B16F0細胞（小鼠黑色素瘤細胞） （暫不提供）

B16-F0小鼠黑色素瘤細胞係來源於(yu) C57BL/6J小鼠皮膚腫瘤，最早於(yu) 1954年由美國科學家在緬因州傑克遜實驗室建立。B16F0細胞係衍生自B16小鼠黑色素瘤細胞，具有高度黑色素生成的特性。B16-F0細胞可在體(ti) 外進行常規傳(chuan) 代培養(yang) ，適合用於(yu) 黑色素基因表達研究及其他分子生物學實驗。B16F0細胞支持3D細胞培養(yang) ，是進行細胞轉染的優(you) 良宿主。

B16F0細胞特性特征

• 基因表達：B16F0細胞在黑色素合成相關(guan) 基因（如酪氨酸酶TYR、微黑色素細胞轉錄因子MITF等）的表達上具有顯著特征。

• 黑色素產(chan) 生：B16F0細胞能夠產(chan) 生高濃度的黑色素，使其成為(wei) 研究黑色素相關(guan) 疾病（如黑色素瘤）的理想模型。

• 轉染能力：B16F0細胞適合用於(yu) 轉染實驗，能夠有效表達外源基因。

• B16-F0細胞廣泛用於(yu) 分子生物學研究，特別是在黑色素基因表達、細胞信號傳(chuan) 導、癌症生物學等領域。

• 由於(yu) 其良好的培養(yang) 特性和黑色素生成能力，B16-F0細胞常用於(yu) 藥物篩選和抗腫瘤治療的研究。

• B16-F0細胞適合用於(yu) 3D細胞培養(yang) ，能夠更好地模擬體(ti) 內(nei) 腫瘤微環境，為(wei) 腫瘤生物學研究提供更真實的實驗條件。

B16F0細胞參數表

B16F0小鼠黑色素瘤細胞培養教程

細胞複蘇

• 將凍存管置於(yu) 37℃水浴中，迅速解凍（約1-2分鍾）並輕輕搖動，以保證B16F0細胞的活性。
  

• 向解凍後的B16F0細胞懸液中加入4 mL完全培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 將懸液轉移至15 mL離心管中，以1000 rpm離心3分鍾，棄去上清液，保留B16F0細胞沉澱。

• 加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打以重懸B16F0細胞。

• 將B16F0細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，加入適量完全培養(yang) 基，培養(yang) 過夜。

• 在第三天更換培養(yang) 基，並在顯微鏡下檢查B16F0細胞的生長狀態。

細胞傳代

• 當B16F0細胞生長至80%-90%匯合時，準備進行傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液清洗B16F0細胞。

• 加入約1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，觀察B16F0細胞回縮變圓。

• 當B16F0細胞大部分回縮後，加入完全培養(yang) 基終止消化並吹打使細胞脫落。

• 將B16F0細胞懸液轉移至15 mL離心管中，1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用12 mL完全培養(yang) 基重懸B16F0細胞，並按1:2比例進行分瓶傳(chuan) 代。

• 將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ，觀察B16F0細胞貼壁和生長情況。

細胞凍存

• 將完全培養(yang) 基與(yu) 8% DMSO和20% FBS混合均勻，以製備B16F0細胞凍存液。
  

• 當B16F0細胞生長至80%匯合時，棄去培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液清洗B16F0細胞。

• 加入0.25%胰蛋白酶消化液，B16F0細胞回縮後加入完全培養(yang) 基終止消化。

• 將B16F0細胞懸液轉移至離心管中，1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用凍存液重懸B16F0細胞，輕輕混合均勻。

• 將B16F0細胞懸液分裝至凍存管中並做好標記。

• 將B16F0細胞凍存管放入-80℃冰箱中冷凍24小時，然後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• B16F0細胞操作需在無菌條件下進行，確保所有材料和設備的無菌性。

• B16F0細胞培養(yang) 過程中需密切觀察生長情況，若發現異常應及時處理。

• B16F0細胞僅(jin) 供科研使用，禁止用於(yu) 臨(lin) 床或其他非科研用途。

B16F0細胞培養基配方

• 標準培養(yang) 基
  DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S，是最常用的配方，適用於(yu) 多數B16F0細胞的實驗。

• 替代培養(yang) 基
  RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S，適用於(yu) 某些特殊實驗條件下的B16F0細胞培養(yang) 。

• 添加劑變異
  根據實驗需求，可添加L-穀氨酰胺、非必需氨基酸、維生素等，以優(you) 化B16F0細胞的生長和黑色素合成。

• 無血清培養(yang) 基
  對於(yu) 需減少血清影響的實驗，建議使用無血清培養(yang) 基，結合特定生長因子以維持B16F0細胞生長。