
nci-h460細胞(人大細胞肺癌細胞)
- 來源:肺;轉移灶:肋膜滲出癌;大細胞肺癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H460細胞表達的p53 mRNA水平與(yu) 正常肺細胞相當,且未顯示出DNA結構異常
NCI-H460細胞係是1982年由A.F. Gazdar從(cong) 一位男性大細胞肺癌患者的胸腔積液(胸水)中分離,來源於(yu) 肺癌的轉移灶,而非原發腫瘤。
NCI-H460細胞是亞(ya) 三倍體(ti) ,通常顯示模態染色體(ti) 數為(wei) 57條,偶爾會(hui) 出現58條。其染色體(ti) 組成複雜,包括多種標記染色體(ti) ,如der(9)t(1;9)(q21;p24)、der(7)t(9)(p11;p22)、t(10q14q)、der(16)t(7;16)(q11.23;q22),以及一個(ge) 小環和其他兩(liang) 條標記染色體(ti) 。高倍性頻率為(wei) 1.7%。NCI-H460細胞具有正常的X和Y染色體(ti) 拷貝,但9號、7號和16號染色體(ti) 每個(ge) 細胞隻有一個(ge) 拷貝。
NCI-H460細胞具有以下分子、表達和基因特征
p53表達:NCI-H460細胞表達的p53 mRNA水平與(yu) 正常肺細胞相當,且未顯示出DNA結構異常。
蛋白表達:角蛋白和波形蛋白纖維染色呈陽性;神經絲(si) 三聯體(ti) 蛋白染色呈陰性
同工酶:表現出AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1的模式
NCI-H460細胞在裸小鼠身上表現出明顯的致瘤性
nci-h460細胞參數表
細胞名稱 | nci-h460細胞(人大細胞肺癌細胞) |
細胞別稱 | NCI-H460; NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460 |
組織來源 | 人肺;轉移灶:肋膜滲出癌;大細胞肺癌 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
建係信息 | 1982年由A.F. Gazdar建立 |
生長形態 | 貼壁細胞 ;上皮細胞樣 |
培養條件 | 37°C, 5% CO2, 95% 空氣 |
推薦培養基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS |
傳代比例 | 1:3-1:4 |
換液頻率 | 2-3次/周 |
倍增時間 | 約23-60小時 |
染色體 | 通常57條,偶爾58條(亞三倍體);複雜核型,包括多種標記染色體 |
蛋白表達 | p53表達與正常肺細胞相當;角蛋白和波形蛋白纖維陽性;神經絲三聯體蛋白陰性 |
生物安全等級 | BSL-1 |
致瘤性 | 在裸鼠中有致瘤性 |
凍存條件 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
支原體檢測 | 陰性 |
同工酶模式 | AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1 |
保藏機構 | ATCC; HTB-177 / DSMZ; ACC-737 |
研究領域 | 肺癌研究、藥物篩選、信號通路研究、p53相關研究 |
培養教程
nci-h460人大細胞肺癌細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存NCI-H460細胞後,快速在37°C水浴中解凍(1-2分鍾)。
離心並棄上清,用預熱的完全培養(yang) 基重懸細胞,並轉移到培養(yang) 瓶中培養(yang) 。
細胞傳代
建議傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3-1:4,當NCI-H460細胞融合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。
使用PBS輕洗細胞後,加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液,37°C消化2-3分鍾,終止消化後再次離心並用新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞。
換液頻率
推薦每周2-3次換液,首次換液時保留一半原培養(yang) 液,加入一半新鮮培養(yang) 液。
細胞凍存
凍存液配方:55%基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO
細胞密度:約5 x 10^5 cells/ml
分裝細胞懸液到凍存管中,過夜置於(yu) -80°C,次日轉移至液氮中長期保存。
注意事項
NCI-H460細胞為(wei) 貼壁生長,呈上皮細胞樣形態,其倍增時間約為(wei) 23-60小時,根據實際情況調整傳(chuan) 代時間。
定期進行支原體(ti) 檢測,確保NCI-H460細胞無汙染。
使用STR鑒定方法確認NCI-H460細胞身份。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D1S1656 | 11,14.3 |
D2S441 | 11,11.3 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 9,10 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 12 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 21 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 13,15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 17 |
DYS391 | 11 |
FGA | 21,23 |
Penta D | 11,13 |
Penta E | 5 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |