到超四倍體(ti) 不等，並具有一些遺傳(chuan) 異常，例如雙著絲(si) 粒、次生縮窄和顯著的端粒標記。

sk-mel-2細胞相關特性特征

• 細胞遺傳(chuan) 不穩定性：文獻報道sk-mel-2細胞存在一定程度的不穩定性

• 致瘤性：sk-mel-2細胞在裸小鼠中可形成惡性黑色素瘤
  

• 轉移性：源自皮膚轉移灶，具有轉移潛能

• 抗原表達：A型血、Rh陽性

• 同工酶表達：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；PGM1，1；PGM3，1

• 基因突變：可能攜帶黑色素瘤相關(guan) 的基因突變（如BRAF、NRAS等）
  

• 基因表達：可能表達黑色素瘤相關(guan) 基因（如MITF、TYR等）

• 特殊變種：SK-MEL-2+luc：通過慢病毒轉染方式獲得，攜帶熒光素酶（Luc）基因

sk-mel-2人皮膚黑色素瘤細胞參數表

sk-mel-2人皮膚黑色素瘤細胞培養教程

SK-MEL-2細胞複蘇

• 將凍存管置於(yu) 37℃水浴中快速解凍。
  

• 解凍後立即加入4mL預熱的完全培養(yang) 基，並輕輕混合。

• 以1000rpm離心3分鍾，棄去上清。
  

• 用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸SK-MEL-2細胞。

• 將SK-MEL-2細胞懸液轉移到10cm培養(yang) 皿或T25培養(yang) 瓶中。
  

• 加入適量的完全培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

SK-MEL-2細胞傳代

• 當SK-MEL-2細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
  

• 加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液，確保覆蓋SK-MEL-2細胞。

• 在37℃下消化1-3分鍾，直至大部分SK-MEL-2細胞變圓並脫落。

• 加入2-3mL完全培養(yang) 基終止消化，輕輕混勻後轉入無菌離心管中。

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。
  

• 用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸SK-MEL-2細胞，確保細胞均勻分布。

• 按1:2或1:3的比例將SK-MEL-2細胞懸液分到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。
  

• 加入適量培養(yang) 基，繼續在培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 第三天換液並檢查SK-MEL-2細胞密度。
  

• 定期拍照記錄SK-MEL-2細胞生長狀態，確保細胞健康。

SK-MEL-2細胞凍存

• 使用無血清凍存液。
  

• 將SK-MEL-2細胞懸液分裝到凍存管中。

• 置於(yu) 液氮中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：所有步驟需在無菌條件下進行。

• 傳(chuan) 代比例：首次傳(chuan) 代建議1:2的比例，後續根據實驗需求調整。

• 細胞觀察：定期觀察SK-MEL-2細胞狀態，確保無支原體(ti) 、細菌、真菌等汙染。

• 培養(yang) 條件控製：嚴(yan) 格控製SK-MEL-2細胞培養(yang) 條件，包括溫度、CO2濃度和培養(yang) 基pH值。

• 顯微鏡觀察：建議使用低倍鏡（4X或5X物鏡）觀察傳(chuan) 代密度，使用10X和20X物鏡觀察SK-MEL-2細胞形態。

• 運輸細胞：收到SK-MEL-2細胞後需立即轉入液氮凍存或直接複蘇。若因運輸振動導致SK-MEL-2細胞脫落，需要離心回收。